孫素歌，陳培娟，陳麗紅

(1.河南省臨潁縣畜牧局 462600；2.河南省臨潁縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 462600；3.河南省臨潁縣皇帝廟動(dòng)物防疫檢疫中心站 462600)

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確定母犬最佳配種時(shí)間的常用方法

孫素歌1，陳培娟2，陳麗紅3

(1.河南省臨潁縣畜牧局 462600；2.河南省臨潁縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心 462600；3.河南省臨潁縣皇帝廟動(dòng)物防疫檢疫中心站 462600)

母犬的最佳配種時(shí)間很可能是在可受精期或可受精期即將開(kāi)始時(shí)。自然交配時(shí)，生育力的峰值出現(xiàn)在促黃體素(LH)峰值出現(xiàn)前的1 d至之后的5～6 d。因此，可以根據(jù)監(jiān)測(cè)LH峰值出現(xiàn)時(shí)間的方法確定配種時(shí)間。

1 激素測(cè)定

血漿LH濃度測(cè)定是一種準(zhǔn)確可靠的判定最佳配種時(shí)間的方法，但目前還沒(méi)有簡(jiǎn)單易行的商用方法來(lái)檢測(cè)犬的LH。目前，采用放射免疫分析法進(jìn)行測(cè)定，這種技術(shù)既費(fèi)時(shí)又昂貴。有人曾應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測(cè)定狐貍血漿LH濃度，但能否用于犬尚未證實(shí)。測(cè)定犬的LH時(shí)一個(gè)關(guān)鍵問(wèn)題是，LH在很短的時(shí)間內(nèi)可從峰值降低到基礎(chǔ)值，因此需要每天進(jìn)行采樣測(cè)定。

前情期即將結(jié)束時(shí)出現(xiàn)LH峰值，此時(shí)血漿孕酮的濃度開(kāi)始升高。孕酮是由黃體化的卵泡所產(chǎn)生的，因此對(duì)血清孕酮進(jìn)行連續(xù)測(cè)定可以預(yù)測(cè)排卵。由于排卵前孕酮濃度升高緩慢，因此沒(méi)有必要每天進(jìn)行采樣。目前可以采用商用的ELISA試劑盒測(cè)定血漿孕酮濃度，這些試劑盒對(duì)于預(yù)測(cè)母犬最佳配種時(shí)間非常有用。也可用這種方法測(cè)定全血和陰道分泌物的孕酮濃度。另外，研究表明，還可測(cè)定糞便中的孕酮濃度，這就為非創(chuàng)傷性監(jiān)測(cè)排卵時(shí)間提供了可能。

2 陰道細(xì)胞學(xué)檢查

檢查陰道表皮脫落的細(xì)胞常用來(lái)監(jiān)測(cè)發(fā)情周期。在發(fā)情前期，血漿雌激素濃度升高，引起孕酮濃度的增加，會(huì)使陰道黏膜變厚成為角質(zhì)化的鱗狀上皮，可以用濕拭子或抽吸法收集陰道上皮細(xì)胞，可以用不同類型的上皮細(xì)胞的相對(duì)比例作為內(nèi)分泌環(huán)境狀況的標(biāo)志。研究表明，采用多種細(xì)胞染色方法，不同的角質(zhì)化指數(shù)和角質(zhì)化程度已經(jīng)成了發(fā)情周期不同階段的標(biāo)志。一般來(lái)說(shuō)，盡管改良的三重染色法用于測(cè)定角質(zhì)化細(xì)胞的比例是最為有效的，但用改良瑞氏-吉姆薩染色計(jì)算上皮細(xì)胞角質(zhì)化比例就可用于預(yù)測(cè)可受孕期。

發(fā)情期陰道涂片上不會(huì)存在多形核白細(xì)胞，因?yàn)樗鼈儾荒艽┻^(guò)角質(zhì)化的上皮細(xì)胞。發(fā)情期后期多形核白細(xì)胞再度出現(xiàn)，反映了這層上皮的裂解。許多學(xué)者已將陰道涂片中多形核白細(xì)胞的再現(xiàn)作為最佳生育時(shí)間的標(biāo)志。

研究認(rèn)為，在80%以上的上皮細(xì)胞發(fā)生角質(zhì)化的整個(gè)時(shí)間均可以嘗試配種。雖然這是個(gè)很好的指標(biāo)，但有些犬只有60%的上皮細(xì)胞角質(zhì)化時(shí)就達(dá)到了高峰值，而有些犬可能有兩個(gè)角質(zhì)化高峰，有些母犬陰道涂片的細(xì)胞變化不明顯，且可能在前情期出現(xiàn)典型的后情期細(xì)胞。Allen(1985)指出，在整個(gè)發(fā)情期都可能出現(xiàn)多形核白細(xì)胞，但其變化程度還無(wú)法量化。評(píng)價(jià)陰道前端細(xì)胞的無(wú)核細(xì)胞指數(shù)，以此為根據(jù)進(jìn)行配種，發(fā)現(xiàn)與只根據(jù)前情期的開(kāi)始判斷配種時(shí)間而進(jìn)行配種的母犬相比，其妊娠率和窩產(chǎn)仔數(shù)均增加。這一方法對(duì)于發(fā)情周期無(wú)規(guī)律和前情期或發(fā)情期延長(zhǎng)的母犬尤為適用。

3 陰道鏡檢查

陰道鏡檢查是應(yīng)用剛性內(nèi)窺鏡或兒科直腸鏡對(duì)陰道黏膜進(jìn)行檢查的技術(shù)。陰道鏡的檢查是基于對(duì)黏膜皺襞的輪廓、黏膜顏色及液體特征性的顏色等的評(píng)價(jià)而進(jìn)行的。前情期和發(fā)情期可以見(jiàn)到粉紅色水腫變大的黏膜皺襞或粉紅色/白色黏膜皺襞。這些皺襞顏色蒼白，發(fā)生漸進(jìn)性皺縮，這可能是由于排卵前雌激素水平下降，其保水作用突然喪失導(dǎo)致的結(jié)果。隨后，在黏膜皺縮的同時(shí)出現(xiàn)黏膜褶展平，明顯棱角化，呈白色稠奶油狀。這些大體變化已經(jīng)用于可受孕期的評(píng)估。陰道鏡的檢查結(jié)果是以陰道壁外觀的評(píng)價(jià)(黏膜皺襞的輪廓、黏膜和液體的顏色)和發(fā)情周期中特定時(shí)期這一現(xiàn)象的變化為基礎(chǔ)。

一個(gè)特殊的評(píng)分系統(tǒng)被用來(lái)作為評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)：不活躍期(I)：這個(gè)階段的特點(diǎn)是黏膜薄、紅、干，黏膜皺襞低平。水腫期(O)：這個(gè)階段的主要特點(diǎn)是黏膜水腫變厚，外觀圓潤(rùn)，腫脹，呈灰色或白色。皺縮期(S)：這個(gè)階段的特點(diǎn)是黏膜變厚，通常為白色，因水腫減輕而形成凹陷、皺褶和壓痕。但黏膜皺襞的輪廓依然圓潤(rùn)而不具有棱角。根據(jù)此期的漸進(jìn)性特點(diǎn)，可將早期變化稱為S1期，后期變化稱為S2期。棱角化期(A)：這個(gè)階段的特點(diǎn)是黏膜變厚，正常為白色，但腫脹明顯減輕，使黏膜褶漸進(jìn)性收縮并呈棱角化，達(dá)到高峰時(shí)外觀甚至呈尖頂狀且不規(guī)則。黏膜外觀皺縮。根據(jù)此期的漸進(jìn)性特性，早期的變化稱為A1，后期變化稱為A2和A3。下降期(D)：這個(gè)階段的特點(diǎn)是黏膜皺襞輪廓大小呈漸進(jìn)性下降。在此階段的早期(稱為Dl)黏膜皺襞松弛，隨后皺襞變圓(D2)，角質(zhì)化的上皮層脫落(D2和D3)，導(dǎo)致黏膜變薄，顏色斑駁，皺襞扁平，外觀呈玫瑰花形(D4)。不活躍期(I)：下降期接下來(lái)又回到以薄、紅、干的黏膜和扁平的皺襞為特點(diǎn)的不活躍階段。這個(gè)階段也稱為“I期”。與前情期開(kāi)始之前的階段I相比，此階段會(huì)發(fā)現(xiàn)更多的碎片。

一般來(lái)說(shuō)，觀察到黏膜開(kāi)始皺縮但還沒(méi)有出現(xiàn)過(guò)度棱角化時(shí)，能夠推斷可受孕期開(kāi)始，而整個(gè)黏膜褶明顯且有明顯的棱角化(A2和A3階段)則是可受精期的特征性變化。最好在首次發(fā)現(xiàn)黏膜皺縮后大約4 d或者在黏膜褶開(kāi)始發(fā)生明顯的棱角化時(shí)進(jìn)行配種。可以通過(guò)觀察陰道上皮的脫落和黏膜表面出現(xiàn)斑駁的外觀來(lái)確定可受精期的結(jié)束。

2016-08-26

孫素歌(1976-)，女，本科，獸醫(yī)師。

S829.2

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1005-2739(2016)06-0026-02