孫　裴　高亞飛　高亞成　徐大為　彭明義　張小東　丁　亮　殷宗俊　魏建忠　李　郁

（1安徽農業(yè)大學動物科技學院，安徽合肥 230000；2安徽浩翔農牧有限公司，安徽利辛 236700；3勃林格殷格翰國際貿易 （上海）有限公司，上海 200000）

美國暴發(fā)豬流行性腹瀉后的控制策略及經(jīng)驗借鑒

孫裴1高亞飛2高亞成2徐大為3彭明義3張小東1丁亮1殷宗俊1魏建忠1李郁1

（1安徽農業(yè)大學動物科技學院，安徽合肥 230000；2安徽浩翔農牧有限公司，安徽利辛 236700；3勃林格殷格翰國際貿易 （上海）有限公司，上海 200000）

2010年以來豬流行性腹瀉 （PED）在多個國家出現(xiàn)或再現(xiàn)，給養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大的經(jīng)濟損失。本文著重介紹2013年美國暴發(fā)PED后，美國農業(yè)部調查PED暴發(fā)來源、制定主要控制策略及PED學術研究的部分成果，旨在為我國PED防控補充一些理論與技術依據(jù)。

美國；PED；暴發(fā)；控制；經(jīng)驗

美國自2013年4月暴發(fā)豬流行性腹瀉（Porcine Epidemic Diarrhea，PED），迄今為止該病已在全美范圍內迅速蔓延，并在第一年導致估計800萬頭豬死亡，造成1 250萬商品豬（占年出欄11%）的市場缺口，經(jīng)濟損失達9～18億美元。我國于2010年底多個省份再次流行PED，包括日本、韓國、菲律賓、泰國、越南、加拿大、墨西哥、德國、比利時、法國和葡萄牙等國出現(xiàn)或再次出現(xiàn)［1-2］。目前PED已成為全球養(yǎng)豬業(yè)一個嚴峻的挑戰(zhàn)。疫苗的研制與使用、生物安全控制策略的制定，是當前防制PED的研究熱點。本文對2013年美國暴發(fā)PED之后，美國調查研究得出的部分結果作一介紹，旨在為我國PED防控補充一些理論與技術依據(jù)［3-10］。

1　美國農業(yè)部調查PEDV是怎么進入美國的

在此僅以北卡羅來納州為例，在2013年秋季和2014年春季，北卡羅來納州有89%的豬場暴發(fā)了PED，在2014年秋季和2015年春季，57%的豬場暴發(fā)了PED，其中那些在臨床上再次暴發(fā)PED的豬場中有94%是以前感染過該病的豬場［11-12］。

美國農業(yè)部2015年9月份發(fā)表了一份報告，名為“豬腸道冠狀病毒進入美國的根本原因調查報告”。該報告是美國政府及其各級單位、科研院所、養(yǎng)殖場、各類獸醫(yī)等協(xié)作，通過細致、詳細的調查與論證，尋找豬流行性腹瀉病毒（PEDV）進入美國的途徑。報告指出，PEDV如何進入美國的真正途徑難以弄清，但是根據(jù)傳染性疾病發(fā)生流行的基本理論，PEDV到達美國并暴發(fā)，須要經(jīng)歷以下4個階段：①存在來自疫情國家（地區(qū)）的傳染源（污染物）。②污染物通過某種途徑進入了美國。③到達美國后又分散到多個地方。④豬群適當時間適當?shù)攸c與這些污染物接觸并被感染。報告最終認為，飼料污染與PEDV感染暴發(fā)有著密切聯(lián)系，雖然沒有弄清到底是飼料中哪種成分或哪個飼料生產商出現(xiàn)了問題。報告特別指出，一種多用途的柔軟的包裝袋，可以用來包裝幾乎各種固體的物質或材料，如大豆、玉米、豆粕、貓糧等，當這種包裝袋被PEDV污染后再用來包裝其他物質，導致后者被污染，而這種包裝袋可以被再利用，如果沒有被正確的消毒，就可以作為重要的交叉污染介質，從而使飼料污染變得極為可能［13］。

從傳染病傳播機制來看，人、交通工具、動物及動物源性產品、飼料或其他可能直接或間接接觸的任何載體等，都可能攜帶PEDV病原進入美國。但是結合美國對動物及動物源性產品的進口政策、人和交通工具的檢疫及風險評估，最后縮小了懷疑對象，傾向于認為包裝袋被PEDV污染后，其反復利用并沒有正確或根本未消毒導致包裝的飼料（原料）交叉污染，或飼料（原料）原產地直接被PEDV污染，從而進口到美國后進入養(yǎng)豬場，引起PED首次暴發(fā)。被豬糞污染的水，被認為是包裝袋或飼料原料受污染的重要來源。

2　飼料可以攜帶并傳播PEDV得到證實

PEDV主要在糞便中存在，在糞便排出24天后其感染力才會下降，易感豬直接接觸帶PEDV的豬糞便是被感染的重要途徑。除此之外，2014年美國多家研究報道表明，受到PEDV污染的飼料或原料是造成PEDV長距離傳播的重要可能。據(jù)報道，室溫下PEDV能在干燥的飼料中生存7天，在受潮的飼料中能存活28天，而受污染的全價飼料可以作為PED的重要傳播途徑。有飼料供應商用PED陽性豬場的飼料飼喂陰性豬，結果發(fā)現(xiàn)能夠在陰性豬體內檢測到PEDV，因此我們需要提高飼料生物安全防控意識。另外注重飼料運輸車輛生物安全也能減少病毒的傳播。為了避免飼料被污染，建議飼料在1～2天內被用于飼喂，飼料長期保存會增加被病毒污染的可能性［14］。

如何有效殺滅飼料中PEDV已成為飼料生物安全控制的一個研究熱點。飼料中加入化學添加劑是減輕PEDV感染的有力策略，化學添加劑包括商業(yè)甲醛、亞硫酸氫鈉、氯酸鈉、有機酸混合物、揮發(fā)油混合物和中鏈脂肪酸混合物等。有研究初步表明，一種含甲醛和丙酸的液體抗生素本是添加到豬或雞飼料中用來控制和殺滅沙門氏菌的污染，現(xiàn)發(fā)現(xiàn)其對飼料中PEDV也有較好的殺滅效果，為養(yǎng)殖場飼料生物安全防控提供了新選擇。

3　弄清楚PEDV免疫、返飼與免疫應答的關系，尋找理論與實踐依據(jù)

3.1建立腸道黏膜免疫產生IgA和乳汁中IgA水平是防制PEDV的重要的依據(jù)

PED的防制取決于豬群感染情況的檢測和評價其免疫保護水平。作為腸道感染性疾病，正如PED，病毒與抗體的對抗是發(fā)生在腸道（腔）里，所以此時血清中抗體水平只能間接反映機體免疫應答情況，而糞便中的抗體水平可以直接作為腸黏膜免疫的反映，也是病毒早期感染監(jiān)控和評估免疫效果的有效工具。美國愛荷華州立大學Gimenez研究結果得出，豬群被PEDV感染后，唾液和糞便都能夠排毒；血清、唾液、糞便中都可以檢測到IgG和IgA抗體，血清中IgG水平明顯要高于IgA，而唾液和糞便中，IgA水平明顯高于IgG。研究結果提示，IgA抗體水平的監(jiān)測是PEDV早期感染和免疫效果評價的重要手段，而在今后研究中，建立腸道黏膜免疫產生IgA和乳汁中IgA水平是防制PEDV的重要依據(jù)［15］。

3.2返飼

大家較為熟悉的返飼的技術原理及操作方法，簡單敘述便是：取PED發(fā)病或糞便陽性豬的糞便給母豬進行返飼，可以有效刺激機體免疫應答和乳汁中IgA水平，從而通過初乳將中和抗體傳遞給仔豬起到很好的保護作用。然而返飼也存在一個最大的隱患，那就是人為地使病毒容易持續(xù)存在于豬群中，隨時給豬群帶來新一輪PED暴發(fā)的可能。

3.3疫苗免疫

迄今為止，美國尚無商品化的PEDV減毒活苗，僅有滅活苗可供選擇。近年來我國養(yǎng)豬企業(yè)在PEDV滅活苗使用實踐中發(fā)現(xiàn)，不同養(yǎng)殖單位使用滅活苗免疫效果表現(xiàn)的可能不一樣，甚至效果不確切。下面介紹一組美國學者使用滅活苗免疫和對照組得出的免疫效果試驗數(shù)據(jù)［16］。

該研究選擇了32頭距離預產期還有6周的懷孕母豬，其中16頭曾經(jīng)感染過PEDV但是現(xiàn)在血清和糞便中都再沒有PEDV。另外16頭是PEDV和抗體雙陰性豬。根據(jù)是否免疫疫苗，32頭豬分為4組，即感染過PEDV并免疫疫苗組（PE.I）、感染過PEDV但不免疫疫苗組（PE.NI）、PEDV陰性豬并免疫疫苗組（NC.I）和PEDV陰性豬但不疫苗免疫組（NC.NI）。產前第5周和第2周分別對免疫組進行PED滅活疫苗的免疫。通過產前產后母豬血清和乳汁中IgG、IgA抗體檢測，及新生仔豬PEDV人工攻毒保護性試驗，得出以下的結果。

⑴IgG結果分析發(fā)現(xiàn)，自然感染PEDV和陰性豬群接種PEDV疫苗后，均可以刺激母豬血清和乳汁中IgG抗體高滴度的產生。

⑵IgA濃度與IgG應答無太大關系。①感染過PEDV的母豬，不論是否免疫疫苗，其血清和乳汁中都有很高濃度的IgA，但是注射疫苗組的IgA水平更高。②陰性豬群注射疫苗組檢測出的IgA濃度很低，而陰性豬群非注射疫苗組未檢測到IgA。

⑶豬血清與初乳中的IgG抗體水平相近，初乳可以有效傳遞高抗體濃度的IgG和IgA給仔豬。并從哺乳第2天開始到第9天，兩種抗體濃度逐漸降低。

⑷IgA水平的高低具有特別意義，因為IgA水平的高低與對抗黏膜致病菌（病毒株）的感染密切相關。在這項研究中，乳汁中IgA水平的高低能夠顯著影響哺乳仔豬死亡率的高低。感染過PEDV的母豬，其初乳中有很高濃度的IgA抗體，可以有效幫助其所產仔豬抵抗PEDV的感染，有的仔豬雖然表現(xiàn)出溫和的臨床癥狀，但沒有出現(xiàn)死亡的現(xiàn)象。相反的是，來自于陰性母豬的所有豬群，無論注射疫苗與否，所產仔豬攻毒后均發(fā)病，死亡率100%。陰性豬群注射疫苗組與陰性豬群非注射疫苗組相比，注射疫苗組可以推遲仔豬的發(fā)病日齡，但是很快也會發(fā)病和死亡。

在這項研究中，陰性豬群注射疫苗組注射疫苗之后并沒有誘導產生被動免疫形式的IgA，以用來降低或消除仔豬斷奶前死亡率。該研究發(fā)現(xiàn)支持了這樣一個假設，即當面對PEDV的挑戰(zhàn)時，持續(xù)適當?shù)財z入高水平的IgA對于仔豬存活是非常重要的。要使母豬接種PEDV疫苗之后有效地保護PEDV挑戰(zhàn)下的陰性仔豬可能需要刺激乳汁產生較高濃度的IgA抗體。

4　病毒混合感染仍然存在，確診可以提升PEDV防控效果

據(jù)PIC報道，他們在北美的育種體系，多年來很少受到PRRSV和豬肺炎支原體兩個重要豬病的感染。但是卻在2013年11月至2014年4月，體系內47.4%的種豬受到了豬腸道冠狀病毒病的影響，其中PEDV單一感染占26.4%，PDCoV單一感染占10.5%，兩者共同感染占10.5%。另外，我國近年來調查研究也發(fā)現(xiàn)，PEDV、TEGV、PCV2、PRV等病原混合感染情況也較為常見，所以只有確診PEDV為主兇的疫情，制定針對性防制方案才能取得較好的預防與控制效果［17］。

事實證明，任何單一方法無法有效防制PED的發(fā)生或流行。近年來國內外多個國家或地區(qū)，甚至同一個地區(qū)或養(yǎng)殖場，PED可以反復暴發(fā)和流行，給養(yǎng)殖戶造成了巨大的經(jīng)濟損失。從本文介紹的美國調查PEDV進入美國的根本途徑及得出包裝袋、飼料可以攜帶PEDV并造成傳播的結論，再次表明了生物安全防控對PED防制的重要性，及一旦發(fā)生PED后如何快速有效對疫病進行溯源，可為PED生物安全控制方案的制定提供依據(jù)。疫苗免疫是動物傳染病防制的重要技術和手段。本文較為詳細的介紹了返飼、疫苗免疫及PED免疫應答之間的關系，并得出結論：如何有效提升乳汁中IgA抗體水平，是除了生物安全防控之外的一個為哺乳仔豬提供堅強保護的重要手段。新型、有效的PEDV疫苗研發(fā)是非常必要的，也會成為PED防制的研究熱點。

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