劉書(shū)敏,馮小娟

(江蘇省連云港市東方醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇連云港 222042)

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·臨床研究·

246株尿培養(yǎng)病原菌的分布與耐藥性分析

劉書(shū)敏,馮小娟

(江蘇省連云港市東方醫(yī)院檢驗(yàn)科，江蘇連云港 222042)

摘要:目的分析該院2013年1月至2014年12月門診和住院泌尿系統(tǒng)感染患者尿培養(yǎng)中病原菌的分布及耐藥情況，為臨床合理選用抗菌藥物提供依據(jù)。方法采用Microscan auto SCAN-4 細(xì)菌鑒定和藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行菌株鑒定和藥敏試驗(yàn)，應(yīng)用WHONET 5．5軟件統(tǒng)計(jì)分析病原菌的分布及耐藥情況。結(jié)果594份中段尿培養(yǎng)標(biāo)本共分離病原菌246株，陽(yáng)性率為41.41%。其中革蘭陰性菌157株(63.82%)，革蘭陽(yáng)性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)。分離的革蘭陰性菌中,以大腸埃希菌最為常見(jiàn)；而在革蘭陽(yáng)性菌中以腸球菌屬為主，屎腸球菌最常見(jiàn)；真菌感染的數(shù)量亦明顯增加。結(jié)論革蘭陰性菌仍是泌尿系感染的主要病原菌，臨床醫(yī)生應(yīng)根據(jù)尿培養(yǎng)藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物，減少耐藥菌株產(chǎn)生。

關(guān)鍵詞:泌尿系統(tǒng)；尿培養(yǎng)；病原菌；藥敏試驗(yàn)；耐藥分析

泌尿系統(tǒng)感染是臨床最常見(jiàn)的感染性疾病之一。而尿培養(yǎng)是診斷泌尿系感染的最直接手段，隨著現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的快速發(fā)展，抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，耐藥菌株的不斷增多，使許多病原菌的耐藥性越來(lái)越高，給臨床治療帶來(lái)困難[1]。為掌握本院泌尿系統(tǒng)感染病原菌的分布及耐藥情況，為臨床醫(yī)生合理選用抗菌藥物提供依據(jù)，研究者對(duì)本院2013年1月1日至2014年12月31日送檢的594份尿標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)、鑒定和耐藥分析。現(xiàn)報(bào)道如下。

1材料與方法

1.1標(biāo)本來(lái)源收集本院2013年1月1日至2014年12月31日門診和住院泌尿系統(tǒng)感染患者送檢的尿培養(yǎng)標(biāo)本，包括中段尿和導(dǎo)尿等共594份，分離到病原菌246株。

1.2儀器與試劑應(yīng)用Microscan auto SCAN-4 細(xì)菌鑒定分析儀進(jìn)行菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)(PC33、NC50細(xì)菌鑒定藥敏板及配套試劑均購(gòu)自美國(guó)德靈公司)。血平板、麥康凱平板以及念珠菌顯色平板均購(gòu)自鄭州安圖生物工程有限公司。常用質(zhì)控菌株大腸埃希菌ATCC25922、銅綠假單胞菌ATCC27853、金黃色葡萄球菌ATCCATCC25923、糞腸球菌ATCC29212,均購(gòu)自衛(wèi)生部藥品鑒定所。藥敏紙片和藥敏培養(yǎng)基MH瓊脂均購(gòu)自杭州天和生物試劑有限公司。

1.3方法按全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程留取清潔中段尿標(biāo)本,采用10μL定量接種的方法，接種于血瓊脂平板、麥康凱平板以及念珠菌顯色平板上。置5%～10% CO235 ℃培養(yǎng)18～24 h，觀察菌落生長(zhǎng)情況，尿培養(yǎng)陽(yáng)性的標(biāo)準(zhǔn)是革蘭陰性菌大于105cfu/mL，革蘭陽(yáng)性菌大于104cfu/mL，同時(shí)去除相同患者重復(fù)分離的菌株，細(xì)菌培養(yǎng)及鑒定均按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》進(jìn)行[2]。

1.4細(xì)菌鑒定及藥敏試驗(yàn)應(yīng)用Microscan auto SCAN-4細(xì)菌鑒定分析儀進(jìn)行菌株鑒定及藥敏試驗(yàn)，嚴(yán)格按Microscan auto SCAN-4 細(xì)菌鑒定分析儀操作手冊(cè)進(jìn)行操作。陽(yáng)性菌株進(jìn)行革蘭染色、觸酶及氧化酶試驗(yàn)。觸酶陽(yáng)性的革蘭陽(yáng)性菌接種PC33鑒定藥敏板，革蘭陰性菌接種NC50鑒定藥敏板。35 ℃非CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)16～24 h。滴加相應(yīng)試劑后，放入AS-4細(xì)菌鑒定藥敏分析儀判讀結(jié)果。

1.5超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)的測(cè)定依據(jù)2013年CLSI M100 S23推薦的方法及標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行判讀,用頭孢噻肟(30 μg)和頭孢噻肟/克拉維酸(30/10 μg)、頭孢他啶(30 μg)和頭孢他啶/克拉維酸(30/10 μg)雙紙片確證法。結(jié)果以2個(gè)藥物中有任何一個(gè)，在加克拉維酸后，抑菌環(huán)直徑與不加克拉維酸的抑菌環(huán)相比，增大值大于或等于5 mm時(shí)，判定為產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)。

1.6統(tǒng)計(jì)學(xué)處理用世界衛(wèi)生組織細(xì)菌耐藥性監(jiān)測(cè)中心推薦的WHONET5.6軟件進(jìn)行菌株及耐藥性統(tǒng)計(jì)。

2結(jié)果

2.1菌株構(gòu)成594份中段尿培養(yǎng)標(biāo)本共分離病原菌246株，陽(yáng)性率為41.41%，與邵敏偉等[3]報(bào)道的42.8%相接近。其中檢出革蘭陰性菌157株(63.82%)，革蘭陽(yáng)性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)。革蘭陰性菌中,以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌最為多見(jiàn)；而在革蘭陽(yáng)性菌中以屎腸球菌和糞腸球菌為主，真菌以白色念珠菌和光滑念珠菌多見(jiàn)。泌尿道病原菌檢出前三位的細(xì)菌分別為大腸埃希菌，肺炎克雷伯菌，屎腸球菌，具體比率見(jiàn)表1。

表1　246株病原菌種類分布

2.2病原菌對(duì)抗菌藥物的耐藥率分離率前5位的革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌細(xì)菌藥敏試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表2。

表2　分離率在前5位的革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率(%)

續(xù)表2　分離率在前5位的革蘭陰性菌和革蘭陽(yáng)性菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率(%)

-：無(wú)數(shù)據(jù)。

2.3產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)細(xì)菌的檢出率共檢出ESBLs細(xì)菌61株，大腸埃希菌、肺炎克雷伯和變形桿菌中分別檢出ESBLs細(xì)菌57株、4株和0株，檢出率分別為60.0%、23.5%和0.0%。

3討論

泌尿系感染是常見(jiàn)的感染性疾病之一，近年來(lái)，隨著抗菌藥物的發(fā)展，以及抗菌藥物的廣泛應(yīng)用，泌尿系感染檢出的耐藥菌株也越來(lái)越多，發(fā)病率也明顯增高，其發(fā)病率僅次于呼吸道感染，占醫(yī)院感染的第2位[4]。

泌尿系感染的主要病原菌是革蘭陰性菌，尤以大腸埃希菌為最多。本次研究表明， 594份中段尿培養(yǎng)標(biāo)本共分離病原菌246株，陽(yáng)性率為41.41%。其中革蘭陰性菌157株(63.82%)，革蘭陽(yáng)性菌67株(27.24%)，真菌22株(8.94%)，與文獻(xiàn)報(bào)道相接近[5]。而檢出的革蘭陰性菌中,以大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌最為多見(jiàn)；而在革蘭陽(yáng)性菌中以屎腸球菌和糞腸球菌為主，真菌以白色念珠菌和光滑念珠菌多見(jiàn)。表1、2顯示，本次分析的尿培養(yǎng)標(biāo)本中共分離出95株大腸埃希菌，居各類病原菌的首位，其中產(chǎn)ESBL菌株者占60%。而產(chǎn)ESBL菌株對(duì)大多數(shù)抗菌藥物的耐藥性均高于非產(chǎn)ESBLs菌株。由表2可見(jiàn)，無(wú)論是產(chǎn)ESBLs還是非產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌及變形桿菌，它們對(duì)碳青霉烯類都高度敏感，敏感率均為100.0%，表明碳青酶烯類仍是治療腸桿菌科細(xì)菌最有效的抗菌藥物[6]。含酶抑制劑的抗菌藥物對(duì)大腸埃希菌也較敏感，耐藥率在15.0%左右。其次為阿米卡星和頭孢西丁，耐藥率分別在16.3%和18.6%。本次監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，大腸埃希菌對(duì)環(huán)丙沙星和左氧氟沙星的耐藥率分別達(dá)68.7%和63.8%，高于同類文獻(xiàn)報(bào)道的53.6%和52.4%[7]，可能與喹諾酮類藥物是廣譜抗菌藥物，因其不良反應(yīng)低，使用方便，臨床醫(yī)生在治療時(shí)使用頻率很高，不少患者也將其視作抗菌藥物中的“非處方藥”來(lái)使用有關(guān)，致使其耐藥性呈上升趨勢(shì)。因此，臨床醫(yī)生在治療大腸埃希菌引起的尿路感染時(shí)應(yīng)慎重且不宜將喹諾酮類藥物用作經(jīng)驗(yàn)用藥，應(yīng)根據(jù)尿培養(yǎng)的藥敏結(jié)果合理使用抗菌藥物。銅綠假單胞菌對(duì)多數(shù)抗菌藥物的耐藥率相對(duì)較低，多在20.0%～30.0%。本次監(jiān)測(cè)顯示在尿路感染病原菌中占第2位的是屎腸球菌，占12.26%，表明屎腸球菌是引起本地區(qū)尿路感染革蘭陽(yáng)性菌的主要細(xì)菌。屎腸球菌對(duì)青霉素類、喹諾酮類、紅霉素類的耐藥率均大于88.0%，喹奴普汀/達(dá)福普汀的耐藥率為10.3%，呋喃妥因的耐藥率為24.0%，未檢出耐萬(wàn)古霉素、達(dá)托霉素和利奈唑胺的腸球菌株，提示這3種藥物是治療泌尿系腸球菌感染的有效藥物。但因呋喃妥因的價(jià)格低廉且敏感性高的特點(diǎn)，經(jīng)驗(yàn)用藥可作為首選藥物[8]。此外，本次檢出真菌22株，占8.94%，這與長(zhǎng)期大量使用抗菌藥物，導(dǎo)致機(jī)體正常菌群失調(diào)有關(guān)。因此對(duì)免疫力低下的患者，和使用廣譜、高效抗菌藥物的患者應(yīng)注意是否出現(xiàn)真菌引起的二重感染。

綜上所述，本地區(qū)泌尿系感染病原菌以大腸埃希菌和屎腸球菌為主，且耐藥性已相當(dāng)嚴(yán)重，臨床醫(yī)生在對(duì)泌尿系感染患者使用抗菌藥物治療前，應(yīng)及時(shí)做尿細(xì)菌培養(yǎng)鑒定和藥物敏感試驗(yàn)，根據(jù)藥敏結(jié)果合理選用抗菌藥物，以達(dá)到良好的治療效果和減少耐藥菌株的產(chǎn)生。

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(收稿日期：2015-12-18)

DOI:10.3969/j.issn.1673-4130.2016.09.060

文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：1673-4130(2016)09-1282-04