袁麗偉， 殷 果

(河北旅游職業(yè)學(xué)院， 河北 承德 067000)

國(guó)慶菊試管苗的生根移栽

袁麗偉， 殷 果

(河北旅游職業(yè)學(xué)院， 河北 承德 067000)

為國(guó)慶菊試管苗在組織培養(yǎng)上的操作技術(shù)及試管苗移栽后的管理提供理論依據(jù)，將國(guó)慶菊無根試管苗接種到含NAA(0.5 mg/L)的1/2MS、1/2N6和脫水MS 3種不同基本成分的培養(yǎng)基中，觀察試管苗在3種不同基本培養(yǎng)基中的生根情況。再將已誘導(dǎo)生根的健壯試管苗移栽到珍珠巖、蛭石、腐殖質(zhì)和純蛭石不同組合配比的4種基質(zhì)中，觀察試管苗移栽成活率。結(jié)果顯示：含NAA(0.5 mg/L)的3種基本培養(yǎng)基均有利于根的誘導(dǎo)，生根率達(dá)100%，但最有利于國(guó)慶菊試管苗生根的基本培養(yǎng)基是脫水MS培養(yǎng)基，其次是1/2N6培養(yǎng)基；國(guó)慶菊試管苗在蛭石∶腐葉土(1∶1)和純蛭石移栽基質(zhì)中移栽成活率較高，平均達(dá)94.8%。

國(guó)慶菊； 試管苗； 組織培養(yǎng)； 移栽； 生根； 培養(yǎng)基

國(guó)慶菊(ChrysanthemummorifoliumRamat.)花色鮮艷、豐富，植株低矮整齊，是從地被菊、日本小菊等品種中選育出來，用于布置國(guó)慶節(jié)日花壇的菊花種類。長(zhǎng)期以來，國(guó)慶菊主要用嫩枝扦插繁殖，扦插繁殖的成活率受插穗母株年齡、插穗粗度和扦插時(shí)間、基質(zhì)等因素的影響[1]，而利用組織培養(yǎng)技術(shù)繁殖國(guó)慶菊則有生長(zhǎng)環(huán)境可控制、繁殖迅速、成苗量大、脫毒及保持品種特性等優(yōu)點(diǎn)[2]，可應(yīng)用于大規(guī)模的工廠化生產(chǎn)。我國(guó)園藝綠化已向現(xiàn)代化、科學(xué)化方向發(fā)展，因此運(yùn)用組織培養(yǎng)繁殖技術(shù)促進(jìn)國(guó)慶菊的發(fā)展已成為必然趨勢(shì)。到目前為止，我國(guó)有關(guān)在國(guó)慶菊試管苗生根移栽方面的研究報(bào)道尚少，僅不同濃度的生長(zhǎng)素(NAA)對(duì)菊花試管苗生根的影響[3]有報(bào)道。為此，筆者使用含有生長(zhǎng)素為NAA(0.5 mg/L)的不同基本成分的培養(yǎng)基探討對(duì)國(guó)慶菊試管苗生根及試管苗移栽技術(shù)方面的影響，以期為國(guó)慶菊試管苗在組織培養(yǎng)上的操作技術(shù)、試管苗移栽后的管理上提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

1.1.1 植物 國(guó)慶菊試管苗生根移栽的材料取自河北旅游職業(yè)學(xué)院組培實(shí)驗(yàn)室國(guó)慶菊無根試管苗。

1.1.2 培養(yǎng)基 1) 1/2MS+NAA(0.5 mg/L)+蔗糖(1.0%)+瓊脂(0.75%); 2) 1/2N6+NAA(0.5 mg/L)+蔗糖(1.0%)+瓊脂(0.75%); 3) 脫水MS+NAA(0.5 mg/L)+瓊脂(0.2%)。3種培養(yǎng)基用0.1 mol/L NaOH將pH調(diào)至6.0，冷卻后分裝到罐頭瓶?jī)?nèi)。在1.11～1.12 kg/cm2壓力下高壓蒸汽滅菌20 min。

1.1.3 移栽基質(zhì) 1) 珍珠巖、蛭石和腐殖質(zhì)(1∶1∶1)； 2) 珍珠巖和蛭石(1∶1)； 3) 腐葉土和蛭石(1∶1)； 4) 純蛭石。將4種基質(zhì)分別裝入耐高壓聚丙烯塑料袋，在1.11～1.12 kg/cm2壓力下高壓蒸汽滅菌20 min后冷卻備用。

1.2 接種

在超凈工作臺(tái)上，選取生長(zhǎng)健壯的國(guó)慶菊無根試管苗，在培養(yǎng)皿中的無菌濾紙上切取3 cm左右的無根嫩莖，分別接種到已滅菌的含有NAA(0.5 mg/L)的1/2MS、1/2N6和脫水MS 3種基本培養(yǎng)基中生根誘導(dǎo)，每瓶接種10株，每種培養(yǎng)基接種15瓶，并置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

1.3 生根培養(yǎng)

接種試管苗后先在暗光下培養(yǎng)5 d，后以日光燈為光源，每天進(jìn)行2 000 Lx光照10～12 h，培養(yǎng)溫度為(25±2)℃，定期觀察試管苗生長(zhǎng)及生根情況。培養(yǎng)20 d后，統(tǒng)計(jì)生根率(%)、生根條數(shù)(條)和平均根長(zhǎng)(cm)等指標(biāo)。

生根率=(生根苗總數(shù)/接種試管苗總數(shù))×100%

平均生根數(shù)=生出的總根數(shù)/生根苗總株數(shù)

平均生根長(zhǎng)度=生根累計(jì)總長(zhǎng)度/生根的總數(shù)

1.4 煉苗

移栽前，將試管苗生根的培養(yǎng)瓶移至種苗移栽培養(yǎng)室內(nèi)，常溫下煉苗7 d，前4 d將瓶口打開一半，后3 d將瓶口完全打開，以使芽苗逐步適應(yīng)培養(yǎng)室環(huán)境。

1.5 移栽

煉苗后，用鑷子小心將試管苗從培養(yǎng)瓶中取出，放在盛有20℃左右的溫水中，輕輕洗凈附著在根上的培養(yǎng)基，以防止移栽后出現(xiàn)因細(xì)菌感染而導(dǎo)致試管苗爛根現(xiàn)象，并對(duì)過長(zhǎng)的根適當(dāng)修剪，再放入溫水中清洗1次。然后將去除培養(yǎng)基的試管苗放入500～800倍多菌靈水溶液中浸泡10～15 min，進(jìn)行試管苗消毒后準(zhǔn)備移栽。

分別取在3種不同生根培養(yǎng)基中經(jīng)誘導(dǎo)生根數(shù)相同的健壯試管苗，分別移栽到準(zhǔn)備的4種基質(zhì)中。移栽過程中為保護(hù)試管苗幼嫩的根系免受損害，先用小木棍或竹簽在穴盤的基質(zhì)中心打孔，然后手持鑷子夾住試管苗，輕輕放入孔穴內(nèi)，并舒展根系，輕輕壓四周基質(zhì)，并采用細(xì)噴霧器噴水方式澆透水1次。

1.6 栽后管理及移栽存活率的計(jì)算

剛移栽的幼苗，由于根系供水緩慢，開始要搭蔭棚并及時(shí)噴水或噴霧，以增加葉表面和環(huán)境的濕度，避免強(qiáng)光照。但這一時(shí)期不宜維持時(shí)間過長(zhǎng)，長(zhǎng)時(shí)間的高濕度有利于猝倒病菌的繁殖，幼嫩的菊苗最易受到病菌侵害，因此在移栽2 d后要逐步適當(dāng)增加光照，每天澆水1～2次，夏天高溫澆水2～3次[4]，以保持小苗的水分供需平衡。

由于國(guó)慶菊喜涼爽，忌炎熱，怕積水雨澇，水分管理要堅(jiān)持不干不澆的原則，要適時(shí)適量，切不能過干或過濕，又不可半干半濕，即澆半截水。試管苗移栽成活后逐漸移入向陽(yáng)地[5]。每天要保持環(huán)境的濕度，控制澆水量和澆水時(shí)間，并定期觀察其生長(zhǎng)狀況。20 d后統(tǒng)計(jì)移栽苗移栽存活率。

移栽存活率=(移栽存活的株數(shù)/移栽苗的總株數(shù))×100%

2 結(jié)果與分析

2.1 不同基本培養(yǎng)基試管苗的生根狀況

由圖示和表1可見，國(guó)慶菊試管苗在添加NAA(0.5 mg/L)的3種不同成分基本培養(yǎng)基中能生根，且生根率均為100%。但不同成分的基本培養(yǎng)基對(duì)國(guó)慶菊試管苗的根質(zhì)量、平均生根數(shù)及平均根長(zhǎng)度都有影響?？傮w上看，在1/2MS培養(yǎng)基中的國(guó)慶菊試管苗生根較慢，在16 d后試管苗才全部生根，且根質(zhì)量較差，缺少根毛，根少，根短。而在1/2N6和脫水MS 2種基本培養(yǎng)基中國(guó)慶菊試管苗生根均良好，根毛豐富。在1/2N6培養(yǎng)基中試管苗的根短粗，12 d后全部生根；脫水MS培養(yǎng)基中試管苗的根細(xì)長(zhǎng)，平均根長(zhǎng)度1.4 cm。條數(shù)最多，平均生根數(shù)13個(gè)，生根最快，試管苗在7 d后全部生根。

由此可知，國(guó)慶菊試管苗雖在3種不同基本成分的培養(yǎng)基中均能生根，生根率均為100%，但試管苗的生長(zhǎng)狀況差距很大，在脫水MS培養(yǎng)基中的試管苗生長(zhǎng)最健壯，生根質(zhì)量與數(shù)量也最佳，所以最有利于國(guó)慶菊試管苗生根的基本培養(yǎng)基是脫水MS培養(yǎng)基，其次是1/2N6培養(yǎng)基。

圖示 移栽前3種培養(yǎng)基試管苗的生長(zhǎng)情況

Fig. Growth status ofC.morifoliumtube plantlets cultured on three different media before transplanting

表1 不同基本培養(yǎng)基國(guó)慶菊試管苗的生根情況

表2 不同基質(zhì)國(guó)慶菊試管苗移栽的成活率

2.2 不同移栽基質(zhì)移栽苗的成活率

從3種培養(yǎng)基中生長(zhǎng)的試管苗在4種移栽基質(zhì)中成活情況(表2)可知，國(guó)慶菊在純蛭石基質(zhì)中，移栽苗株高增長(zhǎng)幅度和苗的質(zhì)量均屬最佳，移栽成活率達(dá)95.6%。另外，蛭石∶腐葉土(1∶1)的基質(zhì)也比較適合國(guó)慶菊試管苗的移栽，移栽成活率達(dá)95.6%。

3 結(jié)論與討論

試驗(yàn)結(jié)果表明，國(guó)慶菊試管苗雖然在1/2MS、1/2N6和脫水MS 3種不同基本成分的培養(yǎng)基中都能生根，生根率均為100%，但根據(jù)生根時(shí)間與根質(zhì)量得出，最有利于國(guó)慶菊試管苗生根的基本培養(yǎng)基是脫水MS培養(yǎng)基，其次是1/2N6培養(yǎng)基。

比較(蛭石∶腐葉土)、(珍珠巖∶蛭石∶腐葉土)、(蛭石∶腐葉土)以及純蛭石4種移栽基質(zhì)，國(guó)慶菊試管苗在(蛭石∶腐葉土)和純蛭石移栽基質(zhì)中移栽成活率較高，平均達(dá)94.8%，而試管苗總的移栽成活率為83.86%，未達(dá)到成活率為90%的預(yù)想效果。究其原因有以下幾方面：首先由于試管苗一直在比較優(yōu)越的培養(yǎng)室環(huán)境下生長(zhǎng)，幼苗抗病和抗干旱等能力較弱，一旦出瓶種植，環(huán)境發(fā)生了較大的變化,幼苗的成活率將直接受到影響，試管苗是否移栽成功，除要求試管苗生長(zhǎng)健壯，移栽初期的養(yǎng)護(hù)管理也是移栽成功的關(guān)鍵[3]；其次，移栽后期管理可能存有漏洞，空氣濕度太大，導(dǎo)致植株葉片有水珠凝結(jié)，葉片難以負(fù)重，最終出現(xiàn)倒伏，萎蔫致死；再者是移栽時(shí)操作不夠小心，可能對(duì)某些植株的根系造成一定的機(jī)械損傷，延緩了根部恢復(fù)吸收功能的時(shí)間，致使其未能及時(shí)獲得需要的水分最后死亡[6]。雖然移栽成活率未達(dá)到預(yù)期效果，但本試驗(yàn)為國(guó)慶菊試管苗組織培養(yǎng)、移栽等相關(guān)試驗(yàn)提供參考依據(jù)。

[1] 李彥梅,武榮花,袁秀芳.國(guó)慶菊扦插繁殖技術(shù)研究[J].河南林業(yè)科技,1999,6(2):37-39.

[2] 袁麗偉.國(guó)慶菊繼代增殖培養(yǎng)技術(shù)初探[J].貴州農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(11):36-38.

[3] 蔣細(xì)旺,趙慧娟.菊花試管苗的生根及移栽研究[J].江漢大學(xué)學(xué)報(bào),2003,12(4):73-75.

[4] 周瑞玲,吳雨龍.菊花的組織培養(yǎng)及移栽技術(shù)初探[J].江蘇林業(yè)科技,2001,28(2):23-24.

[5] 趙 偉,趙立紅.淺談國(guó)慶菊的繁殖、栽培與管理技術(shù)[J].淮北職業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào),2005,1(1):87-88.

[6] 王振龍.植物組織培養(yǎng)[M].北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社,2007.

(責(zé)任編輯： 劉忠麗)

Rooting and Transplanting ofChrysanthemummorifoliumTube Plantlets

YUAN Liwei, YIN Guo

(HebeiTourismVocationalCollege,Chengde,Hebei067000,China)

C.morifoliumplantlets without roots were cultured on 1/2 MS with 0.5 mg/L NAA, 1/2 N6with 0.5 mg/L NAA and dehydration MS with 0.5 mg/L NAA respectively to observe the rooting status of culturedC.morifoliumplantlets and then the healthyC.morifoliumplantlets with roots transplanted to four different substrate combinations of perlite, vermiculite, humus and pure vermiculite to study the survival rate of transplantedC.morifoliumplantlets with roots and to provide the theoretical basis for tissue culture technique ofC.morifoliumplantlets and management of transplantedC.morifoliumplantlets.Results:Three tested media all are beneficial to root induction ofC.morifoliumplantlets and their rooting rate reaches 100%. The optimum medium for root induction ofC.morifoliumplantlets is dehydration MS with 0.5 mg/L NAA, followed by 1/2 N6with 0.5 mg/L NAA. The survival rate ofC.morifoliumplantlets with roots transplanted in vermiculite∶leaf mould (1∶1) substrate and pure vermiculite substrate can be up to 94.8%.

Chrysanthemummorifolium; tube plantlet; tissue culture; transplanting; rooting; medium

2015-07-16； 2016-02-21修回

2015年承德市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目“生態(tài)園林城市導(dǎo)向下節(jié)約型園林綠地規(guī)劃設(shè)計(jì)研究”階段性研究成果(20151115)

袁麗偉(1983-)，女，講師，從事園林植物等教學(xué)與科研工作。E-mail:yuanliwei@163.com

1001-3601(2016)03-0129-0129-03

S682.1+1

A