朱雅寧 袁雪濤

(天津市動物疫病預(yù)防控制中心,天津 300402)

牛衣原體病及其綜合防控技術(shù)

朱雅寧 袁雪濤

(天津市動物疫病預(yù)防控制中心,天津 300402)

牛衣原體中對養(yǎng)牛業(yè)危害最大的是牛衣原體性流產(chǎn)，本病是由鸚鵡熱衣原體感染牛引起的一種具有廣泛癥候群的接觸性傳染病，臨診癥狀以妊娠母牛流產(chǎn)、早產(chǎn)、死產(chǎn)或產(chǎn)無活力的犢牛為主要特征，又被稱為牛地方流行性流產(chǎn)。由于本病給奶牛場造成的不僅是胎兒的死亡，而且更嚴重的是產(chǎn)奶量大大降低，造成飼料、人力、醫(yī)藥等的巨大浪費。伴隨著畜牧業(yè)的發(fā)展，奶牛衣原體病日漸引起業(yè)內(nèi)人士的高度關(guān)注。

1 病原體

美國學者Jork 1951年首次報道本病，到1956年，德國人采用血清學實驗和細胞培養(yǎng)技術(shù)，證明原聯(lián)邦德國奶牛流行性流產(chǎn)是由衣原體感染所致。隨后，法國、羅馬尼亞、保加利亞、西班牙也相繼報道。目前，世界各國幾乎都有本病的報道。1988年，中國農(nóng)業(yè)科學院蘭州獸醫(yī)研究所在國內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)牦牛衣原體性流產(chǎn)，用CFT檢測衣原體抗體陽性率為29.03%，并從流產(chǎn)胎兒分離到8株鸚鵡熱衣原體。牛衣原體感染在世界各地廣泛傳播，引起牛的各種疾病，危害較大。

本病的病原是鸚鵡熱衣原體，屬于衣原體科衣原體屬中的一種微生物。衣原體既不同于病毒，又不同于細菌，是革蘭氏陰性病原體，嚴格細胞內(nèi)寄生。革蘭氏染色陰性，姬姆薩氏法染色良好，呈球形或卵圓形。 衣原體對低溫抵抗力較強，如4℃可存活5d，0℃存活數(shù)周；對高溫抵抗力不強，56℃經(jīng)5min即被滅活。衣原體在0.1%甲醛和0.5%石碳酸中經(jīng)24小時被滅活；在75%酒精中1min被滅活；在含氯消毒劑中1～30min被滅活；紫外線可以迅速殺滅衣原體。衣原體對青霉素、氯霉素、四環(huán)素族和紅霉素敏感，對鏈霉素、卡那霉素，慶大霉素、磺胺類藥物有抵抗力。

2 流行特點

衣原體是自然界中分布最廣的病原體之一?；疾游锖蛶Ь呤潜静〉闹饕獋魅驹?，可通過糞便、尿液、乳汁、淚液、鼻分泌物以及流產(chǎn)的胎兒、胎衣、羊水排出病原體，污染水源、飼料和環(huán)境。本病主要經(jīng)呼吸道、消化道及損傷的皮膚、黏膜感染，也可通過交配或子宮內(nèi)感染。長途運輸也可促使本病的發(fā)生和流行。

本病沒有明顯的季節(jié)性，但以冬春季節(jié)較多見，遇降雪、降溫、寒流等氣候突變時流產(chǎn)率顯著升高。母牛懷孕各期都可能發(fā)生流產(chǎn)，以中后期居多。腦炎多為散發(fā)。感染?？砷L期帶毒，但以后直至流產(chǎn)都無明顯癥狀。

3 臨床癥狀及病理變化

本病的潛伏期為數(shù)天至數(shù)月。病牛主要癥狀為：

（1）流產(chǎn)型：各胎次母牛都可發(fā)病，但頭胎和二胎的多發(fā)，一般在妊娠7～9個月流產(chǎn)，流產(chǎn)常突然發(fā)生，有的體溫升高1℃～2℃。產(chǎn)出死胎或弱犢，胎衣排出遲緩，有的發(fā)生子宮內(nèi)膜炎、陰道炎、乳腺炎和輸卵管炎，產(chǎn)奶量顯著下降，感染群的流產(chǎn)率約為10%～40%。公牛感染后，常發(fā)生睪丸炎、附睪炎和精囊炎，精液品質(zhì)下降，有的睪丸萎縮，發(fā)病率可達10%。衣原體可通過精液傳染給母牛，使子宮感染，而導(dǎo)致不孕。胎兒蒼白，胎膜水腫、貧血，皮膚及黏膜有小的出血點，皮下水腫。流產(chǎn)母牛常有子宮內(nèi)膜炎、子宮頸炎和陰道炎，伴有生殖道黏膜和局部淋巴結(jié)出血。組織學檢查，胎兒許多器官均有彌漫性和局灶性網(wǎng)狀內(nèi)皮細胞增生變化。

（2）肺腸炎型：主要見于6月齡以前的犢牛，潛伏期1～10d。表現(xiàn)抑郁、腹瀉，體溫升高到41℃～42℃，食欲缺乏，以后出現(xiàn)咳嗽和支氣管肺炎癥狀。真胃和小腸黏膜增厚，皺裙增多，呈卡他性胃腸炎變化。關(guān)節(jié)出現(xiàn)漿液纖維素性炎癥，甚至引起腱鞘炎和黏液囊炎。

（3）關(guān)節(jié)炎型：多見于犢牛，潛伏期4～20d，病初體溫升高1℃～3℃，厭食，患牛腿部疼痛，不愿站立和運動，2～3d后關(guān)節(jié)腫大，局部皮溫升高、僵硬疼痛、跛行明顯。一般在出現(xiàn)臨床癥狀后1～2周死亡。病變波及數(shù)個關(guān)節(jié)，關(guān)節(jié)腫大、周圍水腫、充血，關(guān)節(jié)囊中有大量淡黃色液體，滑膜附有纖維素絮片。嚴重者腱和周圍肌肉組織水腫、出血，關(guān)節(jié)囊增厚。

（4）腦脊髓炎型：3歲以下的犢牛多發(fā)，潛伏期4～31d，死亡率高達50%。病初體溫突然升高到40.5℃～42℃，精神沉郁，流涎，共濟失調(diào)，出現(xiàn)神經(jīng)癥狀，角弓反張，最后死亡。病程10～20d。腦和脊髓充血、水腫，腦脊液增多。慢性病例伴有纖維素性腹膜炎、胸膜炎和心包炎。組織學檢查，腦和脊髓神經(jīng)元變性，神經(jīng)膠質(zhì)細胞壞死，神經(jīng)纖維輕度液化，并有淋巴細胞、巨噬細胞和中性粒細胞浸潤，淋巴細胞和巨噬細胞在腦血管周圍形成血管套并浸潤于腦膜。

（5）乳腺炎型：衣原體侵害乳房時，可見乳房明顯腫脹，發(fā)熱，水腫，發(fā)硬，產(chǎn)奶量下降、牛奶變成帶有多量白色纖維素的凝塊，呈黃色液體。

（6）結(jié)膜炎型：潛伏期10～15d，結(jié)膜炎呈單側(cè)或雙側(cè)。病眼流淚、羞明，眼瞼充血腫脹。經(jīng)2～3d，角膜發(fā)生不同程度的混濁、潰瘍。病程8～10d，無嚴重感染時則呈良性經(jīng)過。角膜潰瘍者，病程可達數(shù)周。結(jié)膜明顯充血水腫。角膜水腫、糜爛和潰瘍。鏡檢，結(jié)膜上皮細胞里可發(fā)現(xiàn)初體或原生小體。

4 診斷

根據(jù)流行特點、癥狀和病理變化進行綜合分析，可獲初步診斷。確診需作實驗室檢查。

4.1 涂片檢查

用姬姆薩氏法染色。鏡檢，在油鏡下可見呈藍紫色的衣原體包涵體或呈紅色致密的原生小體。

4.2 血清學檢查

常用方法是補體結(jié)合反應(yīng)。動物感染后7～l0d，血清中就可檢出衣原體屬特異性抗體，l5～20d達到高峰，通常采取急性和恢復(fù)期的雙份血清，如抗體滴度增高4倍以上，認為系陽性。也可用血清中和試驗來檢查。

4.3 分離培養(yǎng)

取病料懸液0.3ml接種于孵化6～7d雞胚卵黃囊中，感染雞胚常于5～12d死亡，胚胎或卵黃囊發(fā)生充血、出血，取卵黃囊抹片鏡檢，可見大量原生小體。若雞胚不死亡，可在接種后l0～l4d收取卵黃囊盲傳，3代不死者判為陰性。將病料經(jīng)腦內(nèi)、鼻腔或腹腔途徑接種SPF小鼠或豚鼠，均可進行衣原體的分離和繁殖。

4.4 PCR檢測衣原體DNA

PCR診斷方法快速、可靠，可檢出60～600fg衣原體DNA（約為6～60個基因組拷貝），比用細胞或雞胚培養(yǎng)進行病原診斷靈敏度更高。其缺點是需要昂貴的儀器設(shè)備，診斷成本高。蘭州獸醫(yī)研究所已建立起衣原體DNA 的PCR 檢測方法。

5 防控措施

（1）防止動物暴露于被衣原體污染的環(huán)境中，建立密閉的飼養(yǎng)系統(tǒng)，杜絕其他動物攜帶病原體進入，尤其是從外面引種時，應(yīng)進行血清學檢測，血清學陽性的牛嚴禁引進，從源頭上杜絕此病的傳入。

在發(fā)病后的牛場，由于發(fā)病后病牛的糞便、尿、乳汁及流產(chǎn)胎兒、胎衣和羊水皆含有大量病原菌，有可能污染水源和飼料，經(jīng)消化道感染健康牛，因此，動物發(fā)病后要注意對其排出的有害物進行集中徹底的無害化處理，防止病原菌反復(fù)感染。

（2）建立嚴格的衛(wèi)生消毒制度：在平時的飼養(yǎng)管理中要嚴格注意進出人員、車輛、用具、場地等的衛(wèi)生消毒，用2%～5%來蘇兒或2%氫氧化鈉等進行有效的消毒，并加強產(chǎn)房的衛(wèi)生消毒工作，以防新生犢牛感染本病，同時還應(yīng)防止其他動物如貓、野鼠、家禽等攜帶的疫源性衣原體的侵入。

（3）對曾經(jīng)發(fā)病的牛場，每年除定期進行血清學監(jiān)測外，還應(yīng)制定疫苗免疫計劃，定期進行疫苗免疫接種。對繁殖母牛，在每次配種前1個月或配種后1個月免疫1次，對再次發(fā)生流產(chǎn)或產(chǎn)弱犢的母牛應(yīng)予以淘汰；種公牛每年免疫2次。淘汰發(fā)病種公牛。

（4）藥物預(yù)防和治療：最常用的藥物是四環(huán)素和土霉素，在感染早期，連續(xù)5天以上投給大劑量的四環(huán)素，可使疫病得到控制。對妊娠病牛，肌肉注射長效土毒素，按20mg/kg，1次/d，持續(xù)2周，可減少暴發(fā)衣原體性流產(chǎn)和胎兒死亡。也可用氯霉素或青霉素肌肉注射，1～2次/d，連用3d。在精液中發(fā)現(xiàn)衣原體的種公牛，應(yīng)以治療量四環(huán)素連續(xù)投藥3～4d，間隔5d再重復(fù)一個療程。對流產(chǎn)母牛，尤其是出現(xiàn)子宮內(nèi)膜炎的病例除全身治療外，還應(yīng)向子宮內(nèi)投藥。

隨著畜牧業(yè)的迅速發(fā)展，動物飼養(yǎng)密度的日益加大，頻繁的動物流通，做好牛衣原體病的防治將有著重大的現(xiàn)實意義。預(yù)防本病應(yīng)加強飼養(yǎng)管理，消除各種誘發(fā)因素。流行本病的地區(qū)，牛群應(yīng)定期檢疫，及時淘汰病牛和血清學陽性牛。發(fā)生本病時，應(yīng)及時隔離病牛，對污染的牛舍、場地等環(huán)境進行徹底消毒。