王曉明

（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局，山東博興　256500）

豬流行性腹瀉病毒病的診治

王曉明

（山東省博興縣畜牧獸醫(yī)局，山東博興256500）

山東省博興縣某規(guī)模豬場新生仔豬發(fā)生了一起以嚴重腹瀉、脫水、嘔吐為主要特征的疫病，通過發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實驗室檢測，最終確定致病原為豬流行性腹瀉病毒。通過采取系列針對性治療措施，病情得到了有效控制。

豬流行性腹瀉病毒；診斷；治療

豬流行性腹瀉（porcine epidemic diarrhea，PED）是由豬流行性腹瀉病毒（porcine epidemic diarrhea virus，PEDV）引起豬的一種急性、高度接觸性腸道傳染?。?］，該病可以導致豬的嚴重腹瀉，引起生產(chǎn)性能下降，嚴重的可導致死亡，是威脅養(yǎng)豬業(yè)的重要病毒性傳染病。近幾年，我國豬場發(fā)生豬流行性腹瀉病毒感染的報道日益增多［2.3］，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了嚴重的經(jīng)濟損失。2015年10月，山東省博興縣某規(guī)模豬場新生仔豬發(fā)生了一起以嚴重腹瀉、脫水、嘔吐為主要特征的疫病，通過發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實驗室檢測，最終確定致病原為豬流行性腹瀉病毒。根據(jù)診斷結(jié)果，對豬場發(fā)病豬采取對癥治療，全部豬群進行緊急疫苗免疫接種，同時對豬場進行嚴格的衛(wèi)生消毒，豬場的病情得到有效控制。

1　發(fā)病情況

2015年10月，山東省博興縣某豬場所飼養(yǎng)的哺乳仔豬率先發(fā)病，主要表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉、脫水，同圈仔豬發(fā)病率達100%，隨后向不同圈仔豬蔓延，發(fā)病后曾用抗生素治療無效，該豬場未進行過豬病毒性腹瀉疫病相關疫苗的免疫。

2　臨床癥狀

發(fā)病仔豬精神沉郁，食欲下降，水樣腹瀉，糞便黃綠色，脫水，嘔吐，機體極度消瘦，但體溫正常。仔豬發(fā)病后2～3d內(nèi)死亡，發(fā)病率達80%以上，死亡率在50%以上。

3　病理變化

取病死仔豬進行剖檢，可見病變主要在小腸，尸體脫水明顯，胃內(nèi)有尚未消化的乳凝塊，胃底黏膜出血，腸內(nèi)充滿黃綠色液體，腸壁變薄，腸管變透明，腸系膜充血嚴重，淋巴結(jié)腫脹。

4　實驗室檢測

取病死豬的腸黏膜等病變組織剪碎，以1∶3比例加入滅菌生理鹽水后研磨，12 000 rpm/min離心10 min，取上清液利用病毒基因組RNA提取試劑盒（購自北京百泰克生物技術有限公司）提取病料組織的基因組RNA。根據(jù)參考文獻［4］分別合成擴增PEDV、TGEV、RV的特異性檢測引物，以提取的組織病料病毒基因組RNA為模板，按照參考文獻［4］中的RT-PCR反應程序，利用一步法RT-PCR擴增試劑盒（購自大連寶生物工程有限公司）進行RT-PCR擴增，RT-PCR擴增產(chǎn)物經(jīng)1%瓊脂糖凝膠電泳顯示，RT-PCR擴增產(chǎn)物在347 bp的位置出現(xiàn)特異性的擴增條帶，與PEDV檢測引物的預期擴增片段大小一致，而TGEV、RV的檢測引物均沒有擴增產(chǎn)物。

5　綜合診斷結(jié)果

經(jīng)發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等臨床診斷以及RT-PCR等實驗室檢測，確診此次疫病由感染豬流行性腹瀉病毒所致。

6　治療措施

確診豬場致病原為豬流行性腹瀉病毒后，采取了仔豬保溫、豬場嚴格消毒、仔豬及時補液、緊急免疫接種等一系列措施：消毒措施，對圈舍、器具等進行全面徹底消毒；保溫，保持豬舍溫度高于正常溫度1℃以上；補液，發(fā)病豬群普遍使用優(yōu)質(zhì)口服補液鹽（購自重慶方通動物藥業(yè)有限公司），防止進一步脫水；防繼發(fā)感染，發(fā)病豬群普遍使用痢菌凈（購自重慶方通動物藥業(yè)有限公司），防止繼發(fā)細菌感染；疫苗免疫，對全場豬群緊急免疫接種豬流行性腹瀉病毒活疫苗（購自哈爾濱維科生物技術開發(fā)公司）。采取上述治療措施后，豬場的發(fā)病率和死亡率迅速大幅度降低，2周后疫情得到緩解，豬場重新步入穩(wěn)定狀態(tài)。

7　討論

PEDV與豬傳染性胃腸炎病毒（Transmissible gastroenteritis virus，TGEV）、輪狀病毒（Rotavirus，RV）感染的臨床癥狀和病理變化均極其相似，且常常存在混合感染以及一些細菌的繼發(fā)感染，增加了臨床鑒別診斷的難度，僅憑發(fā)病情況、臨床癥狀、病理變化等很難作出確診，確診還需借助實驗室診斷方法。其中RT-PCR檢測方法能夠檢測到病毒基因組特定的核苷酸序列，具有血清學診斷方法無法比擬的準確性，且該方法操作簡單、檢測快速、敏感性高、特異性強，是目前動物疫病診斷中常用的快速檢測技術［5］。故本研究利用曹玉琴等［4］的PEDV-TGEV-RV多重RT-PCR鑒別檢測方法對臨床病例進行了確診，曹玉琴等［4］方法對PEDV、TGEV和RV能分別擴增出大小為347、779和510 bp的預期片段，靈敏度高，最低可以檢測約1.5× 105拷貝的陽性RNA模板，特異性強，對豬瘟病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒、日本腦炎病毒和偽狂犬病病毒的檢測均為陰性，是一種簡便、快速、鑒別檢測PEDV、TGEV和RV的有效方法。故本研究選擇曹玉琴等［4］的方法作為PEDV感染的確診方法，使本研究診斷的可靠性和準確性大大提高。

本病目前還沒有特效治療藥物，應采取以加強飼養(yǎng)管理和疫苗免疫接種為主的綜合性預防控制措施，豬場一旦發(fā)生豬流行性腹瀉病毒感染后應采取對癥療法，減輕失水和酸中毒，防止細菌繼發(fā)感染，加強護理，做好防寒保暖，可以按照仔豬體重肌肉注射高免血清進行被動治療，對失水過多的病豬，靜脈滴注葡萄糖和格林氏液。

［1］劉政龍，王金良，沈志強.豬流行性腹瀉病毒研究進展［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2015，42（9）：2506-2511.

［2］劉小蘭，賀筍，陳蘭玲，等.豬流行性腹瀉病毒（XJ-DB2）株的分離鑒定［J］.中國獸醫(yī)雜志，2016，52（1）：19-21.

［3］張生祥，馬文瑞，包守泰，等.一例豬流行性腹瀉病毒的分離與鑒定［J］.黑龍江畜牧獸醫(yī)，2015，（20）：109-110.

［4］曹玉琴，付丹，楊堯，等.PEDV-TGEV-RV多重RT-PCR鑒別檢測方法的建立及應用［J］.中國獸醫(yī)科學，2015，45（9）：5-11.

［5］楊麗梅，馬力，徐倩倩，等.我國豬病毒性腹瀉的診斷與流行病學調(diào)查研究概況［J］.動物醫(yī)學進展，2014，35（2）：115-119.

（編輯：晏兵兵）

S858.28

A

1006-799X（2016）15-0062-02

王曉明（1976-），男，山東博興人，助理獸醫(yī)師，主要研究方向為畜牧獸醫(yī)。