鄒孝順袁 芳
(1.重慶市潼南區(qū)寶龍鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,重慶 402681;2.重慶市潼南區(qū)小渡鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,重慶 402681)
重慶板角山羊超排效果的影響因素
鄒孝順1袁 芳2
(1.重慶市潼南區(qū)寶龍鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,重慶 402681;2.重慶市潼南區(qū)小渡鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站,重慶 402681)
自從FSH制品面世以來(lái),許多作者做了大量關(guān)于FSH和PMSG (eCG)超排效果的比較研究。這些研究結(jié)果表明,在排卵率、受精率和高質(zhì)量胚胎的產(chǎn)量方面,F(xiàn)SH超排效果比PMSG好。大多數(shù)情況下使用eCG或之后再用eCG抗體處理難以取得預(yù)期反應(yīng),這可能與山羊降解eCG較快有關(guān),其半衰期僅為10~15h,這要比在牛短許多。山羊超排所用的FSH通常為豬FSH(pFSH),其效果要比eCG好,主要原因可能與其中所含的LH有關(guān)。對(duì)純化的pFSH或者含40%及80%的純化的pLH在山羊超排結(jié)果的比較發(fā)現(xiàn),含40%LH時(shí)效果最好,超排效率較高,可移植胚胎數(shù)量也高。用純化的FSH添加30%、40%和50%的pLH進(jìn)行超排,結(jié)果仍表明FSH 和LH比例高時(shí)超排反應(yīng)好,說(shuō)明在山羊的超排中如果添加40%的LH效果最好。
制劑的來(lái)源不同,超數(shù)排卵效果亦有差異。用Ovagen(羊提純FSH)超排綿羊所得可移植胚胎比用Folltropin(豬提純FSH)多。并且,用國(guó)產(chǎn)激素同樣可獲得類(lèi)似國(guó)外激素的超排效果,不同廠(chǎng)家不同批次間FSH超排效果無(wú)顯著差異。
在山羊超排研究初期,撤栓發(fā)情后采用本交或子宮頸輸精法。這兩種配種方式對(duì)供體的刺激小,不會(huì)對(duì)供體造成損傷。但有研究發(fā)現(xiàn),同期化或超排處理能改變子宮環(huán)境,使精子通過(guò)子宮頸困難,降低了受精率。原因可能與同期發(fā)情處理后精子的轉(zhuǎn)運(yùn)發(fā)生了改變有關(guān),也可能與輸精和排卵的同期化程度較差有關(guān)。前者可通過(guò)子宮內(nèi)腹腔鏡輸精得到解決,后者可通過(guò)發(fā)情后,在輸精前后用GnRH進(jìn)行同期排卵處理。
本交、子宮頸口輸精法、腹腔鏡輸精法各有其優(yōu)缺點(diǎn)。盡管本交及子宮頸口輸精法對(duì)供體受精率較低,但對(duì)供體損傷小,有利于供體重復(fù)利用并降低術(shù)后對(duì)供體繁殖力的影響。腹腔鏡法受精率高,但會(huì)對(duì)供體造成一種刺激及損傷,輸精后不久即進(jìn)行手術(shù)法沖卵,連續(xù)刺激對(duì)供體重復(fù)利用及術(shù)后繁殖力也有一定負(fù)面影響。因此,哪種方式更加經(jīng)濟(jì)合理還有待進(jìn)一步研究。
不同品種的山羊?qū)νN、同劑量激素反應(yīng)不同,超排效果也不同。即使同一品種、相同年齡的動(dòng)物對(duì)激素的敏感性亦有差異。有試驗(yàn)證實(shí),從超數(shù)排卵的效果看,個(gè)體營(yíng)養(yǎng)水平、體重之間的差異不很明顯,但個(gè)體對(duì)激素反應(yīng)的敏感性存在著極大的差異(4~41枚),超排效果與可用胚之間的差異也極顯著,達(dá)100%~0%(8/8~0/12)。
不同年齡的山羊?qū)νN同劑量激素反應(yīng)不同,超排效果也不同,相關(guān)研究表示,2.5~4.5歲供體母羊沖卵時(shí),可用胚隨年齡增長(zhǎng)呈上長(zhǎng)趨勢(shì),且年齡無(wú)顯著差異,而5.5歲供體羊沖卵數(shù)、可用胚數(shù)均低于2.5歲、3.5歲、4.5歲年齡組的結(jié)果。
即使同一品種、同一超排方法,供體超排反應(yīng)也有極大差異,大量的研究表明,F(xiàn)SH處理后的超排反應(yīng)在很大程度上與處理開(kāi)始時(shí)卵巢上卵泡的數(shù)量有關(guān),如果存在有優(yōu)勢(shì)卵泡,則會(huì)使成熟卵泡的數(shù)量減少,可移植胚胎的數(shù)量也相應(yīng)減少。近年來(lái)由于內(nèi)窺鏡和超聲掃描儀在繁殖學(xué)上的應(yīng)用,人們發(fā)現(xiàn)外源FSH處理后的排卵反應(yīng)與卵巢上小腔卵泡(2-3mm)的數(shù)量有關(guān),而回收可移植用胚胎的數(shù)量又受到超排處理時(shí)卵巢上的大卵泡(>6mm)的不利影響。
山羊季節(jié)性多次發(fā)情動(dòng)物,一般來(lái)說(shuō),山羊的發(fā)情周期與綿羊基本相同,主要在春秋兩季,且以秋季發(fā)情旺盛,在每個(gè)發(fā)情季節(jié)有多個(gè)發(fā)情周期。在發(fā)情季節(jié),卵巢處于活動(dòng)狀態(tài),呈現(xiàn)周期性卵泡發(fā)育。因此當(dāng)供體處于發(fā)情及排卵率最高的季節(jié)時(shí),超排效果最佳。相關(guān)研究表明,季節(jié)對(duì)超排效果影響差異顯著,平均每只獲可用胚分別為19.4±12.14枚和14.85±9.17枚。但也有研究顯示,季節(jié)對(duì)超排效果無(wú)顯著影響,只要掌握好超排方法及劑量,無(wú)論繁殖或非繁殖季節(jié)均可獲得較好的超排效果。超排效果還與母本的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài)相關(guān),體況太差會(huì)降低外源激素的有效性。一些研究表明,波爾山羊體況的好與壞對(duì)超排效果影響差異顯著,平均獲得可用胚數(shù)量為16.80±8.75枚和13.32±6.53枚。而有部分則認(rèn)為造成品種間超排效果差異的主要因素是供體羊在營(yíng)養(yǎng)水平上的差異,合理營(yíng)養(yǎng)供給和科學(xué)管理可獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)胚胎。在黃體酮處理期間,供體飼養(yǎng)水平過(guò)高會(huì)抑制黃體酮循環(huán),從而減少活胚的產(chǎn)生。實(shí)踐證明,合理的營(yíng)養(yǎng)供給和科學(xué)的管理不僅是獲得大量?jī)?yōu)質(zhì)胚胎的基礎(chǔ),也是保證胚胎移植羔羊正常生長(zhǎng)發(fā)育所必需的條件之一。
回收超排所產(chǎn)生的卵子(或胚胎)所用的手術(shù)法需要將生殖道牽引出體外,這容易引起術(shù)后粘連導(dǎo)致重復(fù)超排胚胎產(chǎn)量下降。激素處理不是降低重復(fù)超排效果的主要因素。大量研究已經(jīng)得到證實(shí),重復(fù)超排的波爾山羊也具有較好的超排效果。
重復(fù)用pFSH處理會(huì)導(dǎo)致山羊出現(xiàn)免疫反應(yīng),從而使超排反應(yīng)的效果降低,但這種情況在牛不會(huì)出現(xiàn),主要原因可能是由于pFSH和牛的FSH同源性更高。因此在同一供體多次回收胚胎時(shí),建議采用山羊或綿羊FSH制劑。
超排羊在第2次PGF2α處理后,由于母羊個(gè)體間體內(nèi)受體水平不一,發(fā)情出現(xiàn)的時(shí)間有較大的差異(12h左右),若以PG處理時(shí)間來(lái)推算取卵時(shí)間極易造成取卵偏早或過(guò)遲,而以母羊發(fā)情初始肌注LRH的時(shí)間來(lái)推算取卵時(shí)間獲得了滿(mǎn)意的結(jié)果。
目前采用的山羊超排方法大多費(fèi)時(shí)且昂貴,而且反應(yīng)的時(shí)間長(zhǎng)短不一。通過(guò)注射抑制素a鏈片段免疫山羊是目前仍處于研究階段的一種超排方法。研究表明,間隔4周注射2次可使排卵數(shù)比對(duì)照動(dòng)物增加3倍左右,而且只要有抗體效價(jià)存在,則可對(duì)免疫山羊反復(fù)進(jìn)行配種和沖胚。但采用抑制素免疫超排時(shí),主要問(wèn)題是黃體的提早退化率高,面且通常會(huì)出現(xiàn)大量的未排卵卵泡。