賈超峰, 許 津, 張志勇, 張志偉, 劉海林, 陳淑吟, 祝 斐, 李 鵬

(1. 江蘇省海洋水產(chǎn)研究所, 江蘇省海水魚類遺傳育種重點實驗室, 江蘇 南通 226007; 2. 南京師范大學 生命科學學院, 江蘇 南京 210023)

丁香酚對真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交子一代麻醉效果的研究

賈超峰1, 許 津1, 張志勇1, 張志偉1, 劉海林1, 陳淑吟1, 祝 斐1, 李 鵬2

(1. 江蘇省海洋水產(chǎn)研究所, 江蘇省海水魚類遺傳育種重點實驗室, 江蘇 南通 226007; 2. 南京師范大學 生命科學學院, 江蘇 南京 210023)

為探索丁香酚對真鯛(Pagrosomus major) (♀)×黑鯛(Acanthopagrus schlegelii) (♂)雜交子一代的麻醉效果, 作者研究了麻醉劑濃度、溫度、魚體規(guī)格對魚體麻醉和復(fù)蘇的影響, 不同麻醉濃度下魚體呼吸頻率的變化, 以及麻醉時間和空氣中暴露時間對魚體復(fù)蘇的影響。結(jié)果表明, 丁香酚質(zhì)量濃度為

丁香酚; 麻醉; 真鯛(Pagrosomus major)(♀)×黑鯛(Acanthopagrus schlegelii)(♂)雜交子一代; 呼吸頻率

真鯛(Pagrosomus major)和黑鯛(Acanthopagrus schlegelii)為中國沿海常見的兩種經(jīng)濟魚類, 但由于真鯛抗逆性和肉質(zhì)較差, 黑鯛生長速度緩慢, 均難以成為中國海水魚類養(yǎng)殖主打品種。雜交育種是對遺傳性狀進行改良的主要方式之一, 1999年單保黨等[1]以真鯛為母本, 黑鯛為父本進行屬間雜交成功獲得雜交子一代。雜交魚兼具了父母本的優(yōu)良性狀, 具有肉質(zhì)好、生長速度快、易起捕等諸多優(yōu)點, 是一種優(yōu)良的養(yǎng)殖和研究對象。隨著苗種生產(chǎn)技術(shù)逐漸成熟, 雜交魚養(yǎng)殖規(guī)模有逐年擴大的趨勢, 市場需求也在不斷增加。由于該魚生性兇猛,在人為操作或運輸時劇烈掙扎, 極易對魚體造成損傷, 其鋒利的鰭棘也易對操作人員造成傷害。合理使用麻醉劑可以降低魚的應(yīng)激反應(yīng), 使操作得以順利進行。

MS-222(3-氨基苯甲酸乙酯甲基磺酸鹽)和丁香酚(eugenol)是兩種最常用的魚用麻醉劑。MS-222見效快、復(fù)蘇時間短、安全性高, 但使用成本較高, 且會在肌肉中存有少量殘留。美國食品藥品監(jiān)督管理局要求用MS-222麻醉過的商品魚出售前需在清水中飼養(yǎng)21 d[2]。丁香酚是一種純天然的植物提取物,能夠被迅速吸收和代謝, 24 h內(nèi)可以從魚體內(nèi)幾乎完全排出, 被日本、澳大利亞、韓國、新西蘭等國認為是合法的水產(chǎn)麻醉劑[3]。聯(lián)合國糧農(nóng)組織及世界衛(wèi)生組織聯(lián)合食品添加劑專家委員會報告認為每天攝入不高于150 mg的丁香酚不會對人類健康造成危害[4]。另外, 在兼具高效性和高安全性的同時, 丁香酚的使用成本僅為前者1/100左右, 優(yōu)勢明顯, 已被廣泛應(yīng)用于活魚運輸和親魚采卵等方面[5]。目前國內(nèi)外關(guān)于丁香酚在魚類麻醉上的應(yīng)用及對行為和生理影響的研究已有很多[6-12], 本試驗將研究丁香酚對真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交子一代麻醉效果的影響, 探索丁香酚最佳使用濃度, 為活魚人工操作及轉(zhuǎn)移運輸提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

丁香酚購自國藥集團化學試劑有限公司, 純度≥98.5%。使用前按丁香酚與無水乙醇1︰10(V︰V)的比例配制成母液備用。試驗于江蘇省海水增養(yǎng)殖技術(shù)及種苗中心進行, 試驗用魚為該中心培育1齡真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交子一代, 體質(zhì)量147.6 g±8.9 g,體長18.1 cm±1.1cm(試驗1.2.4除外), 大小均一, 活力良好, 無畸形, 實驗前停食24 h。試驗用水為沉淀72 h以上自然海水, 鹽度20.4±0.1, pH 8.0±0.1, 溫度17.5±0.3℃。試驗于120 L的塑料箱中進行, 放入50 L水, 微充氣, 保證溶解氧≥5.0mg/L。

1.2 試驗方法

1.2.1 麻醉及復(fù)蘇階段的劃分

根據(jù)對雜交魚的麻醉預(yù)試驗觀察將麻醉階段劃分為A0~A4 5個階段, 復(fù)蘇分為R1~R4 4個階段(表1)。當魚停止游動, 完全失去反應(yīng)能力, 僅鰓蓋張合時(A3階段)判定為已經(jīng)麻醉; 當魚體平衡和對外界刺激的反應(yīng)恢復(fù)時(R3階段)判定為已復(fù)蘇。

表1 麻醉及復(fù)蘇階段劃分Tab. 1 Inducing and recovering stages

1.2.2 丁香酚濃度對雜交魚麻醉效果的影響

試驗設(shè)置15、20、25、30、35、40、50、70、100 mg/L 9個質(zhì)量濃度的試驗組, 每組兩個平行, 每個平行5尾魚。試驗魚麻醉后立即轉(zhuǎn)入相同體積的清水中進行恢復(fù), 觀察試驗魚的行為特征, 記錄每尾魚麻醉和復(fù)蘇時間。用EXCEL計算各組均值, 結(jié)果以平均數(shù)±標準差表示。按照Marking[13]規(guī)定的3 min內(nèi)麻醉, 5 min內(nèi)復(fù)蘇的標準確定最佳麻醉濃度。

1.2.3 溫度對丁香酚麻醉效果的影響

由實驗1.2.2確定在常溫(17.5℃)下丁香酚對雜交魚的最佳麻醉濃度。試驗設(shè)置10、15、20、25、30℃ 5個溫度的試驗組, 各組設(shè)置同上。用水冷機和加熱板調(diào)節(jié)水溫, 溫度控制精度±0.5℃。雜交魚在各溫度組適應(yīng)24 h后開始麻醉。調(diào)節(jié)各組丁香酚濃度至最佳麻醉濃度, 記錄每組麻醉時間和復(fù)蘇時間。

1.2.4 魚體規(guī)格對丁香酚麻醉效果的影響

選取大小一致的3種規(guī)格雜交魚各10尾, 體質(zhì)量分別為86.9 g±6.3 g(小型魚)、185.4 g±14.7 g(中型魚)、475.9 g±28.8 g(大型魚)。常溫下于最佳濃度下麻醉, 記錄麻醉和復(fù)蘇時間。

1.2.5 丁香酚濃度對雜交魚呼吸頻率的影響

試驗設(shè)置10、20、30、50、70、100 mg/L 6個麻醉質(zhì)量濃度和1個空白對照組。將試驗魚放入自然海水中穩(wěn)定30 min后測定呼吸頻率作為初始呼吸頻率?？焖僬{(diào)節(jié)各組至設(shè)定麻醉濃度并開始計時。每分鐘測定1次呼吸頻率, 持續(xù)7 min。具體測定方法為: 計算每尾魚測量時間點前后5 s的平均呼吸頻率作為該時間點的呼吸頻率。

1.2.6 不同麻醉時間對雜交魚復(fù)蘇的影響

將30尾試驗魚在最佳麻醉質(zhì)量濃度下同時麻醉,分別于第5、7、10、14、20、30分鐘隨機取出5尾魚, 放入50 L清水中復(fù)蘇12 h, 記錄各組復(fù)蘇時間和復(fù)蘇率。試驗重復(fù)1次。

1.2.7 空氣暴露對深度麻醉雜交魚復(fù)蘇的影響

在最佳濃度下深度麻醉(A4階段)的25尾試驗魚分別在空氣中暴露4、9、15、22、30 min, 每個時間點隨機取5尾魚放入清水中恢復(fù), 記錄復(fù)蘇時間和復(fù)蘇率。試驗重復(fù)一次。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同濃度丁香酚對雜交魚的麻醉效果

丁香酚質(zhì)量濃度越大, 真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交子一代的麻醉時間越短(圖1)。質(zhì)量濃度為15~30 mg/L時, 麻醉時間隨濃度升高迅速縮短, 丁香酚質(zhì)量濃度繼續(xù)升高, 麻醉時間僅呈現(xiàn)出微弱縮短。在試驗濃度范圍內(nèi), 復(fù)蘇時間為3.93~6.23 min, 變化幅度較小, 且呈現(xiàn)出升高—下降—再升高的特點; 麻醉質(zhì)量濃度為50 mg/L時復(fù)蘇時間最短。按照3 min內(nèi)麻醉, 5 min內(nèi)復(fù)蘇的標準, 30、50、70 和100 mg/L均為最佳麻醉質(zhì)量濃度。但是一般而言, 麻醉劑質(zhì)量濃度越高, 從麻醉到魚死亡間的窗口期越短[11], 同時也造成了藥品的浪費, 因此選擇30 mg/L作為后續(xù)試驗的最佳麻醉質(zhì)量濃度。

圖1 丁香酚質(zhì)量濃度對雜交魚麻醉和復(fù)蘇時間的影響Fig. 1 Effect of eugenol dosage on induction and recovery time of F1 hybrids

2.2 溫度對丁香酚麻醉效果的影響

丁香酚為30 mg/L的最佳麻醉質(zhì)量濃度時, 麻醉時間和復(fù)蘇時間隨溫度的升高而縮短(圖2)。30℃時麻醉和復(fù)蘇所需時間最短, 分別為0.48和1.93 min。在溫度為15~25℃時, 麻醉和復(fù)蘇時間隨溫度變化最為明顯。在整個溫度范圍內(nèi), 魚體均可以滿足3 min內(nèi)麻醉, 5 min內(nèi)復(fù)蘇的條件。

圖2 溫度對麻醉和復(fù)蘇時間的影響Fig. 2 Effect of temperature on induction and recovery time

2.3 丁香酚對不同規(guī)格魚體的麻醉效果

在最佳麻醉質(zhì)量濃度下, 魚體質(zhì)量分別為86.9 g± 6.3 g(小型魚)、185.4 g±14.7 g(中型魚)、475.9 g±28.8 g (大型魚)時, 相應(yīng)的麻醉時間為1.60~2.10 min, 復(fù)蘇時間為3.32~3.72 min(圖3)。隨著體質(zhì)量的增加, 所需的麻醉時間逐漸縮短, 復(fù)蘇時間逐漸延長, 即規(guī)格較小的魚表現(xiàn)出更不易被麻醉, 而更易復(fù)蘇的特點。但麻醉和復(fù)蘇時間隨魚體規(guī)格變化都相對較小,均在0.5 min之內(nèi), 且在30 mg/L質(zhì)量濃度下, 3種規(guī)格魚的麻醉和復(fù)蘇時間均符合Marking[13]的最佳麻醉質(zhì)量濃度條件。

圖3 魚體規(guī)格對麻醉和復(fù)蘇時間的影響Fig. 3 Effect of fish size on induction and recovery time

2.4 丁香酚濃度對魚體呼吸頻率的影響

在麻醉的初始階段, 試驗魚的呼吸頻率出現(xiàn)了輕微的升高, 隨后逐漸下降(圖4)。在7 min內(nèi), 10 mg/L和20 mg/L兩個麻醉組的呼吸頻率與對照組(0 mg/L)具有相同趨勢。且從試驗觀察發(fā)現(xiàn), 10 mg/L的丁香酚僅能使試驗魚麻醉至深度鎮(zhèn)靜狀態(tài)(A2階段), 20 mg/L丁香酚僅能使魚麻醉至A3階段。當丁香酚質(zhì)量濃度為30~100 mg/L時, 呼吸頻率隨時間變化有明顯的降低趨勢, 質(zhì)量濃度越高, 呼吸頻率降低越快。呼吸頻率的降低整體呈現(xiàn)出: 慢—快—慢的特點, 結(jié)合2.1的結(jié)果可以看出, 呼吸頻率的快速下降是在進入麻醉(A3階段)之后, 即在A0~A3階段, 呼吸頻率降低并不明顯, 從A3階段到深度麻醉的A4階段呼吸頻率迅速下降, 至呼吸停止前吸頻率下降再次放緩。

圖4 丁香酚濃度對雜交魚呼吸頻率的影響Fig. 4 Effect of eugenol dosage on respiratory rate of F1 hybrids

2.5 不同麻醉時間對魚體復(fù)蘇的影響

最佳麻醉質(zhì)量濃度下, 麻醉時間為5~14 min時,復(fù)蘇時間為3.21~3.83 min, 僅表現(xiàn)出微弱的增加趨勢(表2)。隨著麻醉時間的延長, 復(fù)蘇時間增加明顯,且試驗魚開始出現(xiàn)死亡, 麻醉20和30 min死亡率分別為20%和30%。因此, 真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交子一代在30mg/L的最佳麻醉濃度下的麻醉時間不宜超過14 min。

表2 麻醉時間對雜交魚復(fù)蘇的影響Tab. 2 Effect of bath time on recovery of F1 hybrids

2.6 空氣暴露對魚體復(fù)蘇的影響

丁香酚質(zhì)量濃度為30 mg/L時, 試驗魚在第9.13 min進入深度麻醉(A4階段), 直接放入清水中復(fù)蘇所需時間為4.75 min(表3)。隨暴露時間的延長, 復(fù)蘇時間呈現(xiàn)出先縮短后增加的趨勢。暴露4 min時, 復(fù)蘇所需時間最短; 暴露9 min, 復(fù)蘇時間升高至與直接復(fù)蘇相當?shù)乃? 暴露時間>9 min, 復(fù)蘇時間迅速增加, 且試驗魚開始出現(xiàn)死亡; 空氣暴露30 min后,試驗魚全部死亡。

表3 在空氣中暴露時間對雜交魚復(fù)蘇的影響Tab. 3 Effect of air exposure time on recovery of F1 hybrids

3 討論

3.1 丁香酚對雜交魚麻醉的最佳質(zhì)量濃度

眾多研究表明, 隨著麻醉液質(zhì)量濃度的增加, 麻醉所需時間也相應(yīng)縮短, 復(fù)蘇時間則逐漸增加[10-11,14], 適宜的麻醉質(zhì)量濃度應(yīng)在提高效率的同時可以及時判斷魚的麻醉狀態(tài), 減少麻醉事故。國內(nèi)外學者[8-10,15]大都采用Marking[13]設(shè)定的3 min內(nèi)麻醉, 5 min內(nèi)復(fù)蘇的標準判定最佳麻醉質(zhì)量濃度。丁香酚對硬骨魚類的最佳麻醉質(zhì)量濃度大都集中在20~100 mg/L范圍內(nèi)[14]。本試驗中, 丁香酚質(zhì)量濃度為30~100 mg/L時, 對雜交魚均有理想的麻醉和復(fù)蘇效果, 且在質(zhì)量濃度為30、50、70和100 mg/L時均能滿足最佳麻醉質(zhì)量濃度的要求。但是在較高的質(zhì)量濃度下, 不僅造成藥品的浪費, 而且更容易導致魚體死亡[11]。質(zhì)量濃度為30 mg/L時, 在不同溫度下或?qū)Σ煌?guī)格的魚進行麻醉, 麻醉和復(fù)蘇時間均能滿足最佳麻醉濃度標準, 因此, 可以把30 mg/L作為丁香酚對真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交子一代麻醉的最佳質(zhì)量濃度。值得注意的是, 丁香酚質(zhì)量濃度為50 mg/L時, 雜交魚復(fù)蘇時間最短, 可能是由于在此質(zhì)量濃度下, 麻醉時間較短, 麻醉劑在魚體內(nèi)尚未擴散, 更容易被排出。

3.2 溫度和魚體規(guī)格對麻醉效果的影響

溫度的升高可以提高麻醉劑的作用效力[6]。魚體放入麻醉液后, 主要通過腮絲吸收, 進入血液循環(huán)系統(tǒng)。隨著溫度的升高, 魚體血液循環(huán)和呼吸頻率均有所提高, 麻醉劑更容易通過腮進入和排出魚體[7],麻醉和復(fù)蘇時間均有較大程度縮短。在較低溫度(10~15℃)和較高溫度(25~30℃)下, 麻醉和復(fù)蘇時間隨溫度的變化相對較小, 可能是由于該溫度范圍接近雜交魚的耐受極限[16], 其生理適應(yīng)性調(diào)節(jié)的響應(yīng)靈敏度下降, 呼吸頻率隨溫度的變化減小。

魚體規(guī)格對進入麻醉和復(fù)蘇時間的影響并不明顯[17], 且無明確的單向性影響[9], 這可能與藥物性質(zhì)和魚的種類不同有關(guān)。丁香酚濃度為30 mg/L時,不同規(guī)格雜交魚麻醉和復(fù)蘇時間的變化較小, 小規(guī)格魚麻醉所需時間相對較長, 復(fù)蘇時間則更短, 說明小規(guī)格雜交魚對丁香酚耐受性更強, 這與李靖等[9]在大西洋鮭上的研究結(jié)果類似?？赡苁且驗榇笠?guī)格雜魚體腮部絕對水交換速度較快, 且體質(zhì)量腦指數(shù)(腦重/體質(zhì)量)較小[18], 麻醉劑更容易在神經(jīng)系統(tǒng)中累積到麻醉所需濃度閾值, 復(fù)蘇時由于麻醉劑已經(jīng)在魚體內(nèi)二次分布, 大規(guī)格魚體內(nèi)麻醉劑分布更加分散, 更不易被排出。

3.3 丁香酚質(zhì)量濃度對呼吸頻率的影響

在魚體麻醉過程中, 麻醉劑首先作用于腦皮質(zhì)抑制魚的感覺中樞, 再作用于基底神經(jīng)節(jié)和小腦麻痹運動中樞, 最后作用于延腦和脊髓使魚的呼吸受到抑制[19]。低濃度的丁香酚溶液可以使雜交魚的感覺和運動受到抑制, 但其呼吸頻率并未發(fā)生變化,可能是因為呼吸中樞的麻痹需要更高的濃度閾值。雜交魚的麻醉過程隨麻醉劑作用部位的不同呈現(xiàn)出明顯的時序性, 在麻醉的初始階段, 魚的呼吸頻率變化較為平穩(wěn), 并有一個輕微升高隨后下降的現(xiàn)象,這與管曙光等[15]鲉在許氏平(Sebastes schlegelii)上觀察到的結(jié)果相一致, 可能是由于丁香酚具有一定的刺激性[8], 使魚在麻醉初始階段產(chǎn)生輕度的應(yīng)激反應(yīng)。呼吸頻率的降低基本處于進入深度麻醉的過程中(A3~A4), 說明在這一階段魚的呼吸中樞受到抑制。有研究發(fā)現(xiàn), 一定質(zhì)量濃度的麻醉劑可以使魚保持較低的呼吸頻率[15], 本試驗并未發(fā)現(xiàn)類似的質(zhì)量濃度, 可能是因為能夠使雜交魚保持較低呼吸頻率的丁香酚溶液質(zhì)量濃度范圍過于狹窄(20~30 mg/L)。

3.4 丁香酚在活體操作和活魚運輸上的應(yīng)用

較高質(zhì)量濃度下的長時間麻醉會造成呼吸頻率的過度下降或停止, 并可能引發(fā)心臟驟停, 血液中含氧量的下降和CO2的累積還會引起呼吸性酸中毒,若不能及時復(fù)蘇將會導致魚死亡[14]。在丁香酚質(zhì)量濃度為30 mg/L時, 麻醉時間超過14 min將可能造成雜交魚死亡。魚體在深度麻醉狀態(tài)下于空氣中暴露, 一段時間內(nèi)不會造成死亡[11], 適合對魚進行測量、標記、采血等操作。30 mg/L的丁香酚溶液可以使魚體進入深度麻醉狀態(tài), 空氣暴露4 min時, 魚體復(fù)蘇時間出現(xiàn)一定下降, 可能是丁香酚的揮發(fā)以及在魚體內(nèi)的代謝和二次分布所致?？諝庵斜┞? min以內(nèi)不會對魚的復(fù)蘇造成影響, 可以滿足離水操作的要求。

低質(zhì)量濃度的麻醉劑不僅可以起到鎮(zhèn)靜作用, 還可以顯著降低魚體耗氧量和氨氮排放, 使魚體長時間保持較低的代謝水平[12], 在活魚運輸中可以顯著減輕應(yīng)激和魚體損傷, 增加運輸距離和運輸量, 提高運輸成活率。Cooke[20]認為深度鎮(zhèn)靜期(A2階段)是活魚運輸?shù)倪m宜狀態(tài)。10 mg/L的丁香酚溶液能夠使真鯛(♀)×黑鯛(♂)雜交魚長時間保持在這一階段, 是活魚運輸?shù)倪m宜濃度。但由于丁香酚在魚體內(nèi)的代謝速度較快, 且在水中充氣狀態(tài)下更易揮發(fā), 魚體可能在數(shù)小時后恢復(fù)正常狀態(tài)[10], 因此, 不同運輸時間和運輸條件下丁香酚的適用質(zhì)量濃度和應(yīng)用方式還需進一步探索。20 mg/L的丁香酚溶液可以使魚保持正常的呼吸, 但是由于魚體進入麻醉狀態(tài)(A3階段)后, 失去自主游泳能力, 增加運輸中與容器壁的碰撞機會, 并可能沉入水底, 堆積擠壓造成窒息, 不宜用于活魚運輸。

[1] 單保黨, 洪萬樹, 何大仁. 真鯛與黑鯛雜交與多倍體育種系列研究-Ⅰ[J]. 海洋漁業(yè), 1999, 21(1): 14-15. Shan Baodang, Hong Wanshu, He Daren. A series studies on hybridization and polyploid breeding between red sea bream and black porgy (Ⅰ)[J]. Marine Fisheries, 1999, 21(1): 14-15.

[2] Coyle S D, Durborow R M, Tidwell J H. Anesthetics in aquaculture[R]. Stoneville, USA: SRAC Publication, 2004.

[3] 李晉成, 劉歡, 吳立冬, 等. 動物體內(nèi)麻醉劑殘留檢測技術(shù)研究進展[J]. 食品科學, 2014, 35(5): 251-256. Li Jincheng, Liu Huan, Wu Lidong, et al. Progress in detection of anesthetic residues in food-producing animals[J]. Food Science, 2014, 35(5): 251-256.

[4] JECFA. Evaluation of certain food additives and contaminants: Sixty-fifth report of the Joint FAO/WHO Expert Committee on Food Additives[R]. Geneva, SUI: WHO Technical Report Series, 2006.

[5] 聶小寶, 張玉晗, 孫小迪, 等. 活魚運輸?shù)年P(guān)鍵技術(shù)及其工藝方法[J]. 漁業(yè)現(xiàn)代化, 2014, 41(4): 34-39. Nie Xiaobao, Zhang Yuhan, Sun Xiaodi, et al. Process and key technologies of transportation of live fish[J]. Fishery Modernization, 2014, 41(4): 34-39.

[6] Akbulut B, Ayd?n ?, ?avdar Y. Influence of temperature on clove oil anesthesia in flounder (Platichthys flesus Linnaeus, 1758)[J]. Journal of Applied Ichthyology, 2012, 28(2): 254-257.

[7] Mylonas C C, Cardinaletti G, Sigelaki I, et al. Comparative efficacy of clove oil and 2-phenoxyethanol as anesthetics in the aquaculture of European sea bass (Dicentrarchus labrax) and gilthead sea bream (Sparus aurata) at different temperatures[J]. Aquaculture, 2005, 246(1): 467-481.

[8] Sladky K K, Swanson C R, Stoskopf M K, et al. Comparative efficacy of tricaine methanesulfonate and clove oil for use as anesthetics in red pacu (Piaractus brachypomus)[J]. American Journal of Veterinary Research, 2001, 62(3): 337-342.

[9] 李靖, 劉寶良, 王順奎, 等. 丁香酚對大西洋鮭麻醉效果的實驗研究[J]. 海洋科學進展, 2015, 33(1): 92-99. Li Jing, Liu Baoliang, Wang Shunkui, et al. The anesthesia effect of eugenol on Salmon salar[J]. Advances in Marine Science, 2015, 33(1): 92-99.

[10] 孟慶磊, 董學颯, 朱永安, 等. 丁香酚對澳洲長鰭鰻麻醉效果的研究[J]. 農(nóng)學學報, 2012, 1(7): 46-50. Meng Qinglei, Dong Xuesa, Zhu Yongan, et al. Use of eugenol as an anesthetic for Australian longfinned eel, Anguilla reinhardtii (Steindachner)[J]. Journal of Ag-riculture, 2012, 1(7): 46-50.

[11] 趙艷麗, 楊先樂, 黃艷平, 等. 丁香酚對大黃魚麻醉效果的研究[J]. 水產(chǎn)科技情報, 2002, 29(4): 163-165. Zhao Yanli, Yang Xianle, Huang Yanping, et al. The anesthesia effect of eugenol on large yellow croaker (Pseudosciaena crocea)[J]. Fisheries Science & Technology Information, 2002, 29(4): 163-165.

[12] 莊平, 徐濱, 章龍珍, 等. MS-222 和丁香酚對中華鱘幼魚耗氧率與排氨率的影響[J]. 中國水產(chǎn)科學, 2009, 16(4): 612-618. Zhuang Ping, Xu Bin, Zhang Longzhen, et al. Effects of MS-222 and clove oil on oxygen consumption rate and ammonia excretion rate of juvenile Chinese sturgeon, Acipenser sinensis[J]. Journal of Fishery Sciences of China, 2009, 16(4): 612-618.

[13] Marking L L, Meyer F P. Are better anesthetics needed in fisheries?[J]. Fisheries, 1985, 10(6): 2-5.

[14] Javahery S, Nekoubin H, Moradlu A H. Effect of anesthesia with clove oil in fish (review)[J]. Fish Physiology and Biochemistry, 2012, 38(6): 1545-1552.

[15] 官曙光, 關(guān)健, 劉洪軍, 等. MS-222麻醉許氏平鲉幼魚的初步研究[J]. 海洋科學, 2011, 35(5): 100-105. Guan Shuguang, Guan Jian, Liu Hongjun, et al. Anesthetic effect of MS-222 on juveniles of Sebastes schlegelii[J]. Marine Sciences, 2011, 35(5): 100-105.

[16] 蔣宏雷, 吳雄飛. 真鯛與黑鯛及雜交 F1 耐受溫度、生長比較[J]. 現(xiàn)代漁業(yè)信息, 2009, 24(2): 26-28. Jiang Honglei, Wu Xiongfei. Comparative study on temperature tolerance and growth between Pagrus major (Temminck et Schlegel) and Spraus macrocephalus and F1 hybrid[J]. Modern Fisheries Information, 2009, 24(2): 26-28.

[17] Hoskonen P, Pirhonen J. The effect of clove oil sedation on oxygen consumption of six temperate-zone fish species[J]. Aquaculture Research, 2004, 35(10): 1002-1005.

[18] 金剛, 丁莉, 李鐘杰. 保安湖四種小型魚類腦指數(shù)初步研究[J]. 水生生物學報, 2008, 32(1): 109-111. Jin Gang, Ding Li, Li Zhongjie. Primary study on the brain index of four small fishes in lake of Bao'an[J]. Acta Hydrobiologica Sinica, 2008, 32(1): 109-111.

[19] 李思發(fā). 魚類麻醉劑[J]. 淡水漁業(yè), 1988, 1: 22-23. Li Sifa. Fish anesthetics[J]. Freshwater Fisheries, 1988, 1: 22-23.

[20] Cooke S J, Suski C D, Ostrand K G, et al. Behavioral and physiological assessment of low concentrations of clove oil anesthetic for handling and transporting largemouth bass (Micropterus salmoides)[J]. Aquaculture, 2004, 239(1): 509-529.

Received:Dec. 12, 2015

Efficacy of eugenol as an anesthetic for F1 hybrids between Pagrosomus major (♀) and Acanthopagrus schlegelii (♂)

JIA Chao-feng1, XU Jin1, ZHANG Zhi-yong1, ZHANG Zhi-wei1, LIU Hai-lin1, CHEN Shu-yin1, ZHU Fei1, LI Peng2
(1. Jiangsu Key Laboratory of Genetics and Breeding of Marine Fish, Jiangsu Institute of Oceanology and Marine Fisheries, Nantong 226007, China; 2. College of Life Science, Nanjing Normal University, Nanjing 210023, China)

Eugenol; anesthesia; Pagrosomus major (♀) and Acanthopagrus schlegelii (♂) F1; respiratory rate

This study investigated the efficacy of eugenol as an anesthetic for F1 hybrids between Pagrosomus major (♀) and Acanthopagrus schlegelii (♂). We observed the performance of F1 hybrids exposed to different eugenol dosages and temperature and explored the impact of anesthesia time, body weight, and air exposure duration on anesthesia. Results showed that induction period was shorter at higher dosages. Inducing and recovering F1 hybrids took a short time at 30 mg/L of eugenol, which was supposed to be the optimal dosage for the anesthetic bath. Higher temperatures appear to augment the anesthetic effect; there was a large degree of reduction of induction and recovery time with increasing temperature. Body weight had no significant effects on induction and recovery, but small body sizes appeared more resistant to eugenol. Respiratory rates of F1 hybrids decreased at a faster rate in higher concentration baths. No significant effects on respiratory rates were observed at dosages ≤20 mg/L. After inducing stage A3 at higher doses, there was an inhibition of the respiratory center in the medulla oblongata that led to a rapid decline of respiratory rates. Anesthetic bath held for more than 14 min may lead to mortality. Exposure of deeply anesthetized F1 hybrids to air for less than 9 min did not cause death, and the shortest possible time needed for recovery when exposed was 4 min. These results can provide information for vivisection and transportation of F1 hybrids.

S965.3

A

1000-3096(2016)12-0041-06

10.11759//hykx20151212001

(本文編輯: 譚雪靜)

2015-12-12;

2016-01-28

江蘇省水產(chǎn)三新工程項目(D2015-17, Y2016-23); 江蘇省創(chuàng)新能力建設(shè)計劃項目(BM2015017); 江蘇省重點研發(fā)項目(BE2016326);南通市應(yīng)用基礎(chǔ)研究計劃項目(MS12015070, MS12015071)

[Foundation: Three Reforms in Aquaculture Engineering of Jiangsu Province, No. D2015-17 & Y2016-23; Jiangsu Innovation Ability Construction Program, No. BM2015017; Jiangsu Key Research Program, No. BE2016326; Applied Foundational Research Program of Nantong, No. MS12015070 & MS12015071]

賈超峰(1988-), 男, 河南商丘人, 碩士, 助理工程師, 主要從事海洋生物遺傳育種與生理生態(tài)方面研究, 電話: 18851310306,

E-mail: chaofeng.124@163.com; 張志勇, 通信作者, 研究員, E-mail: 13906292412@139.com; 劉海林, 通信作者, 工程師, E-mail: 1765016796@qq.com

30 mg/L時, 對雜交魚具最佳麻醉效果; 溫度對丁香酚麻醉效力具有促進作用; 麻醉和復(fù)蘇時間受魚體規(guī)格的影響較小, 小規(guī)格雜交魚對丁香酚耐受性稍強; 丁香酚質(zhì)量濃度≤20 mg/L對呼吸頻率沒有明顯影響, 質(zhì)量濃度≥30 mg/L, 呼吸頻率迅速下降; 魚體在30 mg/L的丁香酚溶液中麻醉時間不宜超過

14 min; 深度麻醉狀態(tài)下, 空氣中暴露9 min以內(nèi)不會引起魚死亡。研究將為雜交魚活體操作和轉(zhuǎn)移運輸提供參考。