魏　軍，程萬(wàn)輝，孫容非，王建明，李紅艷（甘肅省莊浪縣畜牧獸醫(yī)局，744699）

豬瘟活疫苗、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗最佳免疫程序確定試驗(yàn)

魏軍，程萬(wàn)輝，孫容非，王建明，李紅艷
（甘肅省莊浪縣畜牧獸醫(yī)局，744699）

豬瘟（CSF）、豬口蹄疫（FM D）、豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）是目前危害養(yǎng)豬生產(chǎn)的主要傳染病，屬于國(guó)家強(qiáng)制免疫動(dòng)物疫病。我縣對(duì)以上三種疫病預(yù)防主要采用分期免疫法，除增加了防疫人員工作量，浪費(fèi)人力、物力外，免疫效果也不確定，如何制定合理的免疫程序，提高免疫效果，減少工作量，節(jié)省人力、物力，成為目前畜牧技術(shù)部門(mén)急需解決的實(shí)際問(wèn)題。2011年設(shè)立并完成的《豬瘟等四種政府采購(gòu)動(dòng)物常規(guī)防疫專(zhuān)用疫苗免疫抗體效價(jià)測(cè)定試驗(yàn)》表明豬瘟、豬O型口蹄疫兩種疫苗雙側(cè)注射具有協(xié)同效應(yīng)，2012——2014年設(shè)立并完成的《豬瘟、豬O型口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征三種疫苗同時(shí)免疫抗體效價(jià)測(cè)定試驗(yàn)》表明豬瘟、豬O型口蹄疫、豬繁殖與呼吸綜合征三種疫苗同時(shí)免疫，豬繁殖與呼吸綜合征疫苗不論采用滅活疫苗還是活疫苗，豬瘟疫苗不論采用肌注還是皮下注射，疫苗免疫合格率不能全部達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)（≥70%），三種疫苗不能同時(shí)免疫。設(shè)立本試驗(yàn)，旨在確定豬瘟活疫苗、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗最佳免疫程序，為提高免疫抗體水平，確保三種疫苗免疫均達(dá)農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)和無(wú)設(shè)防動(dòng)物疫病發(fā)生提供科學(xué)依據(jù)。

1　試驗(yàn)材料

1.1疫苗 豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）（批號(hào)：1507045A，規(guī)格：20頭份/瓶，廠家：成都天邦生物制品有限公司），豬疫苗專(zhuān)用稀釋液（批號(hào)：1503061，規(guī)格：20m l/瓶，廠家：普萊柯生物工程股份有限公司），豬O型口蹄疫滅活疫苗（批號(hào)：H 150417J，規(guī)格：100m l/瓶，廠家：中農(nóng)威特生物科技股份有限公司），豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗（NVDC-JXAI株）（批號(hào)：1505002，規(guī)格：20m l/瓶，廠家：中牧實(shí)業(yè)有限公司成都藥械廠），系政府采購(gòu)動(dòng)物防疫常用疫苗，由莊浪縣疫控中心提供。

1.2試驗(yàn)動(dòng)物選柳梁鄉(xiāng)唐拴德豬場(chǎng)品種相同、出生日齡相差不超過(guò)5天、出生重基本均勻的健康仔豬10窩共92頭，試驗(yàn)前（50日齡內(nèi)）未使用CSF、FM D、PRRS疫苗免疫，隔離飼養(yǎng)。

1.3試劑 豬瘟正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：20150916201，有效期：20151213，廠家：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所），豬口蹄疫正向間接血凝抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：20150916201，有效期：20151215，廠家：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所），豬繁殖與呼吸綜合征病毒ELISA抗體檢測(cè)試劑盒（批號(hào)：150302，有效期：160101，廠家：武漢科前動(dòng)物生物有限公司），由莊浪縣畜牧獸醫(yī)局購(gòu)買(mǎi)。

1.4試驗(yàn)器械及消毒用品75%酒精、碘酊、注射器、針頭、脫脂棉、采血器、耳標(biāo)、耳標(biāo)鉗、捕豬器等由柳梁鄉(xiāng)畜牧工作站準(zhǔn)備。

2　試驗(yàn)方法

2.1基礎(chǔ)抗體效價(jià)測(cè)定飼養(yǎng)至50日齡，對(duì)試驗(yàn)豬按10%比例采血分離血清，測(cè)定基礎(chǔ)抗體效價(jià)，CSF、FM D采用IH A法，PRRS采用ELISA法（基礎(chǔ)抗體效價(jià)記錄見(jiàn)附表1）。

附表1　基礎(chǔ)抗體效價(jià)檢測(cè)統(tǒng)計(jì)表

2.2免疫方法CSF、FM D基礎(chǔ)抗體效價(jià)經(jīng)測(cè)定均＜1l og2，PRRS檢測(cè)均為陰性時(shí)，選試驗(yàn)豬84頭，隨機(jī)分為6組，每組14頭，第1-3組為試驗(yàn)組，4-6組為對(duì)照組，試驗(yàn)1組第1d頸部雙側(cè)注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗，第7d頸部分點(diǎn)肌注規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗；試驗(yàn)2組第1d頸部雙側(cè)肌注規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗，第14d頸部分點(diǎn)注射規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗；試驗(yàn)3組第1d頸部雙側(cè)注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄滅活疫苗，第21d頸部分點(diǎn)注射規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗，4-6組第1d分別注射規(guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗，注射后臨床觀察3～5d，作好記錄。

附表2　免疫抗體效價(jià)檢測(cè)統(tǒng)計(jì)

2.3免疫抗體效價(jià)測(cè)定對(duì)試驗(yàn)豬分別于最后一次注射疫苗免疫28d采血測(cè)定免疫抗體效價(jià)，并做詳細(xì)記錄（免疫抗體效價(jià)記錄見(jiàn)附表2），檢測(cè)方法同2.1。

3　試驗(yàn)結(jié)果

3.1試驗(yàn)1組豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率分別為100%、14.3%、42.9%，豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率均未達(dá)農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)；

3.2試驗(yàn)2組豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率分別為100%、57.1%、57.1%，豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率均未達(dá)農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)；

3.3試驗(yàn)3組豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率分別為100%、85.7%、85.7%，三種疫苗免疫合格率均達(dá)農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)；

3.4豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗對(duì)照組免疫合格率分別為92.9%、78.6%、85.7%，免疫合格率均達(dá)農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)。

4　分析討論

4.1試驗(yàn)結(jié)果表明：第1d頸部雙側(cè)肌注規(guī)定劑量豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗，第21d頸部分點(diǎn)肌注規(guī)定劑量的豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗，三種疫苗免疫合格率均高于農(nóng)業(yè)部要求免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)，為此，上述程序?yàn)樽⑸湟?guī)定劑量的豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗達(dá)到農(nóng)業(yè)部規(guī)定免疫合格率標(biāo)準(zhǔn)的最佳免疫程序。

4.2因不同疫苗免疫相互影響因素主要取決于疫苗相互組合和注射間隔時(shí)間的長(zhǎng)短，本次最佳免疫程序確定試驗(yàn)只選用了育肥豬做試驗(yàn)樣本。4.3豬繁殖與呼吸綜合征活疫苗目前臨床應(yīng)用安全性較差，不宜用于無(wú)發(fā)病史的規(guī)模豬場(chǎng)和懷孕母豬，故本次未設(shè)試驗(yàn)。

4.4豬瘟活疫苗（脾淋源）與豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）性能和免疫抗體效價(jià)一致，本次未做單項(xiàng)試驗(yàn)。

4.5通過(guò)試驗(yàn)數(shù)據(jù)分析，豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）、豬O型口蹄疫滅活疫苗、豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫，豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫間隔時(shí)間越短，豬O型口蹄疫滅活疫苗與豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗免疫合格率越低，而對(duì)豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）免疫合格率影響不大，為此，豬瘟活疫苗（細(xì)胞源）和豬繁殖與呼吸綜合征滅活疫苗能否同時(shí)免疫后再進(jìn)行豬O型口蹄疫滅活疫苗免疫，有待今后進(jìn)一步探討。

S858.28文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B

1003-8655（2016）03-0008-02