◎戴佩珍，劉君超

（瑞安市食品檢驗(yàn)檢測中心，浙江 瑞安 325200）

高效液相色譜分析的質(zhì)量控制策略

◎戴佩珍，劉君超

（瑞安市食品檢驗(yàn)檢測中心，浙江 瑞安 325200）

高效液相色譜分析由于其具有的眾多優(yōu)勢使得其在許多領(lǐng)域中發(fā)揮了非常重要的作用。因此，本文首先對高效液相色譜分析方法的含義、特征以及發(fā)展現(xiàn)狀進(jìn)行了詳細(xì)的探討，最后對高效液相色譜分析的質(zhì)量控制有效測量進(jìn)行了分析，希望能夠?yàn)橥惖膶?shí)踐提供借鑒。

高效液相色譜分析；影響因素；質(zhì)量控制；策略

高效液相色譜分析法自從20世紀(jì)60年代產(chǎn)生之后，便在很多領(lǐng)域內(nèi)獲得了廣泛的應(yīng)用，尤其適合應(yīng)用在高沸點(diǎn)、大分子、熱穩(wěn)定性差以及強(qiáng)極性的化合物的分離和分析過程中，由于其具有的眾多優(yōu)勢使得其在環(huán)保、農(nóng)業(yè)、工業(yè)、生化、醫(yī)藥等各個學(xué)科領(lǐng)域中發(fā)揮了重要的作用［1，2］。但在實(shí)際的應(yīng)用中，如果能夠進(jìn)一步提升高效液相色譜分析方法的分析質(zhì)量，無論對于科研工作還是人們的生產(chǎn)生活都具有非常重要的影響［3，4］。

1　高效液相色譜的相關(guān)理論

1.1高效液相色譜分析的含義

所謂液相色譜分析主要是指其流動相為液體的色譜技術(shù)，屬于色譜法中最為古老的一種，不過通過對填料粒度及柱壓進(jìn)行改進(jìn)，在經(jīng)典的液相柱色譜的基礎(chǔ)上引入了氣相色譜的塔板理論，在技術(shù)上采用了高壓輸液泵，高效固定相和高靈敏度的檢測器，實(shí)現(xiàn)了分析速度快、分離效率高和操作自動化，這種色譜技術(shù)被稱為高效液相色譜法，英文簡稱為HPLC。

1.2高效液相色譜分析方法的特征

高效液相色譜分析方法的特征如下：①高壓性，壓力一般能夠達(dá)到150～300 kg/cm2；②高速性，流速為0.1～10.0 mL/min；③高效性，能夠?qū)Π儆喾N物質(zhì)進(jìn)行同步的分離測定；④高靈敏度，紫外檢測器的靈敏度能夠達(dá)到0.01 ng，而且不需要消耗過多的樣品。

此外，高效液相色譜分析還具有具體突出的特征：①速度快，一般情況下對樣品的分析往往在15～30 min便能夠完成，甚至對于一些樣品僅需要5 min便可以完成；②分辨率高，能夠?qū)Σ町愋院苄〉奈镔|(zhì)，比如對手性物質(zhì)進(jìn)行分析和分離；③靈敏度高，紫外檢測器可達(dá)0.01 ng，熒光和電化學(xué)檢測器可達(dá)0.1 pg。同時，采用高效液相色譜法進(jìn)行分析，還具有柱子可以反復(fù)使用的特點(diǎn)，采用同一根色譜柱能夠分離出不同的化合物。而且由于不需要消耗太多的樣品，也更加有利于對樣品的回收。再加上樣品經(jīng)過色譜柱之后，能夠收集單一組分或者做制備。

2　加強(qiáng)高效液相色譜分析質(zhì)量控制的有效策略

2.1檢測儀器的科學(xué)選擇

能夠選擇科學(xué)合理的檢測儀器，對于高效液相色譜分析法來說，具有非常重要的意義。尤其在檢測操作的實(shí)踐中，更應(yīng)該結(jié)合實(shí)際的情況，選擇合適的檢測儀器，具體來說，可以根據(jù)等待檢測的樣品以及流動相所體現(xiàn)出來的性質(zhì)進(jìn)行具體的評判。同時，還應(yīng)該保證檢測儀器的本身質(zhì)量，應(yīng)該具備良好的響應(yīng)范圍以及線性范圍，同時針對流動相所體現(xiàn)出來的變化不敏感，需要其具有比較高的靈敏度以及重復(fù)性，只有有效保證了以上措施，才能進(jìn)一步保證高效液相色譜分析的質(zhì)量。

2.2固定相的科學(xué)選擇

在高效液相色譜分析中，對固定相的科學(xué)選擇也是非常重要的。在以往的實(shí)踐操作中都是盡量選擇粒徑較小的固體顆粒對色譜柱進(jìn)行填充，并保證股定向的傳質(zhì)速度以及相應(yīng)的機(jī)械強(qiáng)度。而且如果能夠選擇表面多孔以及表面積較大的固定相時，還能夠降低對色譜柱的填充難度，使其在柱子中的分布顯得更加均勻，從而有效縮短出峰的時間，繼而有效達(dá)到增強(qiáng)柱效的重要作用。不過，最為明顯的不足便是該類材料的厚度并不大，在實(shí)踐應(yīng)用中會受到最大允許量的厚度制約，其相應(yīng)的應(yīng)用范圍并不大。目前，很少進(jìn)行手動填柱，而是在市面上直接購買，這樣能夠有效避免手動填柱的不足。

2.3流動相的科學(xué)選擇

在高效液相色譜的分析過程中，如果固定相被確定了下來，那么流動相就是主要的影響因素。因此，還需要對流動相的選擇引起足夠的重視。一般情況下，在具體的選擇過程中，應(yīng)該將雜質(zhì)含量少作為主要的選擇標(biāo)準(zhǔn)，從而使得雜質(zhì)對分析結(jié)果的影響降低到最小的程度。此外，還應(yīng)該注重流動相的選擇要與檢測儀器的選擇具有一定的匹配，繼而保證流動相在檢測波長下不存在吸收或吸收量極小，不會干擾到待測物的分析與測定。如果所選的檢測儀器為示差折光檢測器，則需要選用折光系數(shù)與待測物差距較大的流動相，從而有效提升高效液相色譜分析方法的準(zhǔn)確性，使其能夠有效地應(yīng)用到實(shí)踐過程中。

2.4其他策略

除此之外，為了有效保證高效液相色譜分析的檢測質(zhì)量，還可以采取在檢測過程中根據(jù)樣品的實(shí)際分析情況采取添加質(zhì)控樣品的措施。通過大量的實(shí)踐充分證明，該種做法能夠進(jìn)一步提升高效液相色譜檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。當(dāng)然，檢測過程中檢測人員的高度責(zé)任心與細(xì)致認(rèn)真的工作態(tài)度也是保證檢測質(zhì)量的關(guān)鍵所在。

3　小結(jié)

總之，隨著高效液相色譜分析法在我國很多領(lǐng)域中應(yīng)用范圍的不斷擴(kuò)大，對其質(zhì)量控制的有效策略進(jìn)行研究具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義，也希望通過本文的探討能夠起到拋磚引玉的作用，繼而促進(jìn)該種分析技術(shù)的不斷完善。

[1]張燕青，林雪玉，朱金平，等.高效液相色譜法測定人血清中伏立康唑的質(zhì)量濃度[J].中國藥業(yè)，2014，23（23）：6-7，8.

[2]張仕華，許 彬. 高效液相色譜法測定奶粉中雙氰胺的質(zhì)量濃度[J].中國乳品工業(yè)，2014，42（11）：42-43.

[3]孫 麒，王國華.高效液相色譜指紋圖譜在中藥金銀花質(zhì)量控制中的價值研究[J].四川中醫(yī)，2015，33（2）：95-97.

[4]劉先德.高效液相色譜在食品質(zhì)量檢測中的應(yīng)用[J].中國高新技術(shù)企業(yè)，2015（18）：50-52.

Quality Control Strategy of High Performance Liquid Chromatographic Analysis

Dai Peizhen， Liu Junchao
（RuianFood Inspection and Testing Center， Ruian 325200， China）

High performance liquid chromatographic analysis has played a very important role in many fields because of its many advantages. Therefore， this paper first analyzes the meaning， characteristics and development status of high performance liquid chromatography analysis method. Finally， the quality control measures of high performance liquid chromatography were analyzed， hoping to provide a reference for similar practices.

High performance liquid chromatographic analysis； Influencing factors； Quality control；Strategy

O657.7+2

10.16736/j.cnki.cn41-1434/ts.2016.06.019