罕佐拉·則敏

（岳普湖縣岳普湖鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，新疆岳普湖 844400）

家畜口蹄疫的免疫抗體檢測(cè)方法

罕佐拉·則敏

（岳普湖縣岳普湖鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站，新疆岳普湖 844400）

口蹄疫主要是由口蹄疫病毒所引起的，是一種急性的、高度接觸性的傳染病，對(duì)畜牧業(yè)發(fā)展能夠產(chǎn)生嚴(yán)重的危害。因此，如何做好免疫抗體檢測(cè)，進(jìn)而有效預(yù)防牛羊口蹄疫發(fā)生尤為關(guān)鍵。近些年來(lái)，經(jīng)過(guò)不斷地研究與探索，疫苗注射對(duì)于牛羊口蹄疫防治具有良好的效果。

近些年來(lái)，基于牛羊口蹄疫的嚴(yán)重危害，我國(guó)已經(jīng)將其列入強(qiáng)制免疫的范圍，因此，能否及時(shí)做好免疫抗體的效價(jià)檢測(cè)不僅僅是關(guān)系到能夠做好免疫質(zhì)量評(píng)價(jià)的關(guān)鍵，同時(shí)也是關(guān)系到能否為牛羊口蹄疫免疫提供科學(xué)依據(jù)的關(guān)鍵。但是，在實(shí)際工作中，由于所采用的抗體檢測(cè)方法不同，往往會(huì)導(dǎo)致檢測(cè)的結(jié)果呈現(xiàn)出一定的差異性，因此科學(xué)選擇抗體檢測(cè)方法尤為關(guān)鍵。正向間接血凝試驗(yàn)和液相阻斷可以說(shuō)是兩種常用的抗體檢測(cè)方法。為此，通過(guò)平行對(duì)比檢測(cè)試驗(yàn)的方法對(duì)兩種檢測(cè)手段進(jìn)行分析。

1 材料與方法

1.1 被檢測(cè)血清

檢測(cè)血清采用隨機(jī)抽取的方法，主要來(lái)源就是已經(jīng)成功注射牛羊O型-亞洲I型口蹄疫雙價(jià)滅活疫苗的牛血液樣品與羊血液樣品，建議在21天左右的時(shí)間進(jìn)行血樣提取，在完成血清的分離后，將待測(cè)血清置于4攝氏度左右的冰箱保存。

1.2 關(guān)于診斷試劑

所選用診斷試劑為同一生產(chǎn)批號(hào)的口蹄疫O型正向血凝抗原、陽(yáng)性血清、陰性血清、稀釋液以及O型口蹄疫液相阻斷ELLSA檢測(cè)試劑盒。

1.3 關(guān)于檢測(cè)方法及結(jié)果的判定

正向間接血凝試驗(yàn)一定要嚴(yán)格按照說(shuō)明進(jìn)行操作，如果抗體的效價(jià)高于1：32的話(huà)，即可視抗體為合格；同樣，O型口蹄疫液相阻斷也要嚴(yán)格按照說(shuō)明進(jìn)行操作，在結(jié)果的判定方面我們通常是將病毒抗原對(duì)照的平均OD值的一半為臨界值，也就是參考值，如果被測(cè)血清的OD值高出臨界值，那么為陰性孔，如果低于臨界值，就為陽(yáng)性孔，需要注意的是，陽(yáng)性孔的最高稀釋度就是血清的抗體效價(jià)，如果高于1：64的話(huà)，我們可以認(rèn)為抗體合格。

2 結(jié)果

通過(guò)正向間接血凝檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)抽取的牛羊樣本中，口蹄疫的免疫合格率分別為81.9%和83.67%，也就是說(shuō)在所抽取的105頭牛和98只羊中，分別有86頭牛和82只羊的抗體檢測(cè)是合格的。

通過(guò)液相阻斷法檢測(cè)，在所抽取的牛羊樣本中，口蹄疫的合格免疫率分別為80%和80.61%，也就是說(shuō)在105頭牛和98只羊中，分別有84頭牛和79只羊的免疫抗體檢測(cè)是合格的。

3 結(jié)果分析

從檢測(cè)的實(shí)際結(jié)果來(lái)看，無(wú)論是正向間接血凝檢測(cè)，還是液相阻斷檢測(cè)，結(jié)果是基本相符合的，也就是說(shuō)對(duì)于同一批血清的檢測(cè)抗體效價(jià)來(lái)說(shuō)，具有顯著的對(duì)應(yīng)關(guān)系，任何一種檢測(cè)方法敏感性和特異性低相對(duì)顯著，試驗(yàn)結(jié)果科學(xué)、可靠。

需要注意的是，從檢測(cè)的結(jié)果來(lái)看，正向間接血凝檢測(cè)的合格率要稍高于液相阻斷檢測(cè)的合格率，這可能與前者在結(jié)果的判定方面需要肉眼判定有一定的關(guān)系，結(jié)果具有一定的主觀性。

正向間接血凝試驗(yàn)的優(yōu)勢(shì)在于操作簡(jiǎn)單，儀器少，價(jià)格低，但是結(jié)果的判定具有定的主觀性，也就是說(shuō)和實(shí)驗(yàn)員的素養(yǎng)有著一定的關(guān)系。換句話(huà)說(shuō)，對(duì)于同樣的血清，不同的實(shí)驗(yàn)員進(jìn)行檢測(cè)，所獲取的結(jié)果可能存在某種程度的差異。再一個(gè)就是這種檢測(cè)方法對(duì)于所抽取血樣的要求也相對(duì)要高；而液相阻斷檢測(cè)無(wú)論是在靈敏度，還是在特異性等方面，都更有優(yōu)勢(shì)，而且不受實(shí)驗(yàn)人員主觀影響，但是所需要的儀器設(shè)備更加煩瑣、專(zhuān)業(yè)，對(duì)操作人員的操作水平要求高，試劑的價(jià)格也相對(duì)較高。

基于牛羊口蹄疫的重大危害，每一次關(guān)于重大動(dòng)物一定防控結(jié)果的檢驗(yàn)中，不僅僅要投入大量的人力、物力以及財(cái)力，但是由于受到檢測(cè)方法、檢測(cè)水平以及檢測(cè)試劑等相關(guān)因素的影響，檢測(cè)結(jié)果往往存在著一定的差異，也給進(jìn)一步做好免疫工作帶來(lái)了不少的困難。為此，筆者建議，一定要立足實(shí)際，根據(jù)檢驗(yàn)樣本的實(shí)際情況，選用合適的檢測(cè)方法。如果是省級(jí)或者更高層級(jí)的機(jī)構(gòu)，檢驗(yàn)樣本的數(shù)量不大的話(huà)，建議選用液相阻斷法進(jìn)行檢測(cè)，如果樣本數(shù)量大，又是基層機(jī)構(gòu)的話(huà)，建議選擇正向間接血凝試驗(yàn)檢測(cè)法。

4 結(jié)語(yǔ)

從上文的論述中，我們不難看出，人們已經(jīng)普遍意識(shí)到牛羊口蹄疫的巨大危害，并且開(kāi)始重視做好疫苗注射工作，希望能夠有效預(yù)防口蹄疫，進(jìn)而盡量降低因此可能帶來(lái)的經(jīng)濟(jì)損失。但是，疫苗注射的實(shí)際效果如何，是否真正能夠發(fā)揮預(yù)期的防治效用，就必須要通過(guò)免疫抗體的檢測(cè)情況來(lái)判定，如果檢測(cè)情況達(dá)標(biāo)，那么可以說(shuō)明是有效的，是可以繼續(xù)應(yīng)用的，對(duì)于牛羊口蹄疫是能夠真正起到良好的防治效用的；如果檢測(cè)不理想，能夠排除實(shí)驗(yàn)操作失誤等因素影響的話(huà)，就要考慮所選擇疫苗是否科學(xué)，是否合理，及時(shí)做出調(diào)整，保證疫病的實(shí)際防治效果。

免疫抗體的檢測(cè)方法有很多，但沒(méi)有一種方法是真正完美的，因此，在實(shí)際選擇的時(shí)候，要立足當(dāng)?shù)氐膶?shí)際水平，主要是樣本的數(shù)量、儀器設(shè)備以及資金、技術(shù)水平等相關(guān)因素，做出合適的選擇，保證結(jié)果的準(zhǔn)確性，從而為今后更好做好牛羊口蹄疫免疫工作提供切實(shí)、有力的依據(jù)和參考。

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