不同測(cè)試儀器及冷藏時(shí)間對(duì)血乳酸測(cè)定值影響的比較

陳瑤,石智曄,郭子淵,魏良忠

(安徽省體育科學(xué)技術(shù)研究所,安徽 合肥 230001)

摘要：目的：①分析德國(guó)Senslab公司的Lactata-scout便攜式乳酸鹽分析儀與德國(guó)EKF診斷公司生產(chǎn)的EKF-C-Line GP型臺(tái)式乳酸鹽分析儀的測(cè)試結(jié)果，判斷兩種儀器能否相互替代使用；②對(duì)比不同冷藏時(shí)間血樣的乳酸值與采血即刻的測(cè)試結(jié)果，尋找進(jìn)行乳酸測(cè)試的血樣冷藏保存期限。方法：①同時(shí)使用便攜式與臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)量受試者運(yùn)動(dòng)后的血乳酸，分析兩組測(cè)量結(jié)果的相關(guān)性及一致性；②將冷藏后的血樣每隔1天使用臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)量其乳酸值，直至冷藏14天，將這些結(jié)果與采血當(dāng)天的測(cè)試結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果：①便攜式與臺(tái)式乳酸鹽分析儀的測(cè)量結(jié)果相互比較，配對(duì)t檢驗(yàn)得出兩種測(cè)試方法平均差值為-0.114 mmol/L，P>0.05，相關(guān)系數(shù)r=0.912,兩者存在顯著性相關(guān)及很好的一致性；②每組冷藏血樣每隔1天測(cè)試的乳酸結(jié)果與采血當(dāng)天的測(cè)試值無(wú)顯著性差異(P>0.05)，結(jié)果呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，此外，P值也逐漸減小，在冷藏14天后的P值為0.16。結(jié)論：①便攜式與臺(tái)式乳酸鹽分析儀在測(cè)量結(jié)果上存在很好的一致性，在實(shí)際中能夠互相替代使用。②血樣冷藏14天后對(duì)血樣的乳酸值影響在統(tǒng)計(jì)學(xué)的允許范圍內(nèi)。

關(guān)鍵詞：EKF-C-Line GP型臺(tái)式乳酸鹽分析儀；Lactata-scout便攜式乳酸鹽分析儀；血乳酸值；冷藏時(shí)間

文章編號(hào)：1004-3624(2015)05-0121-04

中圖分類號(hào):G804.7

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

Abstract:Objective: ①The results of blood lactate levels, tested by Lactata-scout's portable lactate analyzer (Germany Senslab) and EKF-C-Line GP-based desktop lactate analyzer (German EKF) were compared to determine whether the two instruments could be used instead of each other; ②The blood lactate levels were immediately tested and were compared with the test results of different storage time, to find out how long it could be refrigerated. Methods: ①Using portable and desktop lactate analyzer to measure the blood lactate of athletes after exercise, looked for the correlation and consistency of the two measurements; ②The frozen blood samples were measured after every other day until refrigerated 14 days, then these results were compared. Results: ①It showed a good link to the results which were tested by portable and desktop lactate analyzer, the correlation coefficient r=0.912, paired t-test results mean difference between the two test of refrigerated was -0.114 mmol/L; ②Each group results which were tested in 14 days storage comparing to blood lactate which was tested the day, was no significant difference, and it becomed higher along with the storage time, and P was 0.16 on the 14th day. Conclusions: ①Portable and desktop presence of lactate analyzers were good consistency, in practice, be able to replace one another. ②The blood samples could be storaged at least 14 days and had not significant influence on the results of blood lactate.

Effects of Different Instruments and Storage Time on Blood Lactate

CHEN Yao,SHI Zhi-ye,GUO Zi-yuan,WEI Liang-zhong

(Anhui Institute of Physical Science and Technology, Hefei 230001, China)

Key words:EKF-C-Line GP-based desktop lactate analyzer; lactata-scout's portable lactate analyzer; blood lactate levels; storage time

0前言

乳酸是糖無(wú)氧酵解的產(chǎn)物，運(yùn)動(dòng)時(shí)其濃度的變化主要受運(yùn)動(dòng)負(fù)荷、年齡、運(yùn)動(dòng)方式、肌糖原貯備等因素的影響；可以作為運(yùn)動(dòng)實(shí)踐中掌握運(yùn)動(dòng)強(qiáng)度的依據(jù)或評(píng)價(jià)運(yùn)動(dòng)員無(wú)氧代謝的重要指標(biāo)之一；還廣泛應(yīng)用于運(yùn)動(dòng)員選材、運(yùn)動(dòng)員訓(xùn)練水平的評(píng)定、訓(xùn)練計(jì)劃的制定、訓(xùn)練效果的監(jiān)測(cè)等方面。在體育科學(xué)研究中，血乳酸是一個(gè)比較成熟，十分常用的指標(biāo)[1]。

不同方法測(cè)試血乳酸對(duì)其結(jié)果會(huì)有影響，采用YSI 23L酶法與改良Baker-Summer-son化學(xué)法測(cè)定血乳酸,結(jié)果顯示兩種方法的測(cè)試結(jié)果具有很高的相關(guān)性[1]。不同儀器對(duì)乳酸測(cè)試值影響的研究中使用Lactate -scout 型便攜式乳酸鹽分析儀與YSI1500 型乳酸鹽分析儀，結(jié)果顯示兩者也具有很高的相關(guān)性[2]。此外，亦有研究針對(duì)不同儀器、不同血樣標(biāo)本測(cè)試比較生化指標(biāo)問(wèn)題進(jìn)行報(bào)道。在室溫情況下，血液樣本的儲(chǔ)存時(shí)間會(huì)對(duì)其血常規(guī)測(cè)試的結(jié)果存在影響也被報(bào)道[3]。封文平[4]等研究不同保存方式和保存時(shí)間對(duì)血乳酸測(cè)定值影響，得出結(jié)論“血樣在冷凍4周，冷藏5天后利用YSI1500臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)試其乳酸結(jié)果與采血當(dāng)天相比無(wú)顯著性差異，兩類結(jié)果可以通用”。

在進(jìn)行體育科研工作過(guò)程中常常遇到以下情況：運(yùn)動(dòng)隊(duì)在外地短期集訓(xùn)或外出比賽期間，我們會(huì)用便攜式乳酸鹽分析儀即刻測(cè)試；而且有時(shí)采取的血樣不能即刻進(jìn)行測(cè)試，而是冷藏處理，回到實(shí)驗(yàn)室用臺(tái)式血乳酸儀進(jìn)行測(cè)試(一般最長(zhǎng)期限15天左右)。因此，便攜式和臺(tái)式乳酸鹽分析儀兩種不同的測(cè)試方法得出的結(jié)果是否可以通用？以及血樣采集后冷藏保存是否對(duì)測(cè)試結(jié)果造成影響以及可冷藏保存的時(shí)間是多久？這些疑問(wèn)是在實(shí)際應(yīng)用乳酸過(guò)程中需要解決的問(wèn)題之一；本研究旨在比較兩種不同儀器對(duì)同一血樣的乳酸測(cè)試值，及分析臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)試?yán)洳夭煌瑫r(shí)間的血液乳酸值，以得到科學(xué)合理的結(jié)論。

1對(duì)象與方法

1.1研究對(duì)象

研究對(duì)象為參加安徽省運(yùn)動(dòng)員選招的優(yōu)秀運(yùn)動(dòng)員68名，其中男性34名，女性34名，受試者基本情況見(jiàn)表1，身體均無(wú)異常。

表1　受試者基本情況

1.2研究方法

取受試者在進(jìn)行最大攝氧量測(cè)試后2min的耳血，即刻進(jìn)行便攜式乳酸鹽分析儀的測(cè)試，并在同一滴耳血中取20ul放入臺(tái)式乳酸鹽分析儀的配套樣品管(含溶血?jiǎng)?中，充分混勻并且分裝，即刻上機(jī)檢測(cè)得出的數(shù)據(jù)即為采血當(dāng)天的測(cè)試結(jié)果；剩余樣本置于冰箱4～6度冷藏，每隔1天進(jìn)行一次測(cè)試，測(cè)試時(shí)先取出樣本放置恢復(fù)室溫，充分混勻后于臺(tái)式乳酸鹽分析儀上進(jìn)行測(cè)試，每次測(cè)試前先定標(biāo)、質(zhì)控，質(zhì)控值均在可控范圍內(nèi)。

測(cè)試儀器：①便攜式乳酸鹽分析儀為德國(guó)Senslab公司的Lactata-scout,其實(shí)驗(yàn)原理是根據(jù)氧化酶-電極法檢測(cè)人體血乳酸水平，所需血量0.5ul，測(cè)試時(shí)間15s，測(cè)試范圍0.5~25.0mmol/L。②臺(tái)式乳酸鹽分析儀為德國(guó)EKF診斷公司生產(chǎn)的EKF-C-Line GP型，其實(shí)驗(yàn)原理是采用固化酶-電極法，需全血量20ul，測(cè)試時(shí)間60s，測(cè)試范圍0.5~40mmol/L。

1.3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

結(jié)果使用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0，所得數(shù)據(jù)用±SD表示。對(duì)便攜式及臺(tái)式乳酸鹽分析儀兩種儀器測(cè)試結(jié)果進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)和線性回歸分析；對(duì)冷藏至14天每隔1天測(cè)試乳酸值的分別與采血當(dāng)天的測(cè)試結(jié)果進(jìn)行單方分析。

2結(jié)果

2.1EKF-C-Line GP臺(tái)式乳酸鹽分析儀與 Lactate-scou便攜式分析儀的乳酸值

由表2可以看出配對(duì)t檢驗(yàn)結(jié)果顯示：兩種測(cè)試方法所測(cè)結(jié)果的平均差值(便攜式-臺(tái)式)為-0.114mol/L，差值的95%置信區(qū)間為-0.402～0.174，差值的標(biāo)準(zhǔn)差為1.045，P>0.05。由圖1可以看出，以EKF-C-Line GP臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)試值為標(biāo)準(zhǔn)，將EKF-C-Line GP臺(tái)式乳酸鹽分析儀與 Lactate-scou便攜式分析儀測(cè)試值進(jìn)行線性回歸分析得出回歸方程為：Y(便攜式)=1.054X(臺(tái)式)-0.589；相關(guān)系數(shù)r=0.912 (n=53，P<0.01)。

表2　EKF-C-Line GP臺(tái)式乳酸鹽分析儀

圖1　EKF-C-Line GP臺(tái)式與Lactate-scou便攜式

2.2冷藏不同時(shí)間血液乳酸值的比較

由表3可以看出, 冷藏后每隔1天測(cè)試乳酸值的各組結(jié)果分別與采血當(dāng)天的測(cè)試結(jié)果，均無(wú)顯著性差異(P>0.05)，數(shù)值呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，此外，P值也逐漸減小，在冷藏14天后的P值為0.16。冷藏14天后乳酸值與采血當(dāng)天測(cè)試結(jié)果的差異為9.68%，冷藏2天后與采血當(dāng)天測(cè)試結(jié)果的差異為2.60%。

3討論

3.1不同儀器測(cè)試乳酸結(jié)果的比較

首先，對(duì)便攜式與臺(tái)式乳酸鹽分析儀的乳酸值進(jìn)行配對(duì)樣本t檢驗(yàn)得出：它們的平均差值(便攜式-臺(tái)式)為 -0.114 mmol/L， P>0.05(表2)；在此基礎(chǔ)上，為了進(jìn)一步了解兩者之間的確切關(guān)系，對(duì)其進(jìn)行線性回歸分析，得出結(jié)果：得出相關(guān)系數(shù) r=0.912(n=53，P<0.01)，回歸方程為：Y(便攜式)=1.054X(臺(tái)式)-0.589(圖1)。這些結(jié)果提示，便攜式與臺(tái)式乳酸鹽分析儀的乳酸值具有理想的線性關(guān)系，在實(shí)際應(yīng)用中可以互相替代使用；并且可以通過(guò)回歸方程進(jìn)行對(duì)彼此的預(yù)算。

表3　不同保存時(shí)間后血乳酸值與采血當(dāng)天測(cè)試結(jié)果的方差分析

注：0、2、4、6、8、10、12、14表示采血當(dāng)天開(kāi)始計(jì)算的冷藏天數(shù)，0為采血當(dāng)天

在類似的研究中，全明輝等[5]比較了YSI1500和 Lactate-scout的測(cè)試結(jié)果，實(shí)驗(yàn)中配對(duì)數(shù)據(jù)的95%一致性界限為(-0.1 mmol/L，-14.6 mmol/L)，平均差值為-7.3 mmol/L，說(shuō)明其差值較大，兩種方法不能直接相互替代。McLean等[6]得到與本文相似的結(jié)論， McLean用Lactate Pro(日本京都公司)與YSI1500作一致性檢驗(yàn)，兩測(cè)試值的平均差值(Lactate Pro-YSI 1500)為0.5 mmol/L，差值的范圍從0至2.7 mmol/L；結(jié)果顯示兩臺(tái)儀器的乳酸值具有很好的一致性。造成這些研究不一致結(jié)果的原因可能是儀器生產(chǎn)商家不同，系統(tǒng)對(duì)乳酸具體測(cè)試原理與細(xì)節(jié)的安排設(shè)計(jì)造成的。本文的結(jié)果只能說(shuō)明我們使用的臺(tái)式和便攜式乳酸測(cè)試儀器在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中可以相互替代；而其他的測(cè)試儀器是否可以互相替代需要進(jìn)一步驗(yàn)證。

實(shí)驗(yàn)中有趣的現(xiàn)象是，在一定范圍內(nèi)，EKF-C-Line GP臺(tái)式的測(cè)試結(jié)果普遍要高于Lactate-scou便攜式的測(cè)試值；在乳酸濃度<6 mmol/L時(shí)，兩種方法的結(jié)果差值較??；當(dāng)濃度為6～10 mmol/L時(shí)，EKF-C-Line GP臺(tái)式的測(cè)試結(jié)果略高于Lactate-scou便攜式；當(dāng)濃度>10 mmol/L時(shí)，變成Lactate-scou便攜式的測(cè)試結(jié)果略高于EKF-C-Line GP臺(tái)式。這一現(xiàn)象是否表明，在不同的乳酸范圍內(nèi)，不同乳酸測(cè)試儀器的精確、敏感性不一？在竇蘭君、黃光秀等[7,8]的研究中發(fā)現(xiàn)，在一定的范圍內(nèi)Lactate Pro便攜式的測(cè)試值要高于YSI 1500臺(tái)式的，但差值并不大而且不是所有的Lactate Pro測(cè)試結(jié)果都較高。Medbo等[9]發(fā)現(xiàn)當(dāng)血乳酸濃度<6mmol/L時(shí)測(cè)試系統(tǒng)誤差要比>6mmol/L時(shí)要少。同時(shí)當(dāng)濃度>10mmol/L時(shí)，Lactate Pro測(cè)試結(jié)果比YSI1500高出12%。因此，為了追求科學(xué)的乳酸測(cè)試數(shù)據(jù)，將進(jìn)一步尋找兩臺(tái)儀器測(cè)試乳酸值可以相互替代的數(shù)值范圍。

3.2不同冷藏時(shí)間對(duì)血乳酸測(cè)定結(jié)果的影響

冷藏后每隔1天測(cè)試的各組乳酸值與采血當(dāng)天的測(cè)試結(jié)果相比，均無(wú)顯著性差異；而且數(shù)值呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)，此外，P值也逐漸減小，在冷藏14天后的P值為0.16(表3)。雖然本研究未能找到出現(xiàn)顯著性差異的分界點(diǎn)(冷藏天數(shù))，但是可以預(yù)測(cè)在冷藏14天后短期內(nèi)可能會(huì)出現(xiàn)P<0.05的情況；出于樣本太小(7個(gè)P值)，而且也不能找到類似處理方式的文獻(xiàn)研究的數(shù)據(jù)，因?yàn)椴荒軌蛲ㄟ^(guò)回歸分析手段預(yù)測(cè)P<0.05的冷藏天數(shù)。

探討不同保存方式和保存時(shí)間對(duì)血乳酸測(cè)定值影響有過(guò)類似研究，封文平[4]等得出結(jié)論血樣在冷凍4周，冷藏5天后利用YSI1500臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)試其乳酸結(jié)果與采血當(dāng)天相比無(wú)顯著性差異，兩類結(jié)果可以通用。但有關(guān)一份血樣冷藏保存14天后，使用EKF-C-Line GP臺(tái)式乳酸鹽分析儀測(cè)試后的結(jié)果變化迄今未見(jiàn)報(bào)道。本文的研究設(shè)定在冷藏14天，進(jìn)一步擴(kuò)大了封文平[4]等指出的用于乳酸測(cè)試血樣的冷藏時(shí)間。

血液在離體狀態(tài)下依然可以進(jìn)行物質(zhì)代謝，即使在冷藏狀態(tài)下；而且在密閉容器中的血液，不能像在體時(shí)那樣進(jìn)行循環(huán)，造成乳酸的堆積，表3的乳酸值呈現(xiàn)逐漸遞增的趨勢(shì)與之吻合。此外，血樣是否因?yàn)閾]發(fā)造成整體體積縮小，從而導(dǎo)致乳酸數(shù)值相對(duì)增大也是可能的原因。

4結(jié)論

4.1Lactate-scou便攜式乳酸鹽分析儀與EKF-C-Line GP臺(tái)式乳酸鹽分析儀在測(cè)量結(jié)果上存在很好的一致性，在實(shí)際中能夠互相替代使用。

4.2血樣冷藏14天后對(duì)乳酸值的影響在統(tǒng)計(jì)學(xué)的允許范圍內(nèi)，其測(cè)試結(jié)果隨時(shí)間的推移呈現(xiàn)逐漸上升的趨勢(shì)。

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