淺談動物檢測樣品的采集、保存、運輸

蘭彩霞

（寧夏涇源縣動物疾病預(yù)防控制中心，寧夏涇源 756400）

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淺談動物檢測樣品的采集、保存、運輸

蘭彩霞

（寧夏涇源縣動物疾病預(yù)防控制中心，寧夏涇源 756400）

動物病料樣品的采集是動物疾病診斷、流行病學(xué)調(diào)查或免疫監(jiān)測所不可缺少的重要步驟，而實驗室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性、有效性除受實驗方法、檢測試劑、實驗操作等因素的影響外，還要受到樣品的采集，運輸、保存等因素的影響。本文通過檢測樣品在采集、保存和運輸過程中必須注意的幾個主要環(huán)節(jié)，說明樣品是監(jiān)測工作順利開展的基礎(chǔ)，也決定了實驗結(jié)果的可靠性。

1 樣品采集原則

1.1 剖檢基本條件

凡發(fā)現(xiàn)患畜急性死亡懷疑是炭疽，則不可隨意解剖，應(yīng)采取患畜耳尖靜脈的血液做初步檢驗，萬不得已時，局部解剖作脾臟觸片的顯微鏡檢查。只有確定不是炭疽后，方可進(jìn)行剖檢。

1.2 采取病料的種類

根據(jù)不同的疾病或檢驗?zāi)康?，采其相?yīng)的臟器、內(nèi)容物、分泌物、排泄物或其他材料；進(jìn)行流行病學(xué)調(diào)查、抗體檢測、環(huán)境衛(wèi)生檢測時，樣品的數(shù)量應(yīng)滿足統(tǒng)計學(xué)的要求。采樣時應(yīng)小心謹(jǐn)慎，以免對動物產(chǎn)生不必要的刺激或損害和對采樣者構(gòu)成威脅。

1.3 內(nèi)臟病料的采取

如患畜已死亡，應(yīng)盡快采集，最遲不超過6h；血液樣品在采集前一般禁食8h。

1.4 技術(shù)人員的安全

應(yīng)做好人身防護(hù)，嚴(yán)防人畜共患病感染；應(yīng)防止污染環(huán)境，防止疫病傳播，做好環(huán)境消毒和病害肉尸的處理。

2 器械消毒

刀、剪、鑷子等用具煮沸消毒30min，使用前用酒精擦拭，用時進(jìn)行火焰消毒。器皿經(jīng)103kPa高壓30min ，或經(jīng)160℃干烤2h滅菌；注射器和針頭煮沸30min。采取一種病料，使用一套器械與容器，不可重復(fù)采其他病料或容納其他臟器材料。采過病料的用具應(yīng)先消毒后清洗。檢查過的器械要放在2mol/L的氫氧化鈉（NaOH）溶液中浸泡2h以上，才可再使用。

3 血液樣品的采集

3.1 采血方法

對動物采血部位的皮膚先剃毛，75%的酒精消毒，待干燥后采血，采血可用針管、針頭、真空管，將血液沿管壁滴到開口的試管內(nèi)。

3.2 采血種類

3.2.1 全血樣品

進(jìn)行血液學(xué)分析，細(xì)菌、病毒或原蟲培養(yǎng)，通常用全血樣品，樣品中加抗凝劑枸櫞酸鈉。采血時應(yīng)直將血液滴入抗凝劑中，并緩緩連續(xù)搖動，充分混合。

3.2.2 血清樣品

用作血清樣品的血液中不加抗凝劑，血液在室溫下靜置2h～4h（防止曝曬），待血液凝固，經(jīng)低速離心分離出血清。若需長時間保存，則將血清置20℃以下保存，但要盡量防止或減少反復(fù)凍融。樣品容器上貼詳細(xì)標(biāo)簽。

4 一般組織

4.1 采樣方法

用常規(guī)解剖器械剝離病、死動物的皮膚，體腔用消毒的器械打開，所需病料按無菌操作方法從新鮮尸體中采集。剖開腹腔后，注意不要損壞腸道。

每個組織塊應(yīng)單獨放在已消毒的容器內(nèi)，容器壁上注明日期、組織或動物名稱。注意防止組織間相互污染。

4.2 采樣種類

4.2.1 病原分離樣品的采集

用于微生物學(xué)檢驗的病料應(yīng)新鮮，盡可能地減少污染；用于細(xì)菌分離的樣品采集，首先以燒紅的刀片燙烙臟器表面，在燒烙部位刺一孔，用滅菌后的鉑耳伸入孔內(nèi)，取少量組織或液體，作涂片鏡檢或劃線種于適宜的培養(yǎng)基上。

4.2.2 組織病理學(xué)檢查樣品的采集

采集包括病灶及臨近正常組織的組織塊，立即放入10倍于組織塊的10%福爾馬林溶液中固定。組織塊厚度不超過0.5cm，組織塊切忌擠壓、刮摸和用水洗。如作冷凍切片用，則將組織塊放在0℃～4℃容器中，盡快送實驗室檢驗。

5 排泄物、腸內(nèi)容物及其他檢查樣品的采集

5.1 腸管

只需選擇病變最明顯的部分，將其中的內(nèi)容物棄去，用滅菌生理鹽水輕輕沖洗；腸內(nèi)容物放入盛有滅菌的30%甘油鹽水緩沖保存液中送檢；從體外采集糞便，用拭子小心地插到直腸黏膜表面采集糞便，然后將拭子放入盛有滅菌的30%甘油鹽水緩沖保存液中送檢。

5.2 呼吸道

應(yīng)用滅菌的棉拭子采集鼻腔、咽喉或氣管內(nèi)的分泌物，蘸取分泌物后立即將拭子浸入保存液中，密封低溫保存。常用的保存液有pH7.2～7.4的滅菌肉湯或磷酸鹽緩沖鹽水，一般每支拭子需保存液5mL。

6 中小家畜及禽類整體樣品

6.1 胎兒

將流產(chǎn)后的整個胎兒，用塑料薄膜、油布或數(shù)層不透水的油紙包緊，裝入木箱內(nèi)，立即送往實驗室。

6.2 小家畜及家禽

將整個尸體包入不透水塑料薄膜、油紙或油布中，裝入木箱內(nèi)，送往實驗室。

7 送檢樣品的記錄

送往實驗室的樣品應(yīng)有一式二份的流調(diào)登記表、采樣登記表，一份隨樣品送實驗室，另一份備案。注明要求做何種試驗；

8 結(jié)論

（1）樣品采集要有代表性和合理性。開展疫病監(jiān)測采樣時要根據(jù)監(jiān)測方案的整體要求、目的、方法，選擇具有代表性的場或點，盡可能充分、全面地反映總體的特征。同時還要考慮動物的飼養(yǎng)密度、日齡、體質(zhì)強(qiáng)弱、地勢及交通特點等因素，只有這樣，采集的監(jiān)測樣品才能綜合評估出總體疫病的流行和分布趨勢。

（2）樣品采集的時效性和適量性。由于監(jiān)測項目的不同，樣品采集是有時間要求的，目前疫病監(jiān)測主要通過病原監(jiān)測和抗體監(jiān)測兩種方法。不適宜在免疫后15天內(nèi)采樣，無論是采取抗體監(jiān)測還是病原檢測，都會影響監(jiān)測結(jié)果的真實、準(zhǔn)確。

（4）要避免樣品泄漏。裝在試管或廣口瓶中的病料密封后裝在冰瓶中運送，防止試管和容器傾倒。如需寄送，則用帶螺口的瓶子裝樣品，并用膠帶或石蠟封口。將裝樣品的并有識別標(biāo)志的瓶子放到更大的具有堅實外殼的容器內(nèi)，并墊上足夠的緩沖材料。

（5）制成的涂片、觸片、玻片上注明號碼，并另附說明。玻片最好用涂片盒子盛裝，再用自封袋包裝，在保證不被壓碎的條件下運送。

（6）所有樣品都要貼上詳細(xì)標(biāo)簽。

參考文獻(xiàn)

[1] 鐘群芳.淺談動物樣品采集、運輸與保管的體會[J].畜牧獸醫(yī)科技信息，2006，（2）：58.