高延娜 (山東省海陽(yáng)市二十里店鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站 2651200)宋麗霞 (山東省海陽(yáng)市辛安鎮(zhèn)獸醫(yī)站)包小萌 范 磊?。ㄉ綎|省海陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心)
高致病性豬藍(lán)耳病研究進(jìn)展
高延娜(山東省海陽(yáng)市二十里店鎮(zhèn)畜牧獸醫(yī)站2651200)宋麗霞(山東省海陽(yáng)市辛安鎮(zhèn)獸醫(yī)站)包小萌范 磊(山東省海陽(yáng)市動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心)
豬繁殖與呼吸綜合征(porcine reproductive andpespiratory syndrome,PRRS)是20世紀(jì)80年代末出現(xiàn)的一種新病。高致病性PRRS是由毒力更強(qiáng)的PRRSV變異毒株引起的,說(shuō)明PRRSV在不斷的發(fā)生變異。2006年6月份開(kāi)始,我國(guó)南方部分省市發(fā)生了以體溫高熱不退、皮膚發(fā)紅、呼吸困難為主要臨床癥狀的疫情,該病給養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大經(jīng)濟(jì)損失。經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查、病毒分離、基因分析、動(dòng)物試驗(yàn)等,最終確定是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異株(NVDC~JXA1株)造成的,并定名為高致病性豬藍(lán)耳病。
(1)PRRSV屬套式病毒目動(dòng)脈炎病毒科成員(Yuan等,1999),基因組全長(zhǎng)約15kb,為單股正鏈、不分節(jié)段的RNA,含8個(gè)開(kāi)放閱讀框(ORF),編碼特異性病毒蛋白。RNA合成時(shí)易出現(xiàn)內(nèi)在性錯(cuò)誤,RNA基因組因點(diǎn)突變、缺失、添加和取代而具有很高的突變頻率。PRRSV生物學(xué)和遺傳學(xué)特征的差異基于以下幾點(diǎn):①疫病的不同臨床表現(xiàn);②試驗(yàn)表明有不同的肺和生殖毒性;③血清學(xué)試驗(yàn)中,與單克隆抗體和多克隆抗體反應(yīng)時(shí)表現(xiàn)出的不同抗原性;④不同的RNA序列,RNA的重組為RNA病毒的演化提供了一種強(qiáng)有力的機(jī)制。RNA病毒之間相互交換遺傳信息可以使病毒適應(yīng)變化了的環(huán)境,并逃脫選擇壓力(如中和抗體)的作用。Yuan等(1999)提供了PRRSV RNA能在細(xì)胞培養(yǎng)物中發(fā)生同源重組的證據(jù)。自然界的PRRSV也存在重組現(xiàn)象。(2)從目前國(guó)內(nèi)多個(gè)實(shí)驗(yàn)室的病毒分離和序列分析看,高致病性豬藍(lán)耳病病毒出現(xiàn)了較大的變異,國(guó)內(nèi)分離株均在Nsp2蛋白處有約30個(gè)氨基酸殘基的缺失,GP5等主要結(jié)構(gòu)蛋白和中和抗體相關(guān)蛋白基因也有較大變異。高志強(qiáng)等(2005)對(duì)PRRSV分離株HB-2(sh)/2002的全基因組序列進(jìn)行了測(cè)定與分析,與國(guó)內(nèi)外美洲型PRRSV分離株全序列相似性介于88.7%~95.1%。序列分析表明,該毒株是1個(gè)天然存在缺失的變異毒株,其ORF1a的Nsp2存在編碼12個(gè)氨基酸的連續(xù)36個(gè)核苷酸的缺失,ORF3存在編碼1個(gè)氨基酸的3個(gè)核苷酸的缺失。這是國(guó)內(nèi)外首次發(fā)現(xiàn)PRRSV存在缺失變異現(xiàn)象。童光志(2007)完成了藍(lán)耳病變異株HuN4株的基因序列分析,在Nsp2區(qū)域發(fā)現(xiàn)了2個(gè)基因缺失:483位的1個(gè)氨基酸缺失和535~563間的29個(gè)氨基酸缺失。他們從12個(gè)省份的不同豬場(chǎng)新分離到的48株P(guān)RRSV與HuN4株的Nsp2基因在相同部位發(fā)生缺失;對(duì)重新分離到的PRRSV ORF5和Nsp2序列分析表明,它們與HuN4株具有同源性,且新分離到的PRRSV相互間具有高度的同源性(98.2%~100%),而與以前分離到的毒株的同源性為69.8%~86.2%。感染豬的血清和組織中可以重新分離到PRRSV。
(1)PRRSV主要通過(guò)呼吸道或通過(guò)公豬的精液經(jīng)生殖道在同豬群間進(jìn)行水平傳播,也可以通過(guò)母子進(jìn)行垂直傳播。此外,風(fēng)媒傳播在本病流行中具有重要的意義,通過(guò)氣源性感染可以使本病在3 km以內(nèi)的豬群中傳播。本病傳播速度極快,1~2周波及全場(chǎng),1~2個(gè)月擴(kuò)散到一個(gè)地區(qū),多發(fā)生于夏秋季節(jié)。(2)病毒的致病性顯著增強(qiáng)。不論豬場(chǎng)規(guī)模大小和條件好壞(吳堅(jiān),2007),PRRSV對(duì)各個(gè)品種、各個(gè)階段的豬均有致病力,對(duì)仔豬和育肥豬的致病力尤其強(qiáng),且患豬的發(fā)病率和病死率均高;40日齡以內(nèi)的仔豬病死率高達(dá)100%,育肥豬病死率約為50%;在一些地區(qū)的豬場(chǎng),發(fā)病率接近100%,病死率在30%~50%,甚至部分豬場(chǎng)的病死率可達(dá)80%以上(吾際舟,2007)。感染豬、康復(fù)豬及其污染物是本病的主要傳染源。病豬在康復(fù)后的3個(gè)月還可持續(xù)向外排毒。病毒可通過(guò)鼻、眼分泌物、胎兒及子宮、公豬精液等多途徑感染健康豬(韋海濤等,2007)。
高致病性豬藍(lán)耳病病豬除了可以出現(xiàn)傳統(tǒng)藍(lán)耳病癥狀外,還可見(jiàn)體溫明顯升高,達(dá)41℃以上;皮膚發(fā)紅,部分豬耳部出血、瘀血呈紫紅色;食欲減退或廢絕;眼結(jié)膜炎,眼瞼水腫;有咳嗽、氣喘等呼吸道癥狀;部分病豬會(huì)出現(xiàn)后軀無(wú)力、不能站立或共濟(jì)失調(diào)等神經(jīng)癥狀;部分懷孕母豬出現(xiàn)流產(chǎn),產(chǎn)木乃伊胎和死胎(童光志,2007)。發(fā)病豬傳染性強(qiáng),流行期長(zhǎng),在一個(gè)地區(qū)內(nèi)遷延數(shù)月無(wú)明顯好轉(zhuǎn),常規(guī)治療無(wú)明顯療效。發(fā)病豬病理變化可見(jiàn)肺出血、瘀血、肉樣實(shí)變,顯微鏡下可見(jiàn)間質(zhì)性肺炎,免疫組化染色肺泡巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞,胞質(zhì)內(nèi)可見(jiàn)豬藍(lán)耳病病毒陽(yáng)性反應(yīng);脾臟邊緣或表面可見(jiàn)梗死灶,顯微鏡下可見(jiàn)出血性梗死;軟腦膜瘀血、腦軟化,顯微鏡下可見(jiàn)非化膿性腦炎病變,免疫組化染色膠質(zhì)細(xì)胞胞質(zhì)呈豬藍(lán)耳病病毒陽(yáng)性反應(yīng);腎臟表面可見(jiàn)針尖至小米粒大出血點(diǎn)、斑;部分病例在皮下、扁桃體、心臟、肝臟可見(jiàn)出血點(diǎn)和出血斑。顯微鏡下可見(jiàn)間質(zhì)性腎炎病變,心臟、肝臟和胃腸道可見(jiàn)出血性壞死灶、滲出性炎癥等病變,腸系膜淋巴結(jié)明顯腫大出血(吾際舟,2007)。
根據(jù)《高致病性豬藍(lán)耳病防治技術(shù)規(guī)范》,符合臨床指標(biāo)、病理指標(biāo),并且高致病性PRRSV分離鑒定陽(yáng)性或高致病性PRRSV反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)檢測(cè)陽(yáng)性,則判定為高致病性藍(lán)耳病。
5.1做好主要疫病的免疫接種,力爭(zhēng)使常規(guī)的防疫、檢疫、消毒衛(wèi)生和隔離等工作規(guī)范化高致病性藍(lán)耳病以藍(lán)耳病病毒為主,但同時(shí)繼發(fā)豬瘟病毒、豬圓環(huán)病毒、豬流感病毒和豬副豬嗜血桿菌等,單純依靠高致病性豬藍(lán)耳病滅活疫苗完全控制該病不符合實(shí)際(吳堅(jiān),2007),仍需依靠良好的綜合防制措施。豬場(chǎng)應(yīng)提倡“養(yǎng)重于防、防重于治”的原則,做好主要疫病的免疫,提高豬體免疫力;并定期對(duì)免疫豬群進(jìn)行免疫抗體水平監(jiān)測(cè),根據(jù)群體抗體水平消長(zhǎng)情況及時(shí)加強(qiáng)免疫。做好豬場(chǎng)消毒與日常防疫管理工作,切斷病毒傳播途徑。實(shí)踐證明,良好的衛(wèi)生環(huán)境對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的疫病防控有著至關(guān)重要的作用。高致病性豬藍(lán)耳病病毒在外界環(huán)境中存活能力較差,只要日常消毒措施得當(dāng),病毒很容易被殺滅。
5.2加強(qiáng)飼養(yǎng)管理,實(shí)行封閉飼養(yǎng),盡量減少和避免各種應(yīng)激因素做好豬群的飼養(yǎng)管理。冬天確保豬舍保暖通風(fēng);夏天高溫季節(jié),要做好豬舍的通風(fēng)和防暑降溫工作,提供充足的清潔飲水,保持豬舍干燥,保證合理的飼養(yǎng)密度,降低應(yīng)激因素。用高品質(zhì)的飼料,保證充足的營(yíng)養(yǎng),增加礦物質(zhì)、維生素,以增強(qiáng)群體抵抗環(huán)境應(yīng)激和疾病的能力。嚴(yán)禁用泔水喂豬。遠(yuǎn)距離傳播主要原因包括調(diào)入仔豬、疫病豬同群豬緊急出欄外調(diào)和屠宰等,運(yùn)載生豬的車輛是遠(yuǎn)距離傳播疫病的重要因素。5.3重視豬場(chǎng)的生物安全體系建設(shè)力爭(zhēng)做到全進(jìn)全出飼養(yǎng),種豬場(chǎng)應(yīng)做到產(chǎn)房、保育舍和育肥舍的全進(jìn)全出。堅(jiān)持自繁自養(yǎng),引種時(shí)要嚴(yán)格檢測(cè),避免引進(jìn)帶毒豬和發(fā)病豬,必要時(shí)可注射滅活疫苗。新引進(jìn)的豬要隔離飼養(yǎng),觀察1個(gè)月無(wú)異常后再混群。藍(lán)耳病病情不穩(wěn)定的豬場(chǎng)和藍(lán)耳病陽(yáng)性豬場(chǎng)要規(guī)范各階段飼養(yǎng),防止繼發(fā)感染,可選擇性地注射藍(lán)耳病弱毒苗。注射疫苗前一定要進(jìn)行血清學(xué)監(jiān)測(cè),以檢查抗體水平和抗體均勻度。采血時(shí)一定要選擇各階段豬群,特別是種公母豬一定要列入檢測(cè)范圍。只有全面的檢測(cè)和選擇合適的疫苗注射時(shí)間,才能達(dá)到最好的效果。同時(shí)一定要注意在注射藍(lán)耳病疫苗時(shí)一定不可同時(shí)注射其他疫苗,最好間隔一周以上。另外,疑似發(fā)病的豬場(chǎng)一定要到正規(guī)的檢測(cè)機(jī)構(gòu)檢測(cè)后才能確診,不要未經(jīng)確診盲目應(yīng)用大量藥物和疫苗,造成不必要的損失。
5.4從觀念上改變養(yǎng)殖模式高致病性豬藍(lán)耳病的發(fā)生傳播及因此而造成的損失,與我國(guó)目前的養(yǎng)豬模式緊密相關(guān)。分散、低管理水平、低營(yíng)養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)、濫用藥物的養(yǎng)豬模式,使大批豬群處于亞健康狀態(tài),為病毒的變異創(chuàng)造了優(yōu)越條件。只有應(yīng)用高標(biāo)準(zhǔn)的養(yǎng)殖模式,才能防患于未然,使我國(guó)的養(yǎng)豬業(yè)走上健康可持續(xù)發(fā)展的道路。
自2006~2007年高致病性豬藍(lán)耳病在我國(guó)大流行后,由于各地采取措施,加大防控力度,疫情在一定程度上得到緩解,流行范圍縮小、流行頻率降低。但是,由于高致病性豬藍(lán)耳病病原污染面大,我國(guó)生豬飼養(yǎng)方式相對(duì)落后,基層防疫機(jī)構(gòu)和防疫隊(duì)伍尚不能滿足防疫需要,加之長(zhǎng)途調(diào)運(yùn)生豬增加,一些地方疫情還存在發(fā)生發(fā)展的隱患,目前仍是危害我國(guó)生豬生產(chǎn)的重要疫病,形勢(shì)依然嚴(yán)峻。因此,在對(duì)該病的全面防控上,還需要全社會(huì)的共同努力。
[1] 斯特勞BE. 張中秋, 趙德明, 沈建中等譯. 豬病學(xué)[M]. 北京: 中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社, 2003: 205-230.
[2] Wensvoort G, Terpstra C, Pol J M, et al.Mystery swine disease in The Netherlands: the isolation of Lelystad virus[J].Vet Q, 1991,13: 121-130.
[3] 童光志, 仇華吉, 周彥君等. 豬生殖-呼吸道綜合征病毒CH-1a結(jié)構(gòu)蛋白基因的克隆與序列分析[J]. 自然科學(xué)進(jìn)展, 2000, 10(2): 147-153. [4] 姜平, 陳溥言, 姜志華等. 我國(guó)兩個(gè)不同地區(qū)豬繁殖與呼吸綜合征病毒ORF5基因序列比較[J]. 病毒學(xué)報(bào), 2000, 16(3): 70-72.
[5] 金光明, 楊倩. 豬繁殖與呼吸綜合征免疫學(xué)研究進(jìn)展[J]. 安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2003, 31(1): 111-114, 116.
[6] Mengeling W L, Lager K M, Vorwald A C. The effect of porcine parvovirus and porcine reproductive and respiratory syndrome virus on porcine reproductive performance[J]. Animal Reproduction Science, 2000 (60-61): 199-210.
[7] 高云英, 賀玉勝, 劉秀琴等. 豬繁殖呼吸道綜合征研究進(jìn)展[J]. 甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào), 2002, 37(6): 139-144.
[8] DOKL T.The structural biology of PRRSV[J]. Virus Res, 2010, 154(1-2): 86-97.
[9] Huang Y W, Fang Y, Meng X J. Identification and characterization of aporcine monocytic cell line supporting porcine reproductive and respiratory syndrome virus(PRRSV)replication and progeny virion production by using an improved DAN-launched PRRSV reverse genetics system[J]. Virus Res, 2009, 145(1): 1-8.
[10] 劉光清, 蔡雪輝, 仇華吉等. 豬繁殖與呼吸綜合征的研究進(jìn)展[J].中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào), 2001, 23: 72-76.
S858.28
A
1007-1733(2016)12-0085-02
(2016–08–11)