王佳佳，陳　銳，楊最素，余方苗，丁國芳

（浙江海洋學院食品與醫(yī)藥學院，浙江省海洋生物醫(yī)用制品工程技術研究中心，浙江舟山　316022）

·綜述·

海洋活性物質對肝損傷修復作用的研究進展

王佳佳，陳銳，楊最素，余方苗，丁國芳

（浙江海洋學院食品與醫(yī)藥學院，浙江省海洋生物醫(yī)用制品工程技術研究中心，浙江舟山316022）

摘要：肝臟是人體重要的解毒器官，是各種藥物、化學物質代謝的場所。隨著人們生活方式及飲食習慣的改變，肝臟疾病如脂肪肝、肝硬化、肝纖維化及肝腫瘤等嚴重危害人類健康。從海洋中獲得高效、低毒的保肝活性物質成為當今研究的熱點。本文就國內外對肝損傷有修復作用的海洋活性物質，如多糖、多肽、萜類化合物、不飽和脂肪酸、腦苷脂、核苷類、?；撬帷⒕S生素等研究進展進行綜述。

關鍵詞：海洋活性物質；肝損傷；修復

肝臟是人體重要的解毒器官，功能發(fā)生障礙會對人體健康產生重要的影響，當有害物質進入肝臟，會造成肝細胞的炎癥、壞死、凋亡和纖維化等。近年來，隨著人們生活水平的提高以及膳食結構的改變，肝病

患者日益增多。而陸生資源的日益匱乏及生物技術的發(fā)展，使海洋生物逐漸成為天然藥物的重要來源之一，因此運用現(xiàn)代生化分離與分析方法，從海洋中獲得高效、低毒的保肝活性物質已經成為當今研究的熱點。本文就國內外對肝損傷有修復作用的海洋活性物質研究進展進行綜述。

1肝損傷的分類

肝臟是人體新陳代謝的主要場所，在促進脂類消化和吸收，調節(jié)血糖濃度，合成機體所需的蛋白等方面起著重要作用。隨著人們飲食習慣和生活方式的改變，現(xiàn)階段肝臟疾病成為影響人類健康的因素之一，臨床發(fā)現(xiàn)引起肝細胞損傷的原因很多，如生物性、缺血性、化學性（包括藥物和酒精）、免疫性、生物毒素、放射線性及寄生蟲性等，最后都會導致肝壞死。目前治療肝損傷的藥物主要有免疫調節(jié)類、抗病毒類、改善肝功能類、中草類藥物［1］。藥物引起的肝損傷（Drug-induced liver injury，DILI）是最復雜的急慢性肝病，盡管在一般人群的發(fā)病率低，仍是導致急性肝衰竭的一種常見原因。DILI可分為劑量依賴性和非劑量依賴性，后者形成率比較低，西方國家正在研究與DILI相關的其他藥物，諸如非甾體抗炎藥物，他汀類藥物，草藥等［2］。輻射性肝炎是一種由輻射導致的亞急性肝損傷，雖然由于現(xiàn)在對肝臟耐受力有了更好的把握，調查模式的改進以及現(xiàn)代輻射傳遞技術，治療的可選擇性仍然受限［3］。脂肪性肝損傷臨床病理表現(xiàn)為細胞凋亡和肝的脂肪變性。免疫性肝損傷主要表現(xiàn)在灶性或者彌漫性細胞壞死，Tunel染色表現(xiàn)不同程度的細胞凋亡。

2具有保肝功能的海洋活性物質

2.1多糖

多糖（Polysaccharide）是由糖苷鍵結合的糖鏈，至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物。海洋生物中存在許多天然活性多糖，根據(jù)來源海洋多糖可分為海藻多糖，海洋微生物多糖，海洋動物多糖。研究發(fā)現(xiàn)，海洋多糖對肝損傷具有明顯的修復作用。

巖藻聚糖硫酸酯作為海帶等褐藻所固有的細胞間多糖，存在于褐藻細胞壁基質中，是褐藻所特有的生物活性物質。其主要有效成份是α-L-巖藻糖-4-硫酸酯。滕來賓［4］從海地瓜中提取出海參巖藻聚糖硫酸酯（SC-FUC），構建小鼠酒精性肝損傷模型，研究得出SC-FUC可顯著提高小鼠肝臟ADH、ALDH水平，降低ALT、AST水平；提高CAT、GSH-PX活性和GSH含量，具有顯著的抗氧化能力；CYP2e1和CYP3a是小鼠肝臟細胞色素氧化酶最重要的兩個亞型，分別占CYP450總量的7%［5］和30%［6］，實驗發(fā)現(xiàn)SC-FUC可顯著抑制由乙醇誘導的CYP2e1、CYP3a mRNA表達量的升高。趙雪［7］用離子交換的方法從海帶粗糖中分離出兩種硫酸根含量不同的大分子的巖藻聚糖硫酸酯F-A（16.5%硫酸根）和F-B（33.5%硫酸根）。F-A2能夠顯著抑制小鼠血清GPT和MDA濃度的升高，并提高小鼠體內的SOD和GSH-Px活性，說明巖藻聚糖硫酸脂的保肝護肝作用與抗氧化活性有關。

徐紅麗等［8］從東海厚殼貽貝中分離出貽貝多糖MP-Ι，MP-Ι高、中、低三個劑量組能不同程度降低肝損傷小鼠ALT、AST、MDA水平，能不同程度增高肝損傷小鼠SOD水平。貽貝多糖MP-Ι對小鼠急性肝損傷的保護作用可能通過抗氧化作用實現(xiàn)的。

殼聚糖又稱脫乙酰甲殼素，廣泛存在于甲殼綱動物貝殼、真菌、昆蟲、環(huán)節(jié)動物、軟體動物、腔腸動物等體內。它的相容性、安全性、微生物降解性等優(yōu)良性能被各行各業(yè)廣泛關注。徐光翠等［9］探討了殼聚糖對鎘所致的大鼠肝損傷的拮抗作用。殼聚糖干預組隨著殼聚糖劑量的逐漸升高，大鼠肝臟SOD活性逐漸升高，MDA的含量逐漸減少，血清中ALT活力均明顯下降，因此殼聚糖對鎘所致的肝損傷有修復作用。SANTHOSH［10］研究發(fā)現(xiàn)殼聚糖對異煙肼，利福平等抗結核病藥物引起的肝損傷也具有修復作用，其機制主要是殼聚糖可以防止藥物引起的小鼠血清中特征標志酶的增高。周南進等［11］采用MTT法研究了4種不同殼聚糖及其衍生物對肝癌細胞株SMMC7721的生長抑制作用。水溶性殼聚糖和磺化殼聚糖在濃度為50 mg/L時就可抑制肝癌細胞生長，并且呈劑量依賴關系，在400 mg/L和800 mg/L時可達到高峰。羧甲基殼聚糖和殼寡糖則對肝癌細胞生長無抑制作用。敬海峰［12］腹腔注射CCl4建立大鼠肝纖維化模型。中、高劑量的低分子殼聚糖使肝纖維化大鼠血清ALT、AST、ALP的含量明顯降低，α-SMA mRNA表達量降低，能夠起到緩解肝纖維化進程的作用。李玲等［13］研究了殼聚糖對高血脂及其脂肪肝模型大鼠的降脂作用，兩個殼聚糖組血清TC、TG均顯著降低，HDLc升高，因此殼聚糖有顯著降脂與脂肪肝防治作用。

2.2多肽

多肽（Polypeptide）是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物，同時也是蛋白質水解的中間產物，一般是由三個或三個以上氨基酸分子脫水縮合而成。

孔菲菲［14］研究了鱉甲分子量小于6 kD多肽對CCl4誘導的大鼠肝纖維化模型的治療作用，肝細胞損傷時，貯脂細胞合成的血清透明質酸（HA）增加，內皮細胞對HA的降解能力降低，使血清中HA含量升高，該多肽通過抑制TGFβ-1、TIMP1的表達及HYP、PC III的合成來減輕肝纖維化的程度。宋麗娜等［15］從鯊魚肝臟中分離純化出一種鯊魚肝刺激多肽（sHSP），分子量為4 899.715 Da，采用MTT法，利用STZ損傷的小鼠胰島β細胞瘤細胞和人肝癌SMMC-7721細胞來檢測其生物活性。結果顯示sHSP可以部分對抗STZ導致的NIT-1β細胞毒性損傷，刺激SMMC-7721細胞再生。呂正兵等［16］研究了鯊肝活性肽（sHSS）對對乙酰氨基酚 （AAP）致小鼠急性肝損傷的保護作用，sHSS 3.0與1.5 mg/kg均可顯著降低AAP肝損傷小鼠的ALT、AST水平；高劑量的sHSS（3.0 mg/kg）對肝線粒體有保護作用，可下調Fas mRNA的表達，并有抑制肝細胞凋亡的作用。

2.3萜類化合物

萜類化合物（Terpenoids）主要存在于紅藻凹頂藻屬的各種類化合物中，近年來，從凹頂藻種類化合物中已經分離出來100多種萜類化合物，具有抗氧化、抗炎、抗癌、抗病毒、免疫調節(jié)等多種生物活性［17］。

張艾玲等［17］用酒精誘導大鼠建立急性肝損傷模型，分別以凹頂藻萜類化合物（LET）低、中、高劑量作用于肝損傷小鼠。低、中劑量組線粒體結構基本正常，不同劑量LET干預組大鼠血清ALT、AST、TG和CHO的水平均有不同程度的降低。故LET可明顯改善肝組織超微結構的病理損傷，降低血清轉氨酶水平，使血脂水平降低，對酒精性肝損傷有一定的修復作用。

海兔素是一種溴代倍半萜，主要來源于紅藻凹頂藻屬海藻以及海兔中。戈娜［18］研究了海兔素對酒精暴露大鼠的保肝作用，海兔素各劑量組炎性細胞浸潤減少，肝脂肪變性得到改善，高劑量組肝索排列逐漸恢復整齊。從機制上看，iNOS和NO可促進慢性酒精性肝損傷的形成，長期飲酒可以誘導iNOS而增加NO的生成［19］。海兔素可能通過抑制iNOS活性，下調肝內iNOS蛋白表達，減少NO生成，最終達到改善肝損傷的作用。豐暖［20］則認為海兔素對酒精性肝損傷的修復作用機制可能是減少Fas、FasL的表達，降低血清TNF-a水平，從而抑制肝細胞的凋亡。

2.4不飽和脂肪酸類

ω-3多不飽和脂肪酸（ω-3 Polyunsaturated fatty acid，ω-3 PUFA）廣泛存在于海洋生物中，胡中偉等［21］研究了海狗油ω-3 PUFA膠丸治療非酒精性脂肪肝（NAFLD）的臨床效果。采用讓NAFLD患者服用海狗油ω-3 PUFA膠丸的方法，結果NAFLD患者TG、BMI、HOMA-IR水平均有所降低，肝脂肪變的程度有下降趨勢。KOTZAMPASSI等［22］通過免疫組織化學等方法發(fā)現(xiàn)ω-3 PUFA能夠保護因輻射所致的大鼠肝損傷。Chen Yi等［23］就ω-3 PUFA對肝細胞自噬活性進行了研究，F(xiàn)FAs能夠導致肝細胞中脂質積累及細胞凋亡，抑制自噬或自噬基因缺陷會促進FFAs誘導的脂質積累，ω-3 PUFA可通過誘導自噬而降低脂質積累和抑制肝細胞凋亡，其機制主要是通過下調肝細胞中SCD-1的表達。

2.5腦苷脂

腦苷脂（Cerebroside）是生物細胞膜中廣泛存在的一類糖脂質，又名?；拾贝技禾擒?，屬于中性鞘糖脂，是單糖或低聚糖與神經酰氨末端羥基結合所形成的苷。主要存在于陸地生物，廣泛存在于哺乳動物心，腦等組織膜結構中。在海洋中，腦苷脂則主要存在于無脊椎動物和海生植物中，如海參、海葵等［24］。

在MARGALIT等［25］的實驗中，發(fā)現(xiàn)腦苷脂對ob/ob小鼠的脂肪肝和代謝綜合征的改善作用是通過對NK細胞的調控作用來進行的。張蓓［26］研究了海星與海參腦苷脂對乳清酸誘導的NAFLD大鼠肝臟脂質代謝的影響，結果表明腦苷脂能促進肝臟脂質分泌以及抑制肝臟脂肪酸合成兩方面減緩脂肪肝癥狀。同時利用了CCl4急性肝損傷模型，證實了海參腦苷脂在肝細胞再生和阻礙肝纖維化發(fā)生上表現(xiàn)出顯著作用，海星腦苷脂可以有效抑制肝細胞壞死和肝臟脂質代謝紊亂。高壯［24］研究了海參腦苷脂對飲食誘導的肥胖小鼠脂代謝與糖代謝的影響，結果顯示海參腦苷脂不僅可以明顯抑制PPARγ的表達，影響脂質代謝，還可以通過下調肥胖小鼠肝臟SREBP-1c及其靶基因FAS與ME的表達，抑制肝臟FAS活性和ME活性，抑制脂肪酸的合成。從這兩方面看，海參腦苷脂及其長鏈堿基能顯著降低肝脂的含量。

2.6核苷類

核苷類（Nucleoside）是一類廣泛存在于自然界的天然產物，海洋生物中富含豐富的核苷類資源，如海綿、蕨菜、?？?、海藻等。它由堿基和環(huán)狀核糖或去氧核糖組成，包括嘌呤核苷和嘧啶核苷2大類，共5種常見類型：胸腺嘧啶核苷、腺嘌呤核苷、胞嘧啶核苷、鳥嘌呤核苷和尿嘧啶核苷。

劉璐璐［1］以皺紋盤鮑性腺為原料，取得皺紋盤鮑正丁醇相提取物，經紫外分光光度法檢測，核苷類成分的含量為75%。將正丁醇提取物以高、中、低劑量分別作用于CCl4和D-GalN所誘導的化學性肝損傷小鼠，該提取物能減緩小鼠血清中ALT、AST的升高，降低小鼠肝勻漿中MDA的生成量，同時使SOD活性增強，從而減輕肝細胞損傷。侯杰等［27］從滸苔的正丁醇相提取物中分離純化出7種化合物，有6種屬于核苷類化合物，同樣作用于CCl4和D-GalN所誘導的化學性肝損傷小鼠，與CCl4模型組和D-GalN模型組相比各劑量組的SOD提升率分別為39.41%和41.27%，表明滸苔的正丁醇相提取物對小鼠急性化學性肝損傷也具有良好的修復作用。

2.7?；撬?/p>

?；撬幔═aurine）又稱β-氨基乙磺酸，是一種含硫的非蛋白氨基酸，在魚和貝類中的含量很豐富。付凌等［28］就?；撬釋PS誘導的小鼠肝損傷修復進行了研究，實驗選擇飼料中添加2.5%?；撬幔粌H降低了LPS誘導小鼠的肝臟指數(shù)，且對肝臟GPx1和Nrf2的表達有上調作用。BALKAN等［29］研究了?；撬釋α虼阴０氛T導的肝硬化大鼠的修復作用，發(fā)現(xiàn)?；撬崾峭ㄟ^降低氧化應激，提高維生素E水平和GSH-PX活性而發(fā)揮護肝作用。

2.8維生素類

海洋生物中含有多種維生素（Vitamin），魚類中含有豐富的Vit E。Vit E最主要的功能是抗氧化，近年來發(fā)現(xiàn)其在慢性肝病治療中也有一定的作用。劉迪［30］研究了Vit E對體外分離提取的大鼠肝星形細胞（HSC）的增殖影響，結果得出Vit E在最佳濃度1 mg/L，體外作用 24 h條件下可有效抑制肝星形細胞的增殖，與Vit A聯(lián)合用藥則治療效果更加顯著。BROWN等［31］研究了Vit E對于鐵過量引起的肝臟脂質過氧化以及纖維化動物模型的作用，發(fā)現(xiàn)長期攝食大量鐵的大鼠血漿和肝臟中Vit E水平均有下所降，但補充Vit E（200 IU/kg）后則得以糾正。

3結語與展望

21世紀人類社會面臨著“資源匱乏、環(huán)境惡化、人口劇增”三大問題的嚴峻挑戰(zhàn)，目前陸生資源的日益匱乏，使海洋生物逐漸成為天然藥物的重要來源之一。迄今為止，人們從海洋生物中已經分離獲得14 500余種具有各種結構類型的海洋天然產物。從海洋生物中提取活性物質用于肝損傷修復的前景是樂觀的，但海洋動、植物資源仍十分有限，收集純化比較困難，難以工業(yè)化生產，而海洋中還存在大量的海洋微生物，因此從海洋微生物及其代謝產物中尋找新藥或新藥先導化合物用于肝臟修復將大有可為。相信隨著現(xiàn)代分離技術的不斷改進，有大量的護肝保肝作用的海洋生物活性物質會被發(fā)現(xiàn)并實現(xiàn)產業(yè)化。

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中圖分類號：R282.77

文獻標識碼：A

文章編號:1008-830X（2016）01-0076-05

收稿日期：2015-09-30 基金項目：浙江省自然科學基金（LY15C200016；LQ16H300001）；舟山市科技計劃項目（2015C31012）

作者簡介：王佳佳（1991-），女，碩士研究生，研究方向：海洋藥物、海洋功能食品. 通訊作者：楊最素，女，浙江定海人，教授，研究方向：海洋藥物、海洋功能食品.E-mail:yangzuisu@163.com

Research Progress on Hepatoprotective Effect of Marine Active Substances

WANG Jia-jia，CHEN Rui，YANG Zui-su，et al
（School of Food Science and Medical of Zhejiang Ocean University，Zhejiang Provincial Engineering Technology Research Center of Marine Biomedical Products，Zhoushan316022，China）

Abstract:Liver is the body's center of metabolism and the important organ of human body to detoxicate. So liver becomes an important target of various drugs and chemicals.With the change of the peoples lifestyle and dietary habit，some liver diseases cause serious damage to people's health，such as fatty liver，liver cirrhosis，liver fibrosis and liver cancer.So it becomes a hot spot that acquire efficient and low toxicity active material from Marine to protect liver in today's research.This article summarizes the new development of anti-liver injury of marine active substances such as polysaccharides，polypeptide，terpenoids，unsaturated fatty acid，cerebroside，nucleoside，taurine，vitamin，etc.

Key words:marine active substances；liver injury；repair