王平 李小磊
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卵黃抗體在新生仔豬養(yǎng)殖中的應(yīng)用
王平 李小磊
(山東省泰安市岱岳區(qū)畜牧獸醫(yī)局 271000)(山東藍(lán)道夫生物科技有限公司)
新生仔豬成活率的高低至關(guān)重要,新生仔豬出生面臨著環(huán)境、營養(yǎng)、免疫和病原壓力等多重挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)意義上解決新生仔豬成活率低的方法有疫苗注射、抗生素的使用、血漿和初乳等,現(xiàn)在的大環(huán)境之下,這些方法的作用各有弊端,本文著重介紹了新型綠色添加劑卵黃抗體,卵黃抗體是通過免疫注射產(chǎn)蛋雞,由其產(chǎn)生的相應(yīng)抗體,卵黃抗體能抑制細(xì)菌吸附、中和病毒和凝集作用,并且在胃腸道中穩(wěn)定,具有高親和力。用卵黃抗體預(yù)防和治療疾病,安全高效且無害,是一種前景廣闊的安全綠色添加劑。
仔豬成活率的高低直接關(guān)影響飼養(yǎng)的效益。尤其是在當(dāng)前養(yǎng)殖效益良好的情況下,仔豬成活率更加關(guān)系到養(yǎng)殖的成敗,提高仔豬成活率成為大家關(guān)注的焦點(diǎn)。
出生仔豬在上皮絨毛膜胎盤中不能通過胎盤獲得免疫,所以仔豬出生后沒有免疫保護(hù)。新生仔豬面臨著諸多挑戰(zhàn)。
1.1 環(huán)境挑戰(zhàn) 包括衛(wèi)生條件(產(chǎn)房、水、飼料)、居住條件(無新鮮空氣、無適宜的溫度、母豬擠壓仔豬)和出生前、出生時和出生后的管理。
1.2 營養(yǎng)挑戰(zhàn) 包括能量虧損、母豬產(chǎn)乳不足、窩產(chǎn)仔多、遺傳限制、病理性泌乳綜合癥和仔豬找不到乳頭,初乳供給不足。其中能量的虧損能引起體溫下降,同時建立機(jī)體自身免疫系統(tǒng)也需要能量。
1.3 免疫挑戰(zhàn) 仔豬出生后沒有免疫保護(hù),初乳提供必需的免疫球蛋白,且在出生后24h母豬初乳中免疫球蛋白水平迅速下降。
1.4 病原挑戰(zhàn) 仔豬出生后面對的疾病壓力主要有大腸桿菌、輪狀病毒、傳染性胃腸炎病毒、豬流行性腹瀉病毒、梭狀芽孢桿菌和隱孢子蟲等。(1)梭狀芽孢桿菌(clostridium),是致病性革蘭氏陽性芽孢菌,存在于豬的大腸。典型的感染出生后第24~72小時的仔豬,呈膏狀或糊狀腹瀉,腐臭味腹瀉,常伴有血紅色。(2)大腸桿菌(E.coli)是致病性革蘭氏陰性菌,存在于大腸。是引起仔豬腹瀉最重要的病原。典型感染出生后5d和斷奶后5d內(nèi)的仔豬,呈水樣、連續(xù)性腹瀉。嚴(yán)重暴發(fā)時死亡率高達(dá)7%,在個別未處理的豬群中死亡率高達(dá)100%,水腫病是由某種血清型的產(chǎn)腸毒素大腸桿菌引起,細(xì)菌粘附在絨毛上,并產(chǎn)生毒素,該毒素?fù)p害小血管壁(和腦)流體或水腫聚集在胃組織和大腸中,通常在斷奶后的1~4周可見,可能不出現(xiàn)腹瀉,但是能出現(xiàn)呼吸問題和神經(jīng)癥狀。(3)隱孢子蟲(Crypto)是原蟲性寄生蟲,生長和繁殖主要在小腸壁,通常損害小腸壁(尸體檢驗(yàn)),但是死亡率低,由細(xì)菌或病毒引起的繼發(fā)性感染會增加死亡率。7~21日齡發(fā)生腹瀉時,機(jī)體很可能對抗生素沒有反應(yīng),呈水樣褐色腹瀉。(4)豬流行性腹瀉病毒(PED)是相當(dāng)大的囊膜病毒,損害腸絨毛,減少吸收表面,體液減少和脫水;流行性腹瀉I型僅影響感染生長豬,流行性腹瀉II型感染所有日齡的豬,包括哺乳仔豬和性成熟母豬,潛伏期約2d,發(fā)病期持續(xù)7~14d,哺乳仔豬死亡率40%。(5)傳染性胃腸炎病毒(TGE) 是高度傳染性冠狀病毒,經(jīng)口進(jìn)入豬體,在絨毛繁殖并破壞絨毛,感染動物排出的糞便中含有大量的病毒,很可能發(fā)生在小于28日齡的仔豬,非常嚴(yán)重的水樣腹瀉,小于7日齡的仔豬在感染后的2~3d內(nèi)死亡率幾乎100%。(6)輪狀病毒(Rotavirus)在環(huán)境中的長期存在,是引起豬腹瀉的最廣泛的致病病毒,可能發(fā)生在7~10日齡的仔豬,水樣腹瀉,腹瀉伴隨有脫水、吸收不良和持續(xù)3~4d的腹瀉,眼睛凹陷(脫水)、直腸周圍皮膚潮濕。目前針對這些挑戰(zhàn)有以下4種控制方法:①疫苗:免疫應(yīng)答慢,且抗腸道感染效果不好。②抗生素:有耐藥性,食物中藥物殘留,抗病毒感染無效,還能損害腸道有益微生物菌群。③血漿,初乳等:非特異性抗體;存在安全問題。④雞蛋免疫球蛋白(IgY)(免疫球蛋白Y)。
卵黃抗體gY是卵黃抗體是通過免疫注射產(chǎn)蛋雞,由其產(chǎn)生的相應(yīng)抗體。屬于重鏈球狀蛋白,糖蛋白-糖鏈與一些糖蛋白氨基酸殘基結(jié)合,被免疫系統(tǒng)利用以識別和中和外源物質(zhì)。哺乳動物具有免疫球蛋白G,鳥類具有免疫球蛋白Y(Y=“蛋黃”),免疫球蛋白Y給雞提供被動免疫,免疫球蛋白G和Y是功能性模擬分子。免疫球蛋白Y多具有一個區(qū)域,所以較重,當(dāng)雞蛋在卵巢時母雞轉(zhuǎn)移免疫球蛋白Y到卵黃中。只要雞蛋從輸卵管通過,它就從輸卵管分泌物中獲得免疫球蛋白A和M(蛋白)。卵黃抗體能給動物幼仔提供腸道健康。IgY能提高生長性能的五大優(yōu)勢。
2.1 抑制細(xì)菌和致病性微生物吸附,中和病毒 (1)病原不能從宿主獲得養(yǎng)分,病原不能侵襲腸壁細(xì)胞,致病菌很容易脫落。產(chǎn)腸毒素大腸桿菌通過菌毛粘附和定居吸附在腸細(xì)胞,腸毒素從定居的產(chǎn)腸毒素大腸桿菌中釋放,并引起嚴(yán)重腹瀉,因此造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。免疫球蛋白Y能有效阻斷細(xì)菌定居過程的最初階段。(2)免疫球蛋白Y阻止病毒入侵,因此病毒不能進(jìn)入宿主細(xì)胞,病毒被滅活,只要病毒在腸細(xì)胞復(fù)制,病毒細(xì)胞表面受體結(jié)合就能引起病毒感染,病毒復(fù)制引起腸絨毛上皮細(xì)胞功能異常/死亡,消化和吸收功能迅速下降。免疫球蛋白能有效阻斷感染過程的最初階段。(3)免疫球蛋白Y同時“粘合”抗原/外源粒子,并停止抗原/外源粒子的運(yùn)動,免疫球蛋白Y輔助免疫細(xì)胞(巨噬細(xì)胞)捕獲和清除致病菌,免疫球蛋白Y間接提高宿主免疫狀態(tài)。
2.2 高穩(wěn)定性 IgY與一般哺乳動物IgG相比,IgY具有較強(qiáng)的耐熱、耐酸、抗離子強(qiáng)度和一定的抗酶降解能力。在低于75℃條件下,IgY具有良好的熱穩(wěn)定性。IgY制劑在4℃貯存5年或在室溫貯存6個月其活性仍無明顯變化或下降,65℃時可保持24h以上,70℃時加熱90min后其活性才明顯下降60℃,30min條件下巴氏消毒不影響IgY;高于80℃,大部分IgY失去活性。IgY在pH4.0~11.0時比較穩(wěn)定,pH3.0~3.5時活性迅速下降,pH12時活性亦有所下降。IgY對胃蛋白酶有較高的抵抗力,但對胰蛋白酶十分敏感。將胃蛋白酶和IgY在pH2.0溫育1h后,幾乎所有活性喪失,但在pH4.0時1h后可保持91%的活性,甚至溫育10h后仍有63%活性。IgY分別與胰蛋白酶和胰凝乳酶溫育8h,活性分別保持39%和41%。
2.3 結(jié)合物 IgY不與金色葡萄球菌A蛋白結(jié)合,不與哺乳動物Fc受體結(jié)合,對哺乳動物補(bǔ)體無固定作用。在診斷上更具有特異性和靈敏性。
(1)2006年1月,歐盟已全面禁止在飼料中使用生長素、抗生素作為飼料生長添加劑。雖然美國目前沒有明確禁止抗生素在養(yǎng)殖業(yè)中的使用,但日前美國食品和藥物管理局局長(FDA)馬格麗特·漢伯格表示:美國FDA正密切關(guān)注農(nóng)業(yè)中使用抗生素與細(xì)菌耐藥性日益流行之間的聯(lián)系。根據(jù)FDA6月發(fā)布的指南草案,關(guān)于“醫(yī)學(xué)上重要的抗菌藥物在食用動物中的合理應(yīng)用”,被廣泛認(rèn)為是該機(jī)構(gòu)準(zhǔn)備限制常規(guī)使用的信號。(2)據(jù)統(tǒng)計,每年由細(xì)菌性疾病造成的損失占養(yǎng)殖業(yè)總收入的3%~4%??股氐拈L期和廣泛應(yīng)用,導(dǎo)致了腸道菌群失衡、藥物殘留、耐藥性及其傳遞和傳播等負(fù)效應(yīng),同時也給出口創(chuàng)匯帶來損失,間接影響了養(yǎng)殖業(yè)自身的經(jīng)濟(jì)效益。隨著人們對食品衛(wèi)生和食品安全的不斷重視,尤其是抗生素的殘留問題引起普遍關(guān)注,我國的飼料用料和飼料安全問題遇到了嚴(yán)峻的挑戰(zhàn),因此尋找優(yōu)質(zhì)高效低殘留的綠色環(huán)保新型飼料添加劑。(3)卵黃抗體不僅可以針對特定病生物制備特異性抗體,還使用微膠囊包被技術(shù),Shimizu等(1993)用脂質(zhì)體包被,在pH2.8的胃蛋白酶中37℃溫育1h,仍可保持80%的活性。并且卵黃抗體制備工藝不復(fù)雜,產(chǎn)量大,效率高,用卵黃抗體預(yù)防和治療疾病不會存在藥物殘留,安全有效,是一種新型的前景廣闊的飼料添加劑。
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(2016–06–19)
S852.4+3
A
1007-1733(2016)09-0079-02