大粒車前子苯乙醇苷提取物的精制及降血尿酸作用

皮璟漁,蘇　昱,李　婭,羅　成,鄒　彬,萬　茵,*,謝明勇

(1.南昌大學(xué),食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江西南昌 330047;2.南昌大學(xué)食品學(xué)院,江西南昌 330031;3.江西省藥物研究所,江西南昌 330029)

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大粒車前子苯乙醇苷提取物的精制及降血尿酸作用

皮璟漁1,2,3,蘇昱1,2,李婭1,2,羅成1,2,鄒彬1,2,萬茵1,2,*,謝明勇1,*

(1.南昌大學(xué),食品科學(xué)與技術(shù)國家重點實驗室,江西南昌 330047;2.南昌大學(xué)食品學(xué)院,江西南昌 330031;3.江西省藥物研究所,江西南昌 330029)

研究了大孔吸附樹脂對大粒車前子苯乙醇苷粗提物的富集純化效果，并探討了苯乙醇苷精制物調(diào)節(jié)高尿酸血癥大鼠的血尿酸水平的作用。經(jīng)過比較HPD400、HPD400A等9種樹脂苯乙醇苷的吸附解吸效果,最終選擇HPD400A樹脂來精制苯乙醇苷提取物。當(dāng)層析樹脂柱徑高為1.00 cm×33.50 cm時,優(yōu)化后的富集純化條件為:粗提物上樣液質(zhì)量濃度為10.3 mg/mL,吸附流速為2.7 mL/min,解吸流速為3.5 mL/min,解吸劑為30%乙醇水溶液,解吸劑體積為400 mL。從500 g車前子原料中可得到總苯乙醇苷含量達(dá)80%的精制物3.07 g,得率為0.61%。經(jīng)大鼠經(jīng)口給藥實驗表明,苯乙醇苷粗提物和精制物均能顯著降低血尿酸水平和黃嘌呤氧化酶活性,且與模型組相比差異顯著(p<0.01)。

大粒車前子,苯乙醇苷類,大孔吸附樹脂,純化,血尿酸水平

長期嘌呤代謝紊亂或尿酸排泄減少會導(dǎo)致血中尿酸增高并在體內(nèi)關(guān)節(jié)等處形成尿酸鹽沉積,當(dāng)血清尿酸值≥416 μmol/L,則稱為高尿酸血癥(Hyperuricemia),嚴(yán)重者即引起痛風(fēng)。治療高尿酸血癥一般采用促進(jìn)尿酸排泄和抑制尿酸合成這兩條途徑,但是目前臨床用藥多數(shù)毒副作用強,對人體機能損傷較大。因此從安全的保健植物資源中分離獲得天然功效成分,對于開發(fā)預(yù)防高尿酸血癥和痛風(fēng)的保健食品、篩選高尿酸血癥和痛風(fēng)患者的輔助治療膳食具有重大意義。

大粒車前子為車前科(Plantaginaceae)車前屬(generaPlantago)植物大粒車前(PlantagoasiaticaL.)的干燥成熟種子,《神農(nóng)本草經(jīng)》將其記載為藥用上品,且是國家衛(wèi)生部認(rèn)可的可用于保健食品物品。相關(guān)文獻(xiàn)表明,車前草醇提物可明顯降低急性高尿酸血癥小鼠的血尿酸水平[1],車前子水煎液可明顯降低高尿酸大鼠的血尿酸水平[2],并探討了車前子醇提物對高尿酸血癥小鼠血清尿酸水平的影響及降尿酸的作用機制[3],但均未明確指出其中降血尿酸的有效成分為何種物質(zhì)。

苯乙醇苷類化合物(Phenylethanoid glycosides)是車前子中活性化合物,是由苯乙醇基與?；鶊F(tuán)或單糖結(jié)合到糖苷上所形成,具有免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗炎、抗病毒、抗誘變、抗菌、抗腫瘤、增強記憶、抗血小板、保肝強心等生物特性[4-7]。據(jù)報道車前的種子中含有大車前苷、異大車前苷、類葉升麻苷、異類葉升麻苷、去鼠李糖類葉升麻苷、地黃苷、毛蕊花苷及其異構(gòu)體等苯乙醇苷類[8]。本實驗室利用制備液相色譜從大粒車前子中分離得到類葉升麻苷和異類葉升麻苷,并建立了RP-HPLC法同時檢測車前子中這兩種物質(zhì)的方法[9]。

大孔樹脂對有機質(zhì)有較好的選擇性,在濃縮、分離過程中不受無機鹽、強離子小分子化合物的干擾,且理化性質(zhì)穩(wěn)定,在酸、堿及有機溶劑中不溶解。所以大孔樹脂常用于分離皂苷類、黃酮類、苯乙醇苷類物質(zhì),而且分離效果較好。在顧家琿等[10]的研究中,DA-201樹脂對肉蓯蓉中苯乙醇苷純化后,其純度為51.2%;相似的結(jié)果也出現(xiàn)在邱建國等[11]的研究中,用XDA-1樹脂純化獨一味水提物后,得到苯乙醇苷的含量為56.56%。

本實驗以富集車前子苯乙醇苷為目的,從多種樹脂中篩選出最合適的大孔吸附樹脂,優(yōu)化純化工藝條件,得到苯乙醇苷精制物,通過評價血清尿酸(SUA)、血清肌酐(SCr)、血尿素氮(BUN)和肝臟黃嘌呤氧化酶活性(XOD)等生理指標(biāo),探討大粒車前子來源的苯乙醇苷類物質(zhì)對高尿酸血癥型大鼠的作用效果和機制。

1　材料與方法

1.1材料與儀器

大粒車前子購自江西省吉安地區(qū),經(jīng)南昌大學(xué)付桂明教授鑒定為大粒車前子(Seeds ofPlantagoasiaticaL.);雄性SD大鼠35只,體重200～220 g,湖南斯萊克景達(dá)實驗動物有限公司提供,合格證號:SCXK(湘)2009-0004;毛蕊花苷標(biāo)準(zhǔn)品中國藥品生物制品檢定所;大孔吸附樹脂HPD100、HPD100A、HPD400、HPD400A、HPD720、BEHP-2滄州寶恩化工有限公司;大孔吸附樹脂AB-8南開大學(xué)樹脂廠;大孔吸附樹脂NKA-2、NKA-9天津市海光化工有限公司;氧嗪酸鉀鹽Sigma-Aldrich公司;98%別嘌呤醇上海晶純試劑有限公司;尿酸(SUA)、尿素氮(BUN)、肌酐(SCr)和黃嘌呤氧化酶(XOD)試劑盒南京建成生物工程研究所;肝素鈉上海晶純試劑有限公司;甲醇色譜純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司;其他試劑均為國產(chǎn)分析純,天津市永大化學(xué)試劑有限公司。

Agilent 1290液相色譜儀美國Agilent公司;UV-7504單光束紫外-可見分光光度計上海精科實業(yè)有限公司;TU-1900雙光束紫外分光光度計北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;RE-52旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上海亞榮生化儀器廠;PY-150S-11數(shù)控?fù)u床匯城科技生物公司;FD-1D-50型真空冷凍干燥機北京博醫(yī)康醫(yī)療器械有限公司;DFY-500搖擺式高速萬能粉碎機溫嶺市林大機械有限公司;HL-2D恒流泵上海青浦滬西儀器廠。

1.2實驗方法

1.2.1苯乙醇苷粗提液的制備精密稱取5 g粉碎后的車前子粉末置于圓底燒瓶內(nèi),加入70%乙醇溶液進(jìn)行超聲提取(溫度58 ℃,液料比26 mL/g,超聲時間34 min,功率200 W),過濾,濾液減壓濃縮至100 mL。

1.2.2苯乙醇苷含量的檢測采用毛蕊花苷為標(biāo)準(zhǔn)品繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。精密稱取10 mg毛蕊花苷標(biāo)準(zhǔn)品于10 mL容量瓶內(nèi),用色譜級甲醇稀釋至刻度,搖勻,得到濃度為1.0 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。然后依次吸取1.0、2.0、2.5、3.0 mL于4個10 mL容量瓶,定容,得到濃度分別為0.10、0.20、0.25、0.30 mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液。分別吸取此系列標(biāo)準(zhǔn)液各400 μL,依次加入0.5 mol/L鹽酸溶液2 mL、10%亞硝酸鈉溶液0.4 mL、10%鉬酸鈉溶液1.6 mL和2 mol/L氫氧化鈉溶液2 mL,蒸餾水定容至10 mL,搖勻,靜置,顯色10 min后在525 nm下讀取吸光度值并以吸光度值為縱坐標(biāo)、毛蕊花苷濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線[12]。得到線性方程為A=1.0918 C-0.0582(R2=0.9991),當(dāng)毛蕊花苷質(zhì)量濃度在0.1～1.0 mg/mL范圍內(nèi)質(zhì)量濃度與吸光度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

將標(biāo)準(zhǔn)溶液替換為粗提液,按上述步驟可測得粗提液吸光度,利用回歸方程計算粗提液中苯乙醇苷的含量。

1.2.3樹脂的選擇

1.2.3.1吸附量的測定稱取經(jīng)預(yù)處理的樹脂各1 g于250 mL具塞三角瓶中,加入稀釋后的苯乙醇苷粗提液50 mL(總苯乙醇苷含量C0為23.50 μg/mL),置于恒溫?fù)u床中,在25 ℃、120 r/min的條件下均勻吸附24 h,過濾,定容至50 mL,測定苯乙醇苷的濃度C1,計算吸附量Q1和吸附率:

Q1=(C0-C1)×50

式(1)

吸附率(%)=(C0-C1)/C0×100

式(2)

1.2.3.2解吸率的測定上述吸附飽和的各種樹脂,分別投入50 mL 80%乙醇溶液中,在25 ℃、120 r/min的條件下振搖24 h,過濾,測定解吸液中苯乙醇苷的濃度C2和體積V2計算解吸率:

解吸率(%)=(C2×V2)/Q1×100

式(3)

1.2.3.3靜態(tài)動力學(xué)吸附曲線的繪制選取吸附解吸效果最佳的樹脂,上樣后測定樹脂在1、2、3、4、5、6、24 h時的吸附率,以時間為橫坐標(biāo)、吸附率為縱坐標(biāo)作圖,得到靜態(tài)動力吸附曲線。

1.2.4樹脂富集純化條件優(yōu)化

1.2.4.1上樣液濃度的選擇大孔吸附樹脂裝柱(層析柱徑高為1.0 cm×33.5 cm),以2.7 mL/min的吸附流速分別上質(zhì)量濃度為5.0、7.7、10.3、13.3 mg/mL的苯乙醇苷粗提液50 mL,采用1.2.2方法測定流出液中剩余的苯乙醇苷的含量,比較吸附率。

1.2.4.2吸附流速的選擇分別以2.0、2.7、3.5、4.2 mL/min的吸附流速上樣,上樣體積為50 mL,質(zhì)量濃度為10.3 mg/mL,測定流出液中剩余的苯乙醇苷的含量,比較吸附率。

1.2.4.3解吸劑的選擇苯乙醇苷粗提液質(zhì)量濃度10.3 mg/mL,上樣體積50 mL,上樣流速2.7 mL/min,上樣后靜置1 h以吸附完全,用蒸餾水洗脫雜質(zhì)后,分別用10%、30%、50%、100%的乙醇水溶液進(jìn)行洗脫,測定各洗脫液中的苯乙醇苷含量,比較解吸率。

1.2.4.4解吸流速的選擇上質(zhì)量濃度為10.3 mL/g苯乙醇苷粗提液50 mL,上樣流速2.7 mL/min,上樣后靜置1 h待樹脂吸附完全后,用蒸餾水洗脫雜質(zhì),選用30%乙醇水溶液分別以2.0、2.7、3.5、4.2 mL/min的流速洗脫,測定各洗脫液中苯乙醇苷的含量,比較解吸率。

1.2.4.5苯乙醇苷洗脫曲線的繪制以2.7 mL/min的流速上10.3 mg/mL苯乙醇苷粗提液50 mL的樣品,靜置吸附1 h后,蒸餾水洗脫雜質(zhì),然后用30%乙醇溶液進(jìn)行洗脫,按10 mL/管收集洗脫液,采用超高效液相色譜法測定每管洗脫液中苯乙醇苷的含量,繪制洗脫曲線。

例2 取ag某物質(zhì)在氧氣中完全燃燒,將其產(chǎn)物跟足量的過氧化鈉固體完全反應(yīng),反應(yīng)后固體的質(zhì)量恰好也增加了ag。下列物質(zhì)中不能滿足上述結(jié)果的是( )。

1.2.4.6苯乙醇苷純化后的檢測收集苯乙醇苷洗脫液,55 ℃旋蒸除醇,凍干,得到粉末狀苯乙醇苷精制物。取適量用水溶解,用超高效液相色譜儀檢測純度,色譜條件:Agilent 1290+DAD,Agilent C18(10 mm×1.8 mm)色譜柱,柱溫25 ℃,流動相:A(甲醇),B(超純水),梯度洗脫條件:0 min,A∶B為20%∶80%;3 min,A∶B為30%∶70%;4 min,A∶B為40%∶60%;流速0.20 mL/min,進(jìn)樣量1 μL,壓力260 bar,檢測波長330 nm。

1.2.5動物實驗

1.2.5.1實驗分組及給藥方法SD大鼠購入后,經(jīng)7 d適應(yīng)期,再按體重隨機分為7組,每組5只,分別為正常對照組、模型組、別嘌呤醇組、苯乙醇苷精制物低劑量組、苯乙醇苷精制物高劑量組、苯乙醇苷粗提物低劑量組、苯乙醇苷粗提物高劑量組。實驗期內(nèi),正常對照組和模型組用蒸餾水灌胃,別嘌呤醇組按照10 mg/kg體重進(jìn)行灌胃,精制物低劑量組和粗提物低劑量組按照每千克大鼠體重用18 mg提取物,即按照18 mg/kg體重進(jìn)行灌胃,精制物高劑量組和粗提物高劑量組按照每千克大鼠體重用54 mg提取物,即按照54 mg/kg體重進(jìn)行灌胃,每日一次,連續(xù)10 d。

1.2.5.2誘導(dǎo)模型各組大鼠喂養(yǎng)10 d,于第10 d,除正常對照組外,其余各組在灌胃前1 h用濃度1.50 g/100 mL的氧嗪酸鉀按300 mg/kg體重一次性腹腔注射,誘導(dǎo)建立高尿酸血癥模型。

1.2.5.3指標(biāo)測定建模1 h后,各大鼠按1.2.5.1灌胃給藥,再過1 h后,摘取眼球取血,離心分離分別獲取血清和血漿。取完血后,脫頸處死大鼠,取肝臟,按試劑盒說明測定血清尿酸(SUA)、血清尿素氮(BUN)、血清肌酐(SCr)和肝臟黃嘌呤氧化酶(XOD)活性指標(biāo)。

1.3數(shù)據(jù)處理

實驗所得數(shù)據(jù)均采用SPSS 19.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行單因素方差分析,Origin Pro 8對數(shù)據(jù)進(jìn)行處理分析及圖表繪制。

2　結(jié)果與討論

2.1靜態(tài)吸附實驗篩選樹脂

2.2HPD400A靜態(tài)吸附曲線

從圖1可知,HPD400A對苯乙醇苷的吸附在2 h內(nèi)即達(dá)近80%的吸附率,而后隨時間延長,吸附率上升緩慢,屬于快吸附型。

2.3樹脂精制條件優(yōu)化

2.3.1上樣液質(zhì)量濃度的選擇由圖2可知,上樣液質(zhì)量濃度在10.3 mg/mL及以下時,吸附率均接近100%,其中以7.7 mg/mL的吸附率最大達(dá)到99.90%,表明此濃度范圍是在HPD400A的承載吸附量內(nèi)。另一方面,隨著上樣液質(zhì)量濃度的升高,樣品的吸附量也隨之增加。當(dāng)上樣液質(zhì)量濃度在13.3 mg/mL時,吸附率出現(xiàn)很明顯的下滑,這是因為上樣液的苯乙醇苷含量大于樹脂的吸附飽和度,這樣不僅會造成大量上樣液的浪費,還會造成樹脂的再生困難的問題。為了讓樹脂能更加充分的吸收更多的提取液,綜合考慮吸附量與吸附率兩個因素,故選擇上樣液的質(zhì)量濃度為10.3 mg/mL。

表1　各種樹脂的性質(zhì)及其對苯乙醇苷的吸附解吸性能

圖1　HPD400A樹脂對苯乙醇苷靜態(tài)動力學(xué)吸附曲線Fig.1　Dynamic adsorption curve of HPD400A on phenylethanoid glycosides

圖2　上樣液的質(zhì)量濃度對吸附率的影響　Fig.2　Effect of the concentration of the extract fluid on the adsorption rate

2.3.2吸附流速的選擇從圖3可知,吸附流速對苯乙醇苷的吸附率影響頗大。當(dāng)流速控制在2.7 mL/min以內(nèi)時,HPD400A能充分吸附苯乙醇苷,而當(dāng)流速增加到2.7 mL/min及以上時,由于流速過快,上樣液中的苯乙醇苷物質(zhì)來不及被樹脂吸附就流出柱子,導(dǎo)致吸附率顯著下降。2.0 mL/min與2.7 mL/min相比,兩者的吸附率相差不大,但是時間卻延長很多,從時間效率綜合因素考慮,為有利于工廠化生產(chǎn),選擇2.7 mL/min為最佳吸附流速。

圖3　吸附流速對吸附率的影響Fig.3　Effect of adsorption flow rate on the adsorption ratio

2.3.3解吸劑的選擇結(jié)果見表2。10%乙醇能洗下半數(shù)以上被吸附的苯乙醇苷,30%乙醇水溶液能洗脫下約90%的苯乙醇苷,繼續(xù)提高乙醇濃度對苯乙醇苷洗脫率的提高幫助不大,且增加成本,還會洗脫下被樹脂吸附的黃酮類等其他酚類物質(zhì),影響苯乙醇苷在精制物中的純度。為達(dá)到較高的苯乙醇苷得率又節(jié)約成本的目的,故選用30%乙醇水溶液為解吸劑。

表2　解吸劑對解吸率的影響

2.3.4解吸流速的選擇從圖4可知,解吸流速從2.0 mL/min升高到3.5 mL/min時,解吸率逐漸增加,表明適當(dāng)增加流速可以加大解吸率,同時還可防止因解吸時間過長而洗脫出更多的雜質(zhì),既節(jié)約時間又提高效率。而當(dāng)流速為4.2 mL/min時,又因流速過快導(dǎo)致解吸不夠完全,解吸率略下降。綜合比較,選擇3.5 mL/min為最佳解吸流速。

圖4　解吸流速對解吸率的影響Fig.4　Effect of desorption flow rate on the desorption rate

2.3.5苯乙醇苷洗脫曲線由圖5可知,苯乙醇苷出峰迅速,峰型尖窄,洗脫液體積在200 mL時就已經(jīng)解吸出絕大部分苯乙醇苷,400 mL以后,洗脫液中苯乙醇苷的含量趨向平穩(wěn)且接近零。為盡可能得到更多的苯乙醇苷又不浪費試劑,30%乙醇水溶液的適宜用量為400 mL。

圖5　苯乙醇苷洗脫曲線Fig.5　The elution curve of phenylethanoid glycosides

表3　樣品對高尿酸血癥大鼠各個生理指標(biāo)的影響(n=5)

注:Δ表示與正常組相比差異顯著,p<0.05;ΔΔ表示與正常組相比差異極顯著,p<0.01;*表示與模型組相比差異顯著,p<0.05;**表示與模型組相比差異極顯著,p<0.01。

2.3.6苯乙醇苷精制物及毛蕊花苷的液相譜圖大粒車前子原料500 g,超聲提取得到車前子提取液100 mL,提取液經(jīng)HPD400A在上述優(yōu)化條件下處理,得到苯乙醇苷精制物3.07 g,得率為0.61%。比較精制物和毛蕊花苷標(biāo)準(zhǔn)品的UPLC譜圖(圖6),精制物組分最高峰的保留時間和紫外吸收光譜與毛蕊花苷標(biāo)準(zhǔn)品基本一致,330 nm下峰面積比為80%;可以推斷苯乙醇苷精制物的主要成分為毛蕊花苷。

圖6　苯乙醇苷精制物和毛蕊花苷標(biāo)準(zhǔn)品的超高效液相色譜圖Fig.6　UPLC spectra of phenylethanoid glycosides and acteoside reference substance

2.4動物實驗結(jié)果

各實驗動物組的指標(biāo)檢測結(jié)果如表3所示,模型組動物的血清SUA濃度、血清SCr濃度、血清BUN濃度、肝臟XOD活性一直維持在較高水平,與正常對照組相比,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(p<0.01),表明用氧嗪酸鉀誘導(dǎo)建立模型成功。

表3數(shù)據(jù)表明,苯乙醇苷粗提物和精制物均可有效降低血SUA、BUN和肝XOD活性(p<0.01),且能有效降低血SCr水平,說明苯乙醇苷類物質(zhì)能在降低血尿酸的同時又起到對腎臟的保護(hù)作用,作用途徑可能是促進(jìn)尿酸排泄和抑制尿酸生成,是車前子中降血尿酸水平的主要有效成分。精制物組降血尿酸的效果好于粗提物組,但粗提物組BUN水平低于精制物組,推測或許有車前子其他成分參與了降低BUN水平的作用。

別嘌呤醇組血SCr水平與模型組基本一致,說明給予別嘌呤醇不能明顯恢復(fù)損傷的腎臟;而尿酸水平顯著低于正常組,尿酸具有一定的抗氧化能力[17],特別是抑制DNA損傷的能力,過低的血尿酸水平可能會導(dǎo)致反效果。

3　結(jié)論

對大孔吸附樹脂純化苯乙醇苷的樹脂類型、上樣液質(zhì)量濃度、吸附流速、解吸液乙醇濃度、解吸流速等影響因素進(jìn)行了研究,確定了苯乙醇苷粗提物的最佳精制工藝條件:最佳大孔吸附樹脂類型是HPD400A,層析樹脂柱徑高為1.00 cm×33.50 cm時,上樣液質(zhì)量濃度為10.3 mg/mL(上樣體積為50 mL),吸附流速為2.7 mL/min,解吸劑為30%乙醇水溶液,解吸流速為3.5 mL/min,解吸劑體積為400 mL。大粒車前子500 g經(jīng)超聲提取、HPD400A大孔吸附樹脂吸附純化、真空冷凍干燥,最后得到苯乙醇苷精制物3.07 g,得率為0.61%,經(jīng)超高效液相檢測330 nm下毛蕊花苷的峰面積比約為80%。苯乙醇苷粗提物和精制物均可有效降低SUA水平和XOD活性水平,顯示了苯乙醇苷類物質(zhì)在預(yù)防治療高尿酸血癥上的潛在前景。

車前子具有利尿消炎、改善腎功能的作用,利尿能促進(jìn)尿酸排泄,抗炎消腫可以抑制尿酸結(jié)晶的炎癥反應(yīng)過程,因此,從車前子中提取苯乙醇苷對提供有效的高尿酸血癥治療方案和膳食輔助治療手段具有重要意義。

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Purification and serum uric acid level reducing effect of phenylethanoid glycosides extract from seeds ofPlantagoasiaticaL.

PI Jing-yu1,2,3,SU Yu1,2,LI Ya1,2,LUO Cheng1,2,ZOU Bin1,2,WAN Yin1,2,*,XIE Ming-yong1,*

(1.State Key Laboratory of Food Science and Technology,Nanchang University,Nanchang 330047,China;2.Food College of Nanchang University,Nanchang 330031,China;3.Jiangxi Institute of Pharmaceutical Research,Nanchang 330029,China)

Crude extract of phenylethanoid glycosides from seeds ofPlantagoasiaticaL. was enriched and purified by macroporous adsorption resins and the effect of refined phenylethanoid glycosides on serum uric acid level in hyperuricemic rats was explored. Resin HPD400A was selected as the refining resin by comparing the adsorption and desorption effect of 9 kinds of macroporous resin on phenylethanoid glycosides. When the column diameter and height of chromatography resin was 1.00 cm×33.50 cm,the enrichment and purification conditions were optimized as follows. The sample concentration was 10.3 mg/mL,the absorptive flow rate was 2.7 mL/min,the desorption flow rate was 3.5 mL/min,the desorption agent was 30% ethanol water solution,and the volume of the desorption agent was 400 mL. With optimized conditions,3.07 g of the purified extract contained 80% phenylethanoid glycosides was obtained from 500 g of seeds ofPlantagoasiaticaL. and its yield was 0.61%. The results of hyperuricemic model rat experiment showed that given different doses of crude phenylethanoid glycosides extract or refined extract intragastrically could obviously reduce the rat serum uric acid level and inhibit the rat liver xanthine oxidase activity. The treatment groups had a significant difference(p<0.01)with model group.

seeds ofPlantagoasiaticaL.;macroporous adsorption resins;purification;phenylethanoid glycosides;serum uric acid level

2015-10-26

皮璟漁(1988-),女,碩士,助理研究員,研究方向:食品成分的功能作用,E-mail:197115084@qq.com。

萬茵(1976-),女,博士,副教授,研究方向:食品功能成分的開發(fā)利用,E-mail:yinwan@ncu.edu.cn。

謝明勇(1957-),男,教授,研究方向:食品功能成分的開發(fā)利用,E-mail:myxie@ncu.edu.cn。

國家自然科學(xué)基金資助項目(31160316)。

TS201.1

A

1002-0306(2016)12-0339-06

10.13386/j.issn1002-0306.2016.12.056