周虹妤裴 磊毛愛民馮嘉林孫科敏

（1.無(wú)錫市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇無(wú)錫　214000；2.無(wú)錫出入境檢驗(yàn)檢疫局，江蘇無(wú)錫　214000）

H9N2病毒研究進(jìn)展

周虹妤1裴 磊2毛愛民1馮嘉林1孫科敏1

（1.無(wú)錫市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，江蘇無(wú)錫214000；2.無(wú)錫出入境檢驗(yàn)檢疫局，江蘇無(wú)錫214000）

禽流感H9N2病毒在世界范圍廣泛存在，對(duì)人和動(dòng)物的健康安全構(gòu)成嚴(yán)重威脅，同時(shí)，也給我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。禽流感H9N2病毒在宿主體內(nèi)易發(fā)生基因重組，在人與動(dòng)物的交叉感染過程中發(fā)揮了重要作用，與能感染人的H7N9和H10N8禽流感病毒具有很高的同源性，說(shuō)明部分基因可能來(lái)源于禽流感H9N2病毒。本文就禽流感H9N2病毒的傳染病學(xué)、跨種傳播以及遺傳進(jìn)化等方面的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。

禽流感H9N2遺傳進(jìn)化

禽流感H9N2病毒是全球范圍內(nèi)傳播最為廣泛的禽流感病毒，能導(dǎo)致產(chǎn)蛋率下降，繼發(fā)其他病原菌感染時(shí)可致高死亡率。禽流感H9N2病毒進(jìn)化樹分為歐亞分支和北美分支，歐亞分支可分為BJ/94-like、G1-like和Y439-like。BJ/94-like和G1-like類群的禽流感病毒于90年代中期在中國(guó)南方廣泛流行。H9N2具有廣泛的宿主范圍，可感染多種禽類如：雞、鴨、鵪鶉、鴿子、鷓鴣、白鷺等，并可感染豬、狗、小白鼠和豚鼠等動(dòng)物。1994年，我國(guó)首次暴發(fā)禽流感H9N2病毒，感染肉雞死亡率為10%～40%，產(chǎn)蛋率下降14%～75%。

H9N2流感屬于低致病性流感，極少導(dǎo)致家禽直接死亡，患禽出現(xiàn)產(chǎn)蛋量減少，輕微呼吸道感染和精神萎靡等癥狀。偶發(fā)感染人的病例，但尚無(wú)證據(jù)表明H9N2流感病毒可在人與人之間直接傳播。

1　臨床癥狀

H9N2流感可通過飛沫、灰塵、飼料和水等媒介傳播，單獨(dú)感染H9N2不產(chǎn)生明顯癥狀，但感染家禽口腔黏液增加，肺粘連，喉、氣管甚至腸道可見出血點(diǎn)，病毒可在喉、氣管上皮細(xì)胞快速?gòu)?fù)制。

感染H9N2流感家禽易繼發(fā)大腸桿菌等其他病原菌感染，使得致死率高于10%。氣管和支氣管因大量黏液而發(fā)生栓塞，產(chǎn)生嚴(yán)重的呼吸系統(tǒng)疾病，嚴(yán)重的導(dǎo)致死亡，輸卵管和子宮分泌液增多，卵泡出血。肉雞因日齡較小和飼養(yǎng)條件較差而更易感。H9N2感染蛋雞的發(fā)病率約10%，產(chǎn)蛋率可降低到約20%。

2　疫苗

1998年開始，我國(guó)就實(shí)行長(zhǎng)期疫苗免疫計(jì)劃來(lái)控制禽流感H9N2病毒傳播，以滅活疫苗為主，至今已使用超過20余種疫苗，并且不斷更新疫苗株，盡管如此，在疫苗免疫養(yǎng)殖場(chǎng)，禽流感H9N2病毒仍時(shí)有發(fā)生，如何提高疫苗免疫的有效性成為難題。

3　抗原漂移

抗原漂移是造成疫苗免疫失敗和禽流感H9N2病毒反復(fù)流行的原因之一。不同亞型禽流感病毒的HA抗原決定簇大不相同。鑒定禽流感H9N2病毒HA基因的抗原表位對(duì)于監(jiān)測(cè)其不同抗原變異體和開發(fā)有效的疫苗至關(guān)重要。但是，目前尚無(wú)相關(guān)研究能徹底闡明禽流感H9N2病毒HA基因的精細(xì)抗原表位結(jié)構(gòu)。

4　跨種傳播

目前，僅偶爾見到禽流感H9N2病毒感染人的事件，尚無(wú)證據(jù)證明，禽流感H9N2病毒能在人與人之間直接傳播。感染H9N2的病人呈現(xiàn)溫和的流感樣癥狀而易被忽視，血清學(xué)調(diào)查顯示，H9N2流感抗體陽(yáng)性數(shù)量大幅高于確診數(shù)量。與家禽密切接觸的工作人員是高風(fēng)險(xiǎn)人員，調(diào)查顯示2.3%～4.6%的飼養(yǎng)場(chǎng)工人H9N2抗體呈陽(yáng)性。

H9N2還可傳染給豬，產(chǎn)生具有新的抗原和遺傳特性的變異株，在狗體內(nèi)也分離到H9N2流感病毒，有調(diào)查顯示中國(guó)南方2010至2012的H9N2血清抗體陽(yáng)性率分別是20.21%、28.98%和44.85%，陽(yáng)性率逐年升高說(shuō)明H9N2已在狗群中普遍流行。H9N2流感在不同宿主中廣泛流行提高了其發(fā)生基因重配的概率，加大了潛在的重大公共安全風(fēng)險(xiǎn)。

5　遺傳進(jìn)化

我國(guó)大多數(shù)HA和NA基因進(jìn)化樹屬于BJ/94-like和G1-like兩個(gè)分支，BJ/94-like分支宿主范圍較G1-like分支更為廣泛。H9N2流感病毒的六個(gè)內(nèi)部基因也具有很大的多樣性，說(shuō)明其基因重配較為頻繁，從而產(chǎn)生眾多基因型。

我國(guó)H9N2流感病毒HA基因的316位置發(fā)生A到S變異和NA基因61-63位置發(fā)生三個(gè)氨基酸刪除的病毒增多，HA-A316S增加了HA裂解的有效性，短的NA莖體增強(qiáng)NA酶活性，有利于病毒從細(xì)胞的釋放，這些變異增加了病毒的毒力。此外，H9N2流感病毒還發(fā)現(xiàn)較多HA-Q226L變異，使其對(duì)表達(dá)哺乳動(dòng)物唾液酸a2-6Gal （SAa，2-6）受體的上皮細(xì)胞易感。一些分離株可在豚鼠和雪貂經(jīng)直接接觸傳播，但不能通過飛沫傳播。感染H9N2流感病毒的獼猴呈現(xiàn)雙向熱和病毒性肺炎癥狀，病理解剖顯示病毒可在上、下呼吸道復(fù)制。狗和貓也可經(jīng)上呼吸道感染H9N2流感病毒，但病毒只能在貓間傳播，而不能在狗間傳播。

H9N2流感病毒PB2-D253N和PB2-Q591K變異體具有更大的多聚酶活性，誘導(dǎo)巨噬細(xì)胞產(chǎn)生更多的TNF-α， 使病毒在支氣管上皮細(xì)胞高效復(fù)制，增強(qiáng)其致病性。H9N2流感病毒在多個(gè)動(dòng)物模型的傳代實(shí)驗(yàn)顯示，隨著傳代的進(jìn)行，病毒毒性逐漸加大，同時(shí)更好地適應(yīng)了宿主，在宿主體內(nèi)有效復(fù)制并造成群體間流行。這些傳代病毒與其父輩病毒相比，更易于感染小白鼠，復(fù)制效率也更高，有研究表明PB2基因的PB2-M147L和PB2-E627K基因突變與此有關(guān)。

有研究表明在雪貂體內(nèi)，H9N2流感的HA或/和NA可與H1N1流感病毒重組；含有禽源HA、NA基因以及人源H3N2內(nèi)部基因的重組病毒具有了飛沫傳播的特性，HA基因的HA1-T189A和HA2-G192R的變異被證明與之相關(guān)。

6　作為重組病毒基因供體

H9N2可與其他流感病毒發(fā)生基因重組。G1-like分支H9N2流感病毒作為基因供體提供的6個(gè)內(nèi)部基因可能與H5N1的外部基因發(fā)生重組，產(chǎn)生的病毒可能是導(dǎo)致1997年香港發(fā)生人感染禽流感的致病病原。BJ/94-like分支禽流感H9N2病毒提供的6個(gè)內(nèi)部基因可能與H7N9、H10N8的外部基因發(fā)生重組，產(chǎn)生了能感染人的H7N9或H10N8重組病毒，該重組病毒與自然環(huán)境中流行的H9N2流感病毒進(jìn)一步重組，產(chǎn)生了多種基因型。

源于H9N2流感病毒的重組病毒嚴(yán)重威脅人類的公共衛(wèi)生安全和養(yǎng)禽業(yè)的健康發(fā)展，相比十年前的H9N2流感毒株，目前流行毒株對(duì)哺乳動(dòng)物更易感，需要進(jìn)一步深入研究H9N2基因在禽流感病毒獲得感染人的屬性過程中發(fā)揮了何種作用。此外需特別引起重視的是，為預(yù)防和控制禽流感病毒的傳播，除了疫苗免疫以外，還須進(jìn)一步加強(qiáng)養(yǎng)殖場(chǎng)生物安全防護(hù)，同時(shí)關(guān)閉活禽交易市場(chǎng)以控制疫情的傳播風(fēng)險(xiǎn)。

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