秦　湉，李芳香，逯鳳肖，郁建平*

(1.貴州大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽(yáng)，550025；2.貴州大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550025)

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二氫楊梅素對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)及某些生理指標(biāo)的影響

秦湉1，李芳香1，逯鳳肖2，郁建平2*

(1.貴州大學(xué) 生命科學(xué)學(xué)院，貴州 貴陽(yáng)，550025；2.貴州大學(xué) 藥學(xué)院，貴州 貴陽(yáng) 550025)

試驗(yàn)旨在研究二氫楊梅素(Dihydromyricetin ，DMY)對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清指標(biāo)及消化酶指標(biāo)的影響。選取體重相近的鯉魚(yú)，隨機(jī)分為5個(gè)處理組，Ⅰ組為飼喂基礎(chǔ)日糧的對(duì)照組，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ組為分別添加DMY 0.075%、0.10%、0.125%、0.25%的試驗(yàn)組。試驗(yàn)期為64 d，結(jié)果表明，基礎(chǔ)日糧中添加0.125%和0.25%的DMY極顯著提高鯉魚(yú)的增重率(WGR)和肥滿(mǎn)率(CF)，不同劑量的DMY添加都極顯著降低鯉魚(yú)餌料系數(shù)(FCR)(P<0.01)?；A(chǔ)日糧中添加0.25% DMY顯著提高鯉魚(yú)血清中白蛋白(ALB)和總蛋白(TP)的含量(P<0.05)，添加不同劑量的DMY對(duì)鯉魚(yú)血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)活性沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。基礎(chǔ)日糧中添加0.25% DMY可以顯著提高鯉魚(yú)胃蛋白酶活性(P<0.05)，極顯著降低腸道淀粉酶活性(P<0.01),添加不同劑量DMY對(duì)鯉魚(yú)腸道脂肪酶活性沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。

二氫楊梅素；鯉魚(yú)；生長(zhǎng)性能；血清指標(biāo)；消化酶指標(biāo)

藤茶作為藥食兩用的植物，是蛇葡萄屬植物上的嫩莖葉，最初在民間作為草藥應(yīng)用[1]。二氫楊梅素(Dihydromyricetin ，DMY)是藤茶提取物中的有效成分[2]，研究表明，DMY具有多種藥理活性，如消炎、鎮(zhèn)痛、抗高血壓、保肝護(hù)肝及解酒、增強(qiáng)免疫力、抗氧化和抑菌[3-9]，但其在水產(chǎn)生物中還沒(méi)有廣泛應(yīng)用。近幾年，各種中草藥以及各種微生物作為魚(yú)飼料添加劑，對(duì)魚(yú)類(lèi)生長(zhǎng)性能、抗氧化性等各方面進(jìn)行研究。試驗(yàn)主要通過(guò)在基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的DMY，研究DMY對(duì)鯉魚(yú)的生長(zhǎng)性能、血清指標(biāo)以及消化酶指標(biāo)的影響，為DMY在水產(chǎn)生物養(yǎng)殖中的應(yīng)用提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

二氫楊梅素：貴州大學(xué)生化營(yíng)養(yǎng)研究所提供。

鯉魚(yú)：貴州本地鯉魚(yú)，購(gòu)自貴陽(yáng)市花溪區(qū)洛平村漁場(chǎng)。

ALB含量試劑盒(南京建成生物工程研究所)，TP含量試劑盒(南京建成生物工程研究所)，谷草轉(zhuǎn)氨酶試劑盒(南京建成生物工程研究所)，腸道蛋白酶試劑盒(南京建成生物工程研究所)，腸道淀粉酶(南京建成生物工程研究所)，腸道脂肪酶(南京建成生物工程研究所)。

儀器：TU1901雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(北京普析通用儀器有限責(zé)任公司)，電子天平(梅特勒；XS205)。

1.2試驗(yàn)設(shè)計(jì)

選取健康的鯉魚(yú)120尾(30.39±10.53) g，隨機(jī)分為5個(gè)處理，每個(gè)處理3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)8尾。以基礎(chǔ)日糧組為對(duì)照試驗(yàn)組，Ⅰ組為基礎(chǔ)日糧組，Ⅱ組為基礎(chǔ)日糧組+0.075%DMY，Ⅲ組為基礎(chǔ)日糧組+0.10%DMY，Ⅳ組為基礎(chǔ)日糧組+0.125%DMY，Ⅴ組為基礎(chǔ)日糧組+0.25%DMY。預(yù)試驗(yàn)期為14 d，正式試驗(yàn)期為64 d。

表1　基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干%)

注：每千克預(yù)混料含：CuSO4·5H2O 2.0 g、FeSO4·7H2O 25 g、MnSO4·4H2O 7 g、ZnSO4·7H2O 22 g、Na2SeO 30.04 g、KI 0.026 g、CoCl2·6H2O 0.1 g、VA 900 000 IU、VD 200 000 IU、VE 4 500 mg、VK 3 220 mg、VB1320 mg、VB21 090 mg、Vpp 2 000 mg、VB6500mg、VB121.6 mg、VC10 000 mg、泛酸 1 000 mg、葉酸 16.5 mg

1.3飼養(yǎng)試驗(yàn)

試驗(yàn)鯉魚(yú)在塑料水箱中飼養(yǎng)(規(guī)格為90 cm×50 cm×25 cm)，預(yù)實(shí)驗(yàn)為14 d。飼喂日常飼料的為對(duì)照組，Ⅰ組為日常飼料對(duì)照組，Ⅱ組為試驗(yàn)組日常飼料+0.075%DMY，Ⅲ組為試驗(yàn)組日常飼料+0.10%DMY，Ⅳ組為試驗(yàn)組日常飼料+0.125%DMY，Ⅴ組為試驗(yàn)組日常飼料+0.25% DMY。試驗(yàn)期為64 d。每天投喂2次，投餌量為魚(yú)體重的2%～4%，投喂45 min后，將剩余的餌料排出，每2～3 d換一次水，換水后每箱中添加125 g海鹽。

1.4指標(biāo)的測(cè)定

1.4.1生長(zhǎng)性能指標(biāo)的測(cè)定

正式試驗(yàn)開(kāi)始后，先測(cè)定每箱魚(yú)的初體重，饑餓24 h的狀態(tài)下記錄。試驗(yàn)期為64 d，在試驗(yàn)期間每箱試驗(yàn)魚(yú)在一定的時(shí)間段分別檢測(cè)兩次總體重(饑餓24 h)，每組抽取6尾，檢測(cè)體長(zhǎng)和體重，記錄。

增重率(weighe gain ratio,WGR,%)=100×(Wt-WO)/WO

餌料系數(shù)(feed conversion ration,FCR)=FI/(Wt-WO)

肥滿(mǎn)度(condition factor,CF,%)=100×Wb/L3)

式中，Wt：魚(yú)末體均重，WO：魚(yú)初體均重，F(xiàn)I：每尾魚(yú)平均攝食料總量，Wb：每尾魚(yú)末體重，L：每尾魚(yú)末體長(zhǎng))

1.4.2血清指標(biāo)的測(cè)定

每個(gè)重復(fù)選取6尾試驗(yàn)魚(yú)，尾部靜脈采血。在3000 r/min的轉(zhuǎn)速下離心10 min，取得血清。置于1.5 ml離心管中，于-20℃冰箱中保存。以測(cè)定血清中白蛋白(ALB)、總蛋白(TP)、谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)。按試劑盒說(shuō)明檢測(cè)鯉魚(yú)血清中白蛋白、總蛋白、谷草轉(zhuǎn)氨酶含量。

1.4.3腸道消化酶的測(cè)定

試驗(yàn)每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取6尾魚(yú)，進(jìn)行魚(yú)體解剖。迅速取出腸道，用生理鹽水洗凈其表面粘液和血液，用濾紙擦干。準(zhǔn)確地稱(chēng)取一定量組織，制成組織勻漿，離心取上清液，制成所需粗酶液樣品。以測(cè)定胃蛋白酶、腸道淀粉酶、腸道脂肪酶。按試劑盒說(shuō)明檢測(cè)鯉魚(yú)腸道蛋白酶、腸道淀粉酶、腸道脂肪酶活性。

1.5數(shù)據(jù)分析

試驗(yàn)的數(shù)據(jù)采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)處理軟件，應(yīng)用其ANOVA模塊進(jìn)行單因素的方差分析，LSD要點(diǎn)方法對(duì)各組間進(jìn)行多重比較，結(jié)果采用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差來(lái)表示。

2　結(jié)果與分析

2.1DMP對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)的影響

可以得出(見(jiàn)表2)，添加DMY劑量為0.125%和0.25%對(duì)鯉魚(yú)WGR和CF有極顯著的影響(P<0.01)，其WGR幅度分別為153.58%、160.39%，CF增長(zhǎng)的幅度分別為40.66%、58.24%。餌料系數(shù)各組DMY的添加量都有極顯著降低(P<0.01)，其FCR降低幅度分別為52.38%、65.27%、76.09%、77.60%。

表2　DMY對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

注：同一列數(shù)據(jù)上表字母相同表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)，不同大寫(xiě)字母表示差異極顯著(P<0.05)；下表同。

2.2DMY對(duì)鯉魚(yú)血清指標(biāo)的影響

可以看出(見(jiàn)表3)，添加 DMY 0.25%DMY對(duì)鯉魚(yú)血清的ALB、TP含量有顯著增高(P<0.05)，其ALB增高幅度為25.78%，TP增高幅度為22.55%(P<0.05)，其他各組間差異性不顯著(P>0.05)。添加不同劑量DMY對(duì)鯉魚(yú)血清中GOT含量沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。

表3　DMY對(duì)鯉魚(yú)血清指標(biāo)的影響

2.3DMY對(duì)鯉魚(yú)腸道消化酶指標(biāo)的影響

可以看出(見(jiàn)表4)，添加0.25%DMY對(duì)鯉魚(yú)的腸道淀粉酶活性可以顯著降低(P<0.05)，其降低幅度為77.41%，其他各組間差異性不顯著(P>0.05)；添加0.25%DMY可以極顯著提高腸道蛋白酶活性(P<0.01)，其增高幅度為181.82%，其他各組間差異性不顯著(P>0.05)；添加不同劑量DMY對(duì)鯉魚(yú)腸道脂肪酶活性沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。

表4　DMY對(duì)鯉魚(yú)腸道消化酶指標(biāo)的影響

3　結(jié)論與討論

3.1基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量DMY對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

WGR和CF的變化是飼料添加劑對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能影響最直接的表現(xiàn)，吳文等[10]在飼料中添加0.3%的絞股蘭來(lái)飼喂草魚(yú)，使其增重提高31.25%。戴青[11]在日糧中添加0.25%DMY可以極顯著提高瑤山雞的日增重。柴桂珍[12]在飼料中草藥添加可以促進(jìn)魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)。黃銀燕[13]在飼料中添加2%和4%的螺旋藻及杜仲提取物可以顯著降低奧尼魚(yú)餌料系數(shù)。本試驗(yàn)結(jié)果，日糧中添加劑量為0.125%和0.25%的DMY對(duì)鯉魚(yú)WGR和CF都有極顯著提高(P<0.01)，添加不同劑量的DMY都可以極顯著降低其FCR(P<0.01)。結(jié)果表明，添加不同劑量的DMY對(duì)鯉魚(yú)的生長(zhǎng)性能有一定的促進(jìn)作用。

3.2基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的DMY對(duì)鯉魚(yú)血清指標(biāo)的影響

血清中ALB和TP含量可以表現(xiàn)體內(nèi)蛋白代謝的情況，其中ALB參與魚(yú)體免疫調(diào)理和營(yíng)養(yǎng)的作用，血清中GOT的含量是肝功能的重要指標(biāo)，在機(jī)體的蛋白質(zhì)代謝中有重要作用。楊弘等[14]研究表明飼料蛋白水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)ALB和TP沒(méi)有顯著影響，但是與對(duì)照組相比，數(shù)值有明顯增長(zhǎng)。聶國(guó)興[15]木聚糖酶對(duì)尼羅羅非魚(yú)血液中ALB和TP含量有極顯著提高，對(duì)血液中GOT含量沒(méi)有顯著影響。夏薇等[16]三種不同飼料添加劑對(duì)建鯉血清中GOT的活性沒(méi)有顯著影響，雖然數(shù)值有明顯降低。Wang Y等[17]在基礎(chǔ)日糧中用蛋白肽代替部分蛋白原料，建鯉魚(yú)血清中GOT的活性偏低在正常情況下，當(dāng)肝臟和心機(jī)等組織發(fā)生病變時(shí)，血清中GOT活性會(huì)大幅度上升。周小波等[18]在基礎(chǔ)日糧中添加不同乳酸菌對(duì)血清中GOT活性有降低作用。本試驗(yàn)在基礎(chǔ)日糧中添加0.25%的DMY可以顯著提高血清中ALP和TP的含量(P<0.05)，飼料中添加DMY可以提高鯉魚(yú)體內(nèi)蛋白質(zhì)的代謝，對(duì)鯉魚(yú)魚(yú)體的營(yíng)養(yǎng)水平有顯著的提高。添加不同劑量的DMY對(duì)鯉魚(yú)血清中GOT活性沒(méi)有顯著影響(P>0.05)，DMY對(duì)于鯉魚(yú)的肝臟功能有保護(hù)作用。

3.3基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量的DMY對(duì)鯉魚(yú)腸道消化酶指標(biāo)的影響

張耀武等[19]在黃顙魚(yú)的日糧中添加含有金銀花的中草藥，可提高其生長(zhǎng)性能和非特異性免疫力。許培玉[20]在凡納濱對(duì)蝦中添加小肽制品可提高腸道消化酶的活性。本試驗(yàn)，在基礎(chǔ)日糧中添加DMY 0.25%可以顯著增強(qiáng)鯉魚(yú)胃蛋白酶活性(P<0.05)，極顯著降低腸道淀粉酶活性(P<0.01)，在基礎(chǔ)日糧中添加不同劑量DMY對(duì)鯉魚(yú)腸道脂肪酶活性沒(méi)有顯著影響(P>0.05)，但可以在一定程度上降低腸道脂肪酶活性。

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Effects of Dihydromyricetin on Growth Performance, Serum Indexes and Digestive Enzyme Indexes of Common Carp

QINtian1,YUJian-ping2,LUFeng-xiao3,LIFang-xiang3

(CollegeofLifeSciences,GuizhouUniversity,Guiyang,Guizhou550025，China)

The effects of Dihydromyricetin (DMY)on growth performance,serum indexes anddigestive enzymes ofCyprinuscarpiowere investigated in the present work.The group fed the basal diet was used as the control, and the basal diets supplemented with different DMYs (0.075%,0.10%,0.125% and 0.25%) were used as the treatments.The treatments added with 0.125% and 0.25% DMY significantly increased WGR and CF ofCyprinuscarpio(P<0.01),and different dosages of DMY might extremely significantly decrease the CFR(P<0.01). Addition of 0.25% DMY significantly increased ALB and TP levels in the serum ofCyprinuscarpio(P<0.05) ,and different dosages of DMYs gave no significant effect on the GOT activity in the serum (P>0.05). Treatment with 0.25% DMY could significantly improvethe pepsaseactivity (P<0.05),intestinalamylase activitydecreased significantly(P<0.01),and the addition of different dosages of DMYs had no significantly effects on the intestinal lipase activity ofCyprinuscarpio(P>0.05).

Dihydromyricetin;Cyprinuscarpio; Growth performance; Serum indexes; Digestive enzyme

2016-01-29；

2016-02-07

貴州省科技廳農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目[黔科合MY〔2011〕3094號(hào)]。

郁建平，男，教授，博士生導(dǎo)師，主要研究方向：天然產(chǎn)物的分離、提?。籈-mall: yujp666666@163.com。

S963.73

A

1008-0457(2016)01-0091-04國(guó)際DOI編碼：10.15958/j.cnki.sdnyswxb.2016.02.018