景小金，田海蓉，曾秀玲，李濤，劉霞，張霞，王慧，李照偉，熊力

(貴州省動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550008)

2013—2015年貴州省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核結(jié)果分析

景小金，田海蓉*，曾秀玲，李濤，劉霞，張霞，王慧，李照偉，熊力

(貴州省動物疫病預防控制中心，貴州 貴陽 550008)

對2013—2015年由貴州省動物疫病預防控制中心組織實施市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作結(jié)果進行分析，參加比對考核的市級獸醫(yī)實驗室9個，占全省市級實驗室的100%(9/9)，參加比對考核的縣級獸醫(yī)實驗室60個，占全省縣級獸醫(yī)實驗室的68.2%(60/88)，全省比對考核的實驗室占市縣實驗室總數(shù)的71.1%(69/97)。比對考核實驗涉及ELISA、布病虎紅平板凝集試驗、RT－PCR和H5亞型－HI 4個檢測項目，均是當前動物疫病診斷與監(jiān)測的重要檢測方法，3年中ELISA、布病虎紅平板凝集試驗、RT－PCR、H5亞型－HI的正確率分別是92.8%、86.7%、84%、80.5%。表明本省市級實驗室基本掌握了血清學和病原學檢測，縣級實驗室也基本掌握了血清學檢測，但與全國省級實驗室檢測平均水平比較還有一定差距，需加強專項技能培訓與學習。

貴州省;市、縣獸醫(yī)實驗室;檢測能力;比對考核

獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室是指隸屬于各級獸醫(yī)主管部門，并承擔動物疫病診斷、監(jiān)測和檢測等任務的國家級區(qū)域獸醫(yī)實驗室、省級獸醫(yī)實驗室、地(市)級獸醫(yī)實驗室和縣(市)級獸醫(yī)實驗室。貴州省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室主要是指省、市、縣三級動物疫病預防控制中心獸醫(yī)實驗室。為了評估和提高各實驗室管理水平和檢測能力，2010年起至今，農(nóng)業(yè)部組織開展全國獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對考核工作，我省以實驗室檢測能力比對考核為契機，連年組織開展了市、縣級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核，了解和掌握全省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力和水平，深入分析查找不足，進一步完善實驗室質(zhì)量管理體系，完善實驗室能力建設長效機制，對于提高獸醫(yī)實驗室管理水平和檢測能力起到積極的推動作用，達到了預期效果。2013—2015年，全省組織開展獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對考核市級實驗室9個、縣級實驗室60個。檢測比對實驗主要是根據(jù)監(jiān)測任務需要的檢測方法為主，主要有CSF－ELISA、H5亞型－HI、PRV－gE－ELISA、FMDV－3ABC－ELISA、布病虎紅平板凝集試驗、HP－RRSV RT－PCR、H5－AIV熒光RT－PCR 7項實驗。

1 材料與方法

1.1 比對試驗名稱、所用試劑廠家、檢測依據(jù)為了避免試劑盒的差異，制備盲樣所用試劑盒和考核下發(fā)的試劑盒的廠家、型號、批號均相同。見表1。

1.2 比對樣品制備每年檢測4個項目，市、縣級獸醫(yī)實驗室各完成3個項目。每個比對項目設置5個檢測盲樣，其中3個陽性，2個陰性，每管的分裝量是單次試驗的4倍量。定性試驗處理到3個陽性狀態(tài):強陽、中陽、弱陽。盲樣均從試劑廠家直接購買標準陰性和陽性樣品，陽性樣品做適量梯度稀釋后分裝，陰性樣品直接分裝。各盲樣間數(shù)量與顏色眼觀無差異，統(tǒng)一編號，分包，制樣完畢。盲樣密閉低溫保存，及時分發(fā)到各靶實驗室。

2 結(jié)果

2.1 參加比對實驗室情況

2.1.1 市級實驗室:3年中參加比對考核市級實驗室9個，實現(xiàn)全省市級實驗室全覆蓋。

2.1.2 縣級實驗室:3年中參加比對考核縣級實驗室共有60個，占全省縣級實驗室的68%(60/88)。

2.2 2013—2015年參加比對的市、縣實驗室正確率比較2013—2015年，參加比對的縣級實驗室正確率分別是76.2%、61.5%、75.6%;參加比對的市級實驗室正確率分別是67%、78%、78%，市級實驗室的正確率略高于縣級實驗室。見表2。

表2 2013—2015年參加比對的市、縣實驗室正確率比較

2.3 不 同類型實驗結(jié)果比較ELISA是目前血清學試驗最常用的檢測方法，也是市、縣兩級獸醫(yī)實驗室做得最多的實驗，故正確率最高，為92.80%;RTPCR、布病虎紅平板凝集試驗正確率均小于90%，有待提高檢測能力與水平;H5亞型－HI是定量試驗，影響結(jié)果因素較多，結(jié)果判定主觀性較強，實驗員較難掌握，正確率最小，僅為80.5%。見圖1。

圖1 2013—2015年比對考核4種檢測項目正確率比較

2.4 全省9個地區(qū)比對考核實驗室在ELISA、H5亞型－HI和RT－PCR 3個檢測項目上比較從ELISA來比較，黔南州、安順和銅仁的正確率為100%，正確率最低的是畢節(jié)，僅有81%，其次是黔東南，正確率是89.3%。從H5亞型－HI比較，銅仁的正確率為100%，黔南州和安順正確率大于90%，畢節(jié)的正確率在83.3%，其它5個地區(qū)的正確率均低于80%。從RT－PCR比較，黔南、安順、畢節(jié)、貴陽、黔西南和六盤水的正確率均為100%，6個地級實驗室具備了RTPCR的檢測水平，完全有能力開展相關核酸檢測工作;黔東南的正確率為67%，銅仁的正確率為33%，3個比對考核失誤了2次;遵義3年比對考核，因儀器原因，只有2015年參加了RT－PCR，結(jié)果錯誤，因此正確率為0。從布病虎紅平板檢測比較，黔南、安順、貴陽、黔西南、六盤水和遵義地區(qū)的正確率均為100%，畢節(jié)和銅仁的正確率為66.7%，黔東南的正確率最低，只有50%。從4個檢測項目綜合成績來看，黔南和安順整體檢測水平較高。見表3。

表3 2013—2015年貴州省9個地區(qū)實驗室4個檢測項目正確率比較%

表12013 —2015年檢測項目、試劑生產(chǎn)廠家、檢測依據(jù)

3 討論

3.1 高致病性禽流感、口蹄疫、豬瘟、高致病性豬藍耳病均是國家重大動物疫病，也是國家實行強制動物免疫的病種。血清學檢驗是檢測動物免疫抗體水平、檢驗免疫效果和評價疫苗的有效方法，當前最常用的是ELISA、HI和平板凝集試驗。病原學檢測是診斷動物疫病，找出病原的重要手段，RT－PCR是國標規(guī)定的診斷方法，其敏感性和特異性高，用時少，是病原學檢測的首選。

3.2 2013—2015年3年中共涉及ELISA、H5亞型－HI、RT－PCR、平板凝集4類實驗方法，與2013—2014年農(nóng)業(yè)部組織的全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果比較:本省地、縣實驗室ELISA、H5亞型－HI、RT－PCR實驗室正確率分別為92.8%、80.5%和84%，全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果中ELISA、H5亞型－HI、RT－PCR實驗室正確率分別為100%(32/32)、94%(30/32)和98%(123/126)［1，2］，3項結(jié)果明顯高于貴州省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室正確率，說明貴州省市、縣實驗室的檢測水平還有待提高。

3.3 2013—2015年3年中縣級實驗室比對結(jié)果比較:3個項目比對全部正確的市級實驗室百分率分別為67%、78%、78%，總體正確率略高于縣級實驗室，縣級實驗室正確率分別為76.2%、61.5%、75.6%。

3.4 ELISA和H5亞型－HI是3年均考核的項目，ELISA檢測項目的正確率是92.8%，是檢測項目中正確率最高的;其次是布病虎紅平板凝集試驗正確率86.7%，RT－PCR正確率84%，H5亞型－HI正確率80.5%。從本組數(shù)據(jù)來看，市級實驗室的RT－PCR的檢測綜合水平不是很理想，需加強核酸檢測技術的培訓。H5亞型－HI是一個定量的試驗，主觀與客觀影響結(jié)果因素多，在全省范圍內(nèi)盡量統(tǒng)一實驗操作用品與實驗條件，有助于提高結(jié)果統(tǒng)一性。布病虎紅平板凝集試驗是2014年本省首次考核項目，正確率為86.7%，略低于2013年全國省級獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對中省級實驗室正確率87%［1］。隨著近年來布病疫情呈現(xiàn)上升趨勢，布病虎紅平板凝集試驗是目前檢測布病快速有效的方法，對于基層實驗室很適用，建議進一步加強推廣使用。

3.5 從2013—2015年貴州省9個地區(qū)實驗室4個檢測項目正確率比較結(jié)果來看，畢節(jié)和黔東南地區(qū)實驗室要加強ELISA的檢測能力;貴陽、黔西南、六盤水、畢節(jié)、黔東南和遵義6個地區(qū)實驗室要加強H5亞型－HI的檢測能力;銅仁、黔東面和遵義地區(qū)實驗室要加強RT－PCR的檢測能力;畢節(jié)、銅仁和黔東南地區(qū)實驗室要加強布病虎紅平板試驗的檢測能力。

3.6 通過以上對貴州省3年來獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作的綜合分析，獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作很有必要性，達到了預期目標，整體推動了全省獸醫(yī)實驗室檢測工作的開展和能力提高。各實驗室發(fā)現(xiàn)問題及時處理，有的放矢地完善實驗室管理，取長補短，不斷進步。特別是某些經(jīng)濟較落后、地理位置較偏遠的少部分縣級實驗室，從考核前不重視實驗室建設，沒有固定實驗人員狀況，通過考核，加強了獸醫(yī)實驗室的建設，并配備實驗室專業(yè)人員。同時，開展獸醫(yī)實驗室檢測能力比對，是評價獸醫(yī)實驗室檢測技術水平的重要手段，也是加強獸醫(yī)實驗室質(zhì)量控制的有效方法［3］。盡管當前貴州省市、縣兩級獸醫(yī)實驗室檢測能力與省級獸醫(yī)實驗室檢測水平還有一定差距，省動物疫病預防控制中心要多開展實驗室檢測專項技能培訓，繼續(xù)開展全省各級獸醫(yī)實驗室檢測能力比對考核工作，使全省獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室成為動物疫病預防控制工作戰(zhàn)線上過硬的檢測隊伍。

［1］劉偉，張劭俁，董昕欣，等.2013年全國省級醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果分析［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2013，49(10):91－94.

［2］董昕欣，劉偉，邴國霞，等.2014年全國省級醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對結(jié)果分析［J］.中國畜牧獸醫(yī)，2014，50(10):101－103.

［3］王文，張繼紅，蘭玲，等.2010年新疆獸醫(yī)系統(tǒng)實驗室檢測能力比對試驗的探討與建議［J］.中國動物檢疫，2011，28(9):19－21.

S851.34

B

1007－1474(2016)05－0030－03

2016－07－12

景小金(1981—)，男，獸醫(yī)師，主要從事動物疫病防控工作。

*通訊作者