李 鑫，何雅林〔.通威股份有限公司畜禽研究所，四川成都60；.建明工業(yè)（珠海）有限公司，廣東珠海59040〕

枯草芽孢桿菌PB6 對(duì)肉雞產(chǎn)氣莢膜梭菌的控制效果研究

李 鑫1，何雅林2
〔1.通威股份有限公司畜禽研究所，四川成都610212；2.建明工業(yè)（珠海）有限公司，廣東珠海519040〕

本試驗(yàn)評(píng)估了枯草芽孢桿菌PB6替代恩拉霉素對(duì)肉雞產(chǎn)氣莢膜梭菌的控制效果，結(jié)果表明：與肉雞日糧中添加恩拉霉素相比，枯草芽孢桿菌PB6對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響不顯著，但可提高成活率；枯草芽孢桿菌PB6可顯著減輕肉雞產(chǎn)氣莢膜梭菌的感染程度。由此可見，枯草芽孢桿菌PB6可完全替代肉雞日糧中的抗生素。

產(chǎn)氣莢膜梭菌；肉雞；枯草芽孢桿菌PB6；生產(chǎn)性能

產(chǎn)氣莢膜梭菌是一種典型的致病梭菌，可遷移進(jìn)入小腸引起高烈度典型的壞死性腸炎；或持續(xù)惡化腸道微生態(tài)，引起低烈度的亞臨床梭菌感染，降低動(dòng)物的生產(chǎn)性能，造成動(dòng)物腸道生理及免疫損傷。當(dāng)前抗生素的耐藥性問題日趨嚴(yán)重，能否使用益生菌替代抗生素需要對(duì)益生菌制劑的使用效果做出明確的評(píng)估。“枯草芽孢桿菌PB6”是一株篩選自健康動(dòng)物體內(nèi)的枯草芽孢桿菌PB6菌株，其孢子能夠抵御高溫制粒，耐受酸及膽鹽的影響，能在腸道中定植，發(fā)揮抑制殺滅腸道有害菌的作用，尤其對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的抑制殺滅作用明顯。本試驗(yàn)旨在評(píng)估枯草芽孢桿菌PB6替代抗生素對(duì)肉雞生產(chǎn)性能及其糞便中產(chǎn)氣莢膜梭菌含量的影響。

1 材料與方法

1.1 益生菌制劑 益生菌制劑“枯草芽孢桿菌PB6”由建明工業(yè)（珠海）有限公司提供，有效成分為枯草芽孢桿菌PB6孢子，含量為2×1011cfu/kg。

1.2 試驗(yàn)動(dòng)物選擇與分組 在一商品肉雞場(chǎng)選用2000羽21日齡AA肉雞，根據(jù)體重隨機(jī)分為兩個(gè)處理組，每個(gè)處理5個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)200羽。試驗(yàn)1組為對(duì)照組，添加Smg/kg恩拉霉素；試驗(yàn)2組為試驗(yàn)組，添加150mg/kg枯草芽孢桿菌PB6。試驗(yàn)在某集團(tuán)商品肉雞場(chǎng)進(jìn)行，按照常規(guī)進(jìn)行日常管理與衛(wèi)生防疫，試驗(yàn)期21d。

1.3 檢測(cè)指標(biāo)與方法 試驗(yàn)期間觀察雞只健康狀況，統(tǒng)計(jì)死亡雞只；21d后稱重，統(tǒng)計(jì)采食量，計(jì)算日增重與料肉比；每個(gè)重復(fù)采集當(dāng)天新鮮糞便S份，每份5g左右，將每份糞樣混合用于檢測(cè)產(chǎn)氣莢膜梭菌。

1.4 數(shù)據(jù)處理 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS17.0中的單因素方差分析進(jìn)行處理，采用Duncan法進(jìn)行多重比較分析，結(jié)果以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 枯草芽孢桿菌PB6對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響 枯草芽孢桿菌PB6替代恩拉霉素使用對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響結(jié)果詳見表1。

表1 枯草芽孢桿菌PB6對(duì)肉雞生產(chǎn)性能的影響

從表1可見，兩個(gè)處理組肉雞的生產(chǎn)性能并無顯著差異，但枯草芽孢桿菌PB6組對(duì)成活率略有提高，表明用枯草芽孢桿菌PB6替代恩拉霉素對(duì)肉雞生產(chǎn)性能沒有顯著影響，反而可以改善雞只健康狀況，降低死亡率。

2.2 枯草芽孢桿菌PB6對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的影響 產(chǎn)氣莢膜梭菌采用試劑盒檢測(cè)，檢測(cè)試劑盒由建明工業(yè)（珠海）有限公司提供。其檢測(cè)原理為：糞便中的產(chǎn)氣莢膜梭菌可分解試劑盒培養(yǎng)基中的含硫化合物，產(chǎn)生硫化氫氣體，硫化氫遇到亞鐵離子可生成不溶性硫化亞鐵（黑色沉淀）。通過這種顯色反應(yīng)可初步判斷產(chǎn)氣莢膜梭菌量，進(jìn)一步推測(cè)機(jī)體大概的感染情況。顯色反應(yīng)判斷標(biāo)準(zhǔn)詳見表2。

兩個(gè)處理組的梭菌檢測(cè)結(jié)果詳見表3。從表3可知，肉雞日糧中添加Smg/kg恩拉霉素并不能很好地控制產(chǎn)氣莢膜梭菌感染，其重度感染和中度感染比例達(dá)到62.5%，機(jī)體腸道梭菌正常的雞只僅占12.5%。在使用150mg/kg枯草芽孢桿菌PB6 21d后，檢測(cè)未發(fā)現(xiàn)重度感染，僅發(fā)現(xiàn)10%中度感染，機(jī)體腸道梭菌正常的雞只占52.5%。

表2 產(chǎn)氣莢膜梭菌檢測(cè)判斷標(biāo)準(zhǔn)

表3 枯草芽孢桿菌PB6對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的影響羽

3 討論和結(jié)論

3.1 討論 隨著抗生素耐藥性的問題日趨嚴(yán)重，市場(chǎng)對(duì)抗生素替代品的需求日趨強(qiáng)烈。使用益生菌制劑替代抗生素是優(yōu)選方案之一，而判定益生菌制劑能否有效替代抗生素，需要從兩個(gè)關(guān)鍵角度對(duì)益生菌制劑作出明確的評(píng)估。一是益生菌要有明確的作用效果。有效的益生菌只有具備了同抗生素接近的抑菌效果，才有可能替代或部分替代抗生素；通過體外抑菌對(duì)比測(cè)試等方法，可以明確而又直觀地對(duì)比益生菌與抗生素之間以及不同益生菌之間對(duì)有害致病菌的抑制殺滅能力。二是要有合理的應(yīng)用方案。益生菌制劑的使用效果受其自身特性限制，需要克服高溫、飼料藥物添加劑、養(yǎng)殖用藥、飼料貯存環(huán)境、動(dòng)物胃酸和膽汁等的影響，才能穩(wěn)定地發(fā)揮作用，從而替代抗生素。

枯草芽孢桿菌PB6是一株篩選自健康動(dòng)物體內(nèi)的枯草芽孢PB6菌株，該菌株能夠分泌一類表面活性肽物質(zhì)，在活性多因子協(xié)同下，能特異性識(shí)別致病菌的細(xì)胞膜，通過在膜表面的打孔作用，使致病菌的細(xì)胞質(zhì)內(nèi)容物不斷流失泄漏，最終致其死亡。從本試驗(yàn)結(jié)果中也可以看出，枯草芽孢桿菌PB6對(duì)致病梭菌有較強(qiáng)的抑制作用，與恩拉霉素組（Smg/kg）相比，其重度、中度感染程度降低了50%以上，改善了雞群的健康狀況，降低了死亡率。

3.2 結(jié)論 本試驗(yàn)結(jié)果表明益生菌制劑在肉雞日糧中可完全替代抗生素。在肉雞日糧中添加150mg/kg枯草芽孢桿菌PB6與添加Smg/kg恩拉霉素相比，其生產(chǎn)性能無顯著差異，但前者可顯著降低雞群產(chǎn)氣莢膜梭菌的感染程度，改善雞群健康狀況，降低死亡率，效果優(yōu)于恩拉霉素。

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The Control Effect of Bacillus Subtilis PB6 Against Clostridium Perfringens on Chicken

LI Xin1，HE Ya1in2
〔1.Livestock and Pou1try Institute of Tongwei Co.Ltd.，Sichuan Chengdu 610212；2.Kemin Industries（Zhuhai）Co.Ltd.，Guangdong Zhuhai 519040，China〕

This experiment was designed to investigate the effect of Bacillus subtilis PB6 against Clostridium perfringens on chicken.The resu1ts showed that there was no significant difference on growth performance between the experimenta1 group and the contro1 group.However，the surviva1 rate was increased and the infected 1eve1 of Clostridium perfringens in feces was significant1y decreased after adding Bacillus subtilis PB6 into chicken＇s feed.It suggested that Bacillus subtilis PB6 can be used as the substitute of antibiotics in the chicken breeding.

Clostridium perfringens；Chicken；Bacillus subtilis PB6；Growth performance

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B 文章編號(hào)：1001-S964（2016）01-0030-03

2015-10-10

李鑫（19S1—），男，碩士研究生，中級(jí)畜牧師，通威股份畜禽研究所高級(jí)營養(yǎng)師，負(fù)責(zé)畜禽飼料的研發(fā)。