(上海市奉賢區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心,上海 201400)
口腔液在豬病檢測上的應(yīng)用
衛(wèi)秀余
(上海市奉賢區(qū)動物疫病預(yù)防控制中心,上海 201400)
血清中抗體的檢測在豬病診斷、健康狀況調(diào)查和免疫效果評估中使用廣泛,特別是對養(yǎng)豬業(yè)有重大影響的豬瘟、豬藍耳病、豬口蹄疫和豬偽狂犬病抗體每年都要進行檢測,以控制疫病的發(fā)生。現(xiàn)有的針對這些病原產(chǎn)生的抗體檢測試劑盒都是為了檢測血清中的IgG,但血清樣品采集費時費力、對豬的應(yīng)激明顯,尤其是對公、母豬采血時還會對采樣人員的安全造成一定威脅,經(jīng)常采血也不符合動物福利的要求。而口腔液的采集比較方便,一般在豬只飼喂前1 h左右、用白色棉紗繩懸掛在豬欄上,讓豬自由咀嚼20~30 min后收集吸附在棉紗繩上的口腔液,冷藏保存送檢。
口腔液是一種唾液和黏膜滲出液的混合物,其中含有來自血液中的IgG以及黏膜免疫產(chǎn)生的分泌型IgA 和IgG抗體[1]。分泌型 IgA 由唾液腺的漿細胞分泌[2],而唾液中絕大多數(shù)的 IgG 來自血清,也有一些IgG 是局部產(chǎn)生的[3]。分泌型抗體的產(chǎn)生對抗原的中和以及感染狀態(tài)的確定有特別的意義[4]。使用口腔液進行疾病診斷和健康評估在人醫(yī)上已經(jīng)得到已經(jīng)廣泛運用,口腔液可以作為麻疹、腮腺炎、肝炎等疾病初步診斷分析的樣品[5]??谇灰涸趧游锛膊z測和疫病監(jiān)測的應(yīng)用包括病原檢測如豬藍耳病病毒、圓環(huán)病毒、偽狂犬病毒等,抗體檢測如豬藍耳病抗體、豬圓環(huán)病毒2型抗體、口蹄疫抗體、偽狂犬抗體、非洲豬瘟抗體、豬瘟抗體檢測[6-8]等。但是在抗體檢測中由于口腔液中抗體的含量顯著低于血清中的含量,所以簡單地直接使用檢測血清樣品的ELISA試劑盒檢測口腔液中相應(yīng)的抗體時,往往與血清樣品的檢測結(jié)果符合率較低。我們經(jīng)過大量的篩選試驗,證實了使用口腔液進行豬瘟、豬藍耳病、豬口蹄疫和豬偽狂犬等抗體檢測時,選用的ELISA試劑盒必須匹配是血清稀釋倍數(shù)在20倍以上的,這樣口腔液原液的抗體檢測結(jié)果與血清抗體檢測結(jié)果的符合率可以達到96%以上;如果試劑盒的血清稀釋倍數(shù)要求在40倍以上的,口腔液可以進行2倍稀釋后進行檢測。
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2016-06-22)