○黃保信張仁順

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高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的急性毒性研究

○黃保信張仁順

麥穗魚(yú)，隸屬鯉科鮈亞科的麥穗魚(yú)屬，為江河、湖泊常見(jiàn)的雜食性魚(yú)類。麥穗魚(yú)之名，是指它的體形大小如麥穗。麥穗魚(yú)體型小、分布廣泛、來(lái)源方便且不受季節(jié)限制、易于在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的毒理學(xué)試驗(yàn)生物。

近年來(lái)，擬除蟲(chóng)菊酯作為常用的農(nóng)藥，經(jīng)常用于農(nóng)作物上，使用劑量不斷加大，使用范圍不斷擴(kuò)大，施用的農(nóng)藥通過(guò)地表徑流等進(jìn)入水體中，引起的環(huán)境污染問(wèn)題也日趨嚴(yán)重，水產(chǎn)動(dòng)物因菊酯類農(nóng)藥中毒死亡事件也屢屢發(fā)生。我們通過(guò)高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的急性毒性試驗(yàn)，以揭示其對(duì)這些菊酯類農(nóng)藥的急性中毒反應(yīng)，為研究農(nóng)藥面源污染對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象的影響提供理論依據(jù)和保護(hù)水體生態(tài)環(huán)境提供科學(xué)的理論參考。

1試驗(yàn)材料和方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1試驗(yàn)魚(yú)類

試驗(yàn)魚(yú)為麥穗魚(yú)水花苗,平均體長(zhǎng)1.2cm,為了避免在捕撈時(shí)引起的損傷，運(yùn)輸?shù)仍驅(qū)υ囼?yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，試驗(yàn)前暫養(yǎng)于水族箱中5天，每天換水、投餌各1次，并及時(shí)清除糞便及殘餌。如果在此期間試驗(yàn)魚(yú)表現(xiàn)正常，則挑選體質(zhì)健壯、無(wú)病個(gè)體用于毒性試驗(yàn)。

1.1.2試驗(yàn)藥物

高效氯氟氰菊酯[興農(nóng)藥業(yè)（中國(guó)）有限公司]為油乳劑，有效成分含量為25g/L；高效氯氰菊酯（安徽豐樂(lè)農(nóng)化有限責(zé)任公司）為微乳劑，有效成分含量為4.5%。

1.1.3實(shí)驗(yàn)器材

水族箱（50cm×32cm×33cm）、量筒（5mL，10mL，100mL，1000mL)、玻璃棒、溫度計(jì)、精密pH試紙、移液槍、燒杯、試管刷、充氧泵、毛巾、口罩、科學(xué)計(jì)算器。

1.1.4實(shí)驗(yàn)條件

試驗(yàn)水溫為（22±1.5℃），試驗(yàn)用水為湄潭縣龍泉山山泉水，溶氧為5.5mg/L，pH值為6.9～7.4。每個(gè)水族箱中加入30L水，在高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的急性毒性試驗(yàn)中每個(gè)試驗(yàn)組隨機(jī)投放體質(zhì)健壯的麥穗魚(yú)水花苗100尾。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1實(shí)驗(yàn)步驟

試驗(yàn)采用靜水生物試驗(yàn)法，實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前查閱相關(guān)文獻(xiàn)資料，根據(jù)文獻(xiàn)提供的數(shù)據(jù)，適當(dāng)擴(kuò)大和縮小實(shí)驗(yàn)的用藥濃度范圍進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。經(jīng)過(guò)預(yù)備實(shí)驗(yàn)，確定在實(shí)驗(yàn)中所用藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象急性毒性的作用時(shí)間，在試驗(yàn)魚(yú)全部存活的最高質(zhì)量濃度和全部死亡的最低質(zhì)量濃度之間進(jìn)行毒性試驗(yàn)，高效氯氟氰菊酯、高效氯氰菊酯各設(shè)置4個(gè)濃度梯度，1組平行，2個(gè)對(duì)照組。試驗(yàn)期間不更換試驗(yàn)液，為了防止餌料的影響，試驗(yàn)過(guò)程中充氣不投餌。試驗(yàn)期間每天測(cè)水溫、pH值和溶氧。麥穗魚(yú)水花苗試驗(yàn)每個(gè)濃度組隨機(jī)投放麥穗魚(yú)水花苗100尾，并設(shè)置不加藥液的對(duì)照組。

試驗(yàn)開(kāi)始后，第1h內(nèi)連續(xù)觀察試驗(yàn)進(jìn)展情況，在2、4、8、12、24、48h時(shí)觀察試驗(yàn)魚(yú)中毒癥狀、存活情況，并及時(shí)剔除死亡的個(gè)體。

1.2.2死魚(yú)的判斷標(biāo)準(zhǔn)

魚(yú)中毒死亡的標(biāo)準(zhǔn)是魚(yú)呼吸停止并對(duì)外界刺激無(wú)反應(yīng)，即當(dāng)試驗(yàn)魚(yú)中毒后鰓蓋完全停止活動(dòng)且魚(yú)體對(duì)外物（如玻璃棒或鑷子）刺激30s內(nèi)沒(méi)有產(chǎn)生反應(yīng)即確定為死亡。

1.2.3計(jì)算方法

根據(jù)死亡率和死亡時(shí)間，采用直線內(nèi)插法計(jì)算試驗(yàn)魚(yú)的48h半致死濃度（LC50）。

2結(jié)果

2.1高效氯氟氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的毒性作用

高效氯氟氰菊酯又名功夫菊酯。高效、廣譜、速效擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)、殺螨劑，以觸殺和胃毒作用為主，無(wú)內(nèi)吸作用。它的藥效特點(diǎn)，抑制昆蟲(chóng)神經(jīng)軸突部位的傳導(dǎo)，對(duì)昆蟲(chóng)具有趨避、擊倒及毒殺的作用，對(duì)刺吸式口器的害蟲(chóng)及害螨有一定防效。不同的是它對(duì)螨蟲(chóng)有較好的抑制作用，在螨類發(fā)生初期使用，可抑制螨類數(shù)量上升。但多項(xiàng)研究證明，高效氯氟氰菊酯對(duì)魚(yú)類劇毒，對(duì)水體生態(tài)會(huì)造成嚴(yán)重的破壞。

在高效氯氟氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的急性毒性試驗(yàn)中，在對(duì)照組48h內(nèi)無(wú)死亡的情況下，高效氯氟氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的48h-LC50為3.28×10-5mg/L，當(dāng)濃度為1×10-4mg/L時(shí)，48h內(nèi)試驗(yàn)魚(yú)的致死率為100%；當(dāng)濃度為1×10-5mg/L，48h內(nèi)試驗(yàn)魚(yú)的致死率達(dá)33%。

試驗(yàn)開(kāi)始30min后，1×10-3mg/L和1×10-4mg/L濃度組中的試驗(yàn)魚(yú)呼吸頻率加快，上下亂竄，游動(dòng)不安，身體抽搐，擊壁等中毒現(xiàn)象發(fā)生。1h后，兩個(gè)濃度組的大部分試驗(yàn)魚(yú)側(cè)翻沉入水底，不時(shí)地扭動(dòng)身體，1×10-3mg/L濃度組中的試驗(yàn)魚(yú)不時(shí)地躍出水面。2h后，1×10-3mg/L濃度組中試驗(yàn)魚(yú)死亡率達(dá)34%，1×10-4mg/L濃度組中試驗(yàn)魚(yú)死亡率為23%，而在1×10-5mg/L濃度組中，麥穗魚(yú)水花苗在試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)表現(xiàn)正常，3h后，中毒的試驗(yàn)魚(yú)快速游動(dòng)，之后靜浮在水中，最后側(cè)翻于水底，在試驗(yàn)進(jìn)行到4h時(shí)，有3條試驗(yàn)魚(yú)死亡，到試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，死亡率為33%，而在1×10-6mg/L濃度組中的麥穗魚(yú)水花苗在48h內(nèi)無(wú)死亡。

表1　高效氯氟氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的毒性試驗(yàn)

2.2高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的毒性作用

高效氯氰菊酯是一種擬除蟲(chóng)菊酯類殺蟲(chóng)劑，生物活性較高，是氯氰菊酯的高效異構(gòu)體，具有觸殺和胃毒作用。殺蟲(chóng)譜廣、擊倒速度快，殺蟲(chóng)活性較氯氰菊酯高，主要防治農(nóng)作物上發(fā)生的鱗翅目害蟲(chóng)，具有強(qiáng)毒性。適用于防治棉花、蔬菜、果樹(shù)、茶樹(shù)、森林等多種植物上的害蟲(chóng)及衛(wèi)生害蟲(chóng)。雖然高效氯氰菊酯在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)揮著重要的作用，但研究證明，高效氯氰菊酯卻對(duì)魚(yú)類劇毒，進(jìn)入水體中的高效氯氰菊酯會(huì)將會(huì)對(duì)水體生態(tài)不利影響。

在高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的急性毒性試驗(yàn)中，在對(duì)照組48h內(nèi)無(wú)死亡的情況下，高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的48h-LC50為2.37×10－5mg/L。當(dāng)濃度為1×10－4mg/L時(shí)，48h內(nèi)麥穗魚(yú)水花苗死亡率達(dá)100%；當(dāng)濃度為1× 10－5mg/L時(shí)，48h內(nèi)麥穗魚(yú)水花苗死亡率為41%。

試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，1×10-3mg/L濃度組中的試驗(yàn)魚(yú)表現(xiàn)為躁動(dòng)不安，鰓蓋擴(kuò)張頻率加快，上下竄動(dòng)，尾彎曲等神經(jīng)中毒癥狀發(fā)生，試驗(yàn)進(jìn)行到1小時(shí)20分鐘后，已有大部分試驗(yàn)魚(yú)側(cè)翻于水底，反應(yīng)遲鈍，2h后，死亡率為38%，8h后死亡率為89%，12h后整組試驗(yàn)魚(yú)全部死亡。1×10-4mg/L濃度組試驗(yàn)魚(yú)在試驗(yàn)開(kāi)始半小時(shí)前表現(xiàn)較為正常，1h后11條魚(yú)側(cè)翻沉于水底，不時(shí)地躍動(dòng)，2h后有7條魚(yú)中毒死亡，48h后死亡率為100%。而1×10-5mg/L濃度組試驗(yàn)魚(yú)前期表現(xiàn)較為正常，無(wú)中毒反應(yīng)，當(dāng)試驗(yàn)進(jìn)行到8h后，7條試驗(yàn)魚(yú)相繼中毒死亡，實(shí)驗(yàn)結(jié)束試驗(yàn)魚(yú)死亡率達(dá)41%；1×10-6mg/L濃度組表現(xiàn)正常，試驗(yàn)過(guò)程中無(wú)試驗(yàn)魚(yú)死亡。

表2　高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的毒性試驗(yàn)

3討論

3.1高效氯氟氰菊酯對(duì)魚(yú)類的毒性

本研究以麥穗魚(yú)水花苗為試驗(yàn)對(duì)象，探究農(nóng)藥高效氯氟氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的急性毒性。根據(jù)《化學(xué)農(nóng)藥環(huán)境安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)準(zhǔn)則》的評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)，當(dāng)農(nóng)藥對(duì)魚(yú)類LC50≤0.1mg/L時(shí)，說(shuō)明該農(nóng)藥對(duì)魚(yú)類劇毒。高效氯氟氰菊酯屬于擬除蟲(chóng)菊酯殺蟲(chóng)劑，該類殺蟲(chóng)劑屬于神經(jīng)毒劑，其作用機(jī)制主要是通過(guò)抑制腦突觸體膜上的ATPase，使突觸后膜上的乙酰膽堿酯酶(AchE)等神經(jīng)遞質(zhì)大量聚集，從而引起腦AchE被抑制。在夏曉華，張林霞，司松波等進(jìn)行的高效氯氟氰菊酯對(duì)泥鰍的急性毒性及生理毒性研究中，得出高效氯氟氰菊酯對(duì)泥鰍的48h-LC50為2.44×10-2mg/L。夏曉華等進(jìn)行的高效氯氟氰菊酯對(duì)大鱗副泥鰍的急性毒性和遺傳毒性[8]研究中,高效氯氟氰菊酯對(duì)大鱗副泥鰍的48h-LC50為1.728×10-2mg/L。王彥美，付榮恕研究的高效氯氟氰菊酯對(duì)黃鱔的急性毒性作用[9]，得出高效氯氟氰菊酯對(duì)黃鱔的48h-LC50為3.2×10-5mg/L。由此看來(lái)，高效氯氟氰菊酯對(duì)不同的魚(yú)種以及同種魚(yú)的不同規(guī)格的急性毒性都是有差異的，但對(duì)魚(yú)類均表現(xiàn)為劇毒。

3.2高效氯氰菊酯對(duì)魚(yú)類的毒性

高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的毒性和其他研究結(jié)果一樣，本研究發(fā)現(xiàn)，麥穗魚(yú)水花苗對(duì)高效氯氰菊酯相當(dāng)敏感，該農(nóng)藥對(duì)魚(yú)類屬于劇毒。當(dāng)然，不同種類、不同發(fā)育階段的魚(yú)，對(duì)其敏感性有著較大的差異，高效氯氰菊酯的毒性也顯示出較大差異。江輝等進(jìn)行的4種農(nóng)藥對(duì)泥鰍的急性毒性及敏感性研究，得到高效氯氰菊酯對(duì)泥鰍的48h-LC50為4× 10-4mg/L。施鋼等研究的4種水產(chǎn)藥物對(duì)藍(lán)點(diǎn)笛鯛幼魚(yú)急性毒性試驗(yàn)[，得出高效氯氰菊酯對(duì)籃點(diǎn)笛鯛的48-LC50為1.29×10-2mg/L。尹伊偉等開(kāi)展的擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥對(duì)水生生物的影響及其防護(hù)措施的研究中，高效氯氰菊酯對(duì)鯉魚(yú)的48h-LC50為7.4×10-4mg/L。王朝暉等開(kāi)展的擬除蟲(chóng)菊酯農(nóng)藥對(duì)水生態(tài)系統(tǒng)的生態(tài)毒理學(xué)研究綜述，高效氯氰菊酯對(duì)稀有鮈鯽的48h-LC50為3.24×10-3mg/L。趙于丁等研究的10種農(nóng)藥對(duì)斑馬魚(yú)的毒性與安全評(píng)價(jià),結(jié)果發(fā)現(xiàn)高效氯氰菊酯對(duì)斑馬魚(yú)（體長(zhǎng)：2～3cm)的48h-LC50為1.3847×10-3mg/L。比較而言，高效氯氰菊酯對(duì)麥穗魚(yú)水花苗的48h-LC50高于其他魚(yú)類，所以高效氯氰菊酯屬于敏感藥物。因此，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過(guò)程中，要特別注意高效氯氰菊酯的使用。

（通聯(lián)：564100，貴州省遵義市湄潭縣農(nóng)牧局水產(chǎn)工作站電話15286106168）