多合一真菌毒素免疫親和柱的制備及其應(yīng)用

楊婷婷 呂軼 張東升 唐曄 袁藝 張海濤 汪海峰

摘 要 以rProtein A-瓊脂糖凝膠為載體，同時偶聯(lián)抗黃曲霉素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（DON）單抗， 制備了AFB1-ZEN-DON三合一免疫親和柱，并對非特異性吸附、柱空白、柱容量、柱效及樣品加標(biāo)回收率等指標(biāo)進行評價。結(jié)果表明，0.25 mL膠對應(yīng)的柱容量分別為：AFB1 295 ng，ZEN 905 ng，DON 2342 ng；柱空白為0；rProtein A-瓊脂糖凝膠（0.25 mL膠）對3種毒素的非特異吸附率均低于8%，3種毒素不同濃度的平均柱回收分別為97.4%、98.0%和98.4%。通過優(yōu)化條件，選擇80%甲醇-水（80∶20， V/V）為提取溶劑，PBST稀釋； FAPAS質(zhì)控樣本經(jīng)不同批次三合一親和柱凈化后測定結(jié)果接近靶心值。制備的三合一免疫親和柱能滿足食品及飼料樣品的前處理，可替代常規(guī)單一親和柱，為多種毒素的一步富集、凈化、檢測奠定基礎(chǔ)。

關(guān)鍵詞 黃曲霉毒素B1； 玉米赤霉烯酮； 脫氧雪腐鐮刀菌烯醇； 定向偶聯(lián)； 免疫親和柱