王慶武　蘭玉菲　李秀梅　唐麗娜

摘要：對13個靈芝雜交菌株進行栽培試驗，綜合比較菌株菌絲生長速度、生物學(xué)效率、子實體形態(tài)特征、多糖和三萜含量等指標。結(jié)果表明，菌株4947、4930、4895適用于藥用菌栽培；菌株4911菌蓋最大（12.47 cm），菌蓋較厚，子實體色澤好，可用于制作盆景。

關(guān)鍵詞：靈芝；雜交菌株；生物學(xué)效率；子實體形態(tài)特征；多糖和三萜含量

中圖分類號：S567.3⁺10.37 文獻標識號：A 文章編號：1001—4942（2016）03—0070—03

靈芝（Ganoderma lingzhi）是我國中藥和傳統(tǒng)食療寶庫中的珍品，具有廣泛的藥理活性，具有抗腫瘤、降低血糖和血壓、消炎、利尿、益胃、提高機體免疫力等多種功效，市場反應(yīng)較好。隨著靈芝新藥用功效的不斷發(fā)現(xiàn)及其保健作用的突出，靈芝的需求量大幅增加。但隨著靈芝產(chǎn)業(yè)的不斷發(fā)展，其在生產(chǎn)相關(guān)研究方面的問題也層出不窮，例如：目前的主栽品種經(jīng)過不斷栽培使用容易發(fā)生退化，進而出現(xiàn)嚴重的減產(chǎn)、品質(zhì)下降現(xiàn)象；人們越來越期望主栽品種能同時集多個優(yōu)勢性狀之和，最大化地利用現(xiàn)有資源；另外，種問和品種問的不同、培育環(huán)境和條件的改變可能引起藥用成分在產(chǎn)量表達上的差異。為了解決制約靈芝產(chǎn)業(yè)發(fā)展的育種瓶頸問題，筆者通過原生質(zhì)體單核雜交育種技術(shù)，成功獲得13個雜交新菌株，并對獲得的雜交菌株進行栽培綜合評價，以期篩選出具有明顯雜交優(yōu)勢的新品種，豐富靈芝栽培種質(zhì)資源，提升靈芝栽培品質(zhì)。

1材料與方法

1.1供試菌株

泰安市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院選育的13個原生質(zhì)體單核雜交新菌株，對照為自主選育的國家認定品種泰山赤靈芝1號。

1.2培養(yǎng)基配方

棉籽殼38%、木屑30%、玉米芯20%、麥麩10%、石灰1%、石膏1%，含水量60%～65%，pH值6.0。

1.3原料處理

原料要求無霉變、潔凈。玉米芯暴曬后粉碎至大小0.5～1.0 cm。按照配方稱取原料。玉米芯較硬，提前2 d預(yù)濕，使其吸水軟化，預(yù)濕時加入石灰和石膏，玉米芯加水量為2.0 kg/kg干料。

1.4栽培方法

熟料栽培，采用規(guī)格為18 cm×39 cm×0.004 cm的聚丙烯栽培袋。機械裝袋，每袋裝干料0.571kg，保證每栽培袋裝料量一致；常壓蒸汽滅菌，100℃下保持12 h，再悶12 h；無菌條件下各品種、各栽培袋接種量一致。菇棚內(nèi)自然溫度出芝，發(fā)菌管理和出芝管理參照“靈芝定向出芝栽培技術(shù)規(guī)程”地方標準（DB3709/T 118-2014）和文獻[7、8]。出菇期只給水，不使用任何農(nóng)藥和添加劑。

1.5試驗設(shè)計

根據(jù)單因素隨機區(qū)組試驗原則，每個菌株設(shè)3個重復(fù)，每個重復(fù)50袋。試驗安排在同一菇棚內(nèi)，不同菌株隨機排列，設(shè)保護行。同一重復(fù)內(nèi)的同一管理措施必須在同一天內(nèi)完成，各重復(fù)的栽培管理條件與方法等均應(yīng)相同。

1.6有效成分的測定

參照文獻[9]，采用苯酚一硫酸法測定靈芝子實體多糖和三萜含量。

1.7評價項目

全程跟蹤調(diào)查記錄每個菌株每個重復(fù)的菌絲生長、出菇、產(chǎn)量等情況，檢測子實體有效成分含量，進行統(tǒng)計分析，綜合評價。

2結(jié)果與分析

2.1不同靈芝菌株菌絲生長比較

菌絲日長速、長勢、污染率等統(tǒng)計分析結(jié)果（表1）表明，不同靈芝菌株間菌絲日生長速度有顯著差異。菌株4909菌絲日生長速度最快，達0.85 cm，顯著高于菌株4947、4872、4911、4918、4914和CK，但六者間差異不顯著；除菌株4918和4907菌絲長勢較好外，其他菌株菌絲均濃密、健壯，長勢好；菌株4936污染率最低，僅為0.04%，表明其抗雜性強，其他菌株抗雜性均較強，但污染率也可能與接種時的人為因素有關(guān)。

2.2不同靈芝菌株生物學(xué)效率比較

菌株干芝生物學(xué)效率統(tǒng)計分析結(jié)果（表2）表明，不同靈芝菌株間生物學(xué)效率有顯著差異。菌株4914生物學(xué)效率最高，達10.34%，其次是菌株4947、CK、4930和4918，五者問差異不顯著；其它菌株均低于CK，且差異顯著。菌株4893、4907、4918、4947出芝污染率為0，菌株4911、4914次之，表明其抗雜性強，其他菌株出芝污染率與CK相當(dāng)或略高。

2.3不同靈芝菌株子實體形態(tài)特征及多糖、三萜含量比較

菌株子實體形態(tài)特征統(tǒng)計分析及多糖、三萜含量檢測結(jié)果（表3）表明，菌株子實體在菌蓋大小、厚度，菌柄長度、直徑，色澤，多糖、三萜含量等方面有顯著差異。菌株4911菌蓋最大，為12.47cm，菌株4909次之，二者差異不顯著，但顯著高于CK；除菌株4872和4921外，其他菌株菌蓋大小均與CK差異不顯著。菌株4909菌蓋最厚，為1.95 cm，菌株4911次之，二者差異不顯著，但顯著高于CK；除菌株4921外，其他菌株菌蓋厚度均與CK差異不顯著。菌株4872菌柄最長，為4.74em，菌株4921、4894、CK次之，四者差異不顯著，其他菌株菌柄長度均與CK差異顯著。菌株4911菌柄直徑最大，為2.82 cm，菌株4918、CK、4909、4893、49 14、4895、4930、4907、4894次之，十者差異不顯著，其他菌株菌柄直徑均與CK差異顯著。菌株菌蓋背面黃褐至紅褐色，腹面淺黃至深黃色，均與CK差異不顯著。菌株4894多糖含量最高，為1.74%，明顯高于CK；菌株4914多糖含量略低于CK，其他菌株多糖含量均高于CK。菌株4895三萜含量最高，為1.16%，菌株4909、4921次之，三者明顯高于CK；菌株4894三萜含量明顯低于CK，其他菌株三萜含量與CK相當(dāng)或略低。

3結(jié)論與討論

本試驗表明，菌株4947干芝生物學(xué)效率高（10.18%），子實體多糖含量較高（1.42%），三萜含量（0.93%）略高于CK，可用于藥用菌栽培；菌株4930干芝生物學(xué)效率（9.48%）與CK相當(dāng)，子實體多糖含量較高（1.28%），三萜含量（0.97%）略高于CK，也可用于藥用菌栽培；菌株4895干芝生物學(xué)效率（8.77%）略低于CK，但子實體多糖（1.23%）和三萜（1.16%）含量明顯高于CK，綜合子實體多糖和三萜含量均高于CK，也可用于藥用菌栽培；菌株4911菌蓋最大（12.47 cm），菌蓋較厚（1.69 cm），背面黃褐色，腹面黃色，可用于制作盆景。其他菌株可作為種質(zhì)資源保存。