劉燕芳, 種貝貝，辛?xí)詡? 高德民

(山東中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355)

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不同產(chǎn)地、不同種類以及不同部位中的石韋總黃酮含量分析

劉燕芳, 種貝貝，辛?xí)詡? 高德民*

(山東中醫(yī)藥大學(xué) 藥學(xué)院，山東 濟(jì)南 250355)

目的：采用紫外可見(jiàn)分光光度法對(duì)不同產(chǎn)地、不同種類以及不同部位的石韋藥材中的總黃酮的含量進(jìn)行分析研究，對(duì)藥用石韋的質(zhì)量控制提供一定的依據(jù)。 方法： 利用60%乙醇超聲提取不同石韋粉末，采用紫外-可見(jiàn)光分光光度法在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度，分析不同石韋中的總黃酮含量。 結(jié)果：不同種類、不同產(chǎn)地以及不同部位的石韋中總黃酮含量存在明顯差異。 結(jié)論：通過(guò)本實(shí)驗(yàn)對(duì)不同石韋中的總黃酮含量測(cè)定的分析，為石韋藥材品種的鑒別和質(zhì)量研究提供了一定的參考。

石韋；紫外-可見(jiàn)分光光度法；總黃酮含量

石韋屬于水龍骨科(Polypodiaceae)石韋屬(Pyrrosia)植物，性味甘、苦，微寒，歸肺、膀胱經(jīng)[1]，有利尿通淋、清熱止血的作用[2-3]，用于熱淋，血淋，石淋，小便不通，淋瀝澀痛，肺熱喘咳等癥[4-6]。廬山石韋[Pyrrosiasheareri(Bak.)Ching]、石韋[Pyrrosialingua(Thunb.) Farwell]和有柄石韋[Pyrrosiapetiolosa(Christ)Ching]現(xiàn)已收載于藥典，此外，還有氈毛石韋[Pyrrosiadrakeana(Franch.) Ching]、華北石韋[Pyrrosiadavidii(Baker) Ching]等[7]。石韋中主要含有黃酮、綠原酸、芒果苷、木犀草素等多種化學(xué)成分[8]。黃酮類化合物具有抗過(guò)敏、降血壓、抗炎、抗菌、抗突變、抗?jié)?、保肝和降血脂等活性[9]，現(xiàn)已制成多種中成藥，如排石顆粒、蕩滌靈、復(fù)方石韋片等。不同種類、產(chǎn)地以及不同部位的石韋藥材之間可能存在差異，這會(huì)導(dǎo)致不同石韋在藥用功效上的不同，本實(shí)驗(yàn)針對(duì)不同地域的廬山石韋、氈毛石韋、膠東石韋、有柄石韋、石韋及其不同部位的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定[10]，分析其差異，以期對(duì)臨床用藥提供指導(dǎo)。

1　材料與儀器

1.1材料

廬山石韋(四川天順康、湖北)、有柄石韋(浙江、華北新采、梯子山膠東、長(zhǎng)白山、亳州、濟(jì)南新采，膠東、陜西洋縣、河北、四川成都、云南、湖北、四川、江蘇)、石韋(廣西桂林、安徽、浙江溫州、福建寧德、云南昆明)、云鄉(xiāng)石韋、中越石韋(廣西宜州)、華北石韋(黃巢)以及氈毛石韋(安徽亳州)如表1，蘆丁(批號(hào)：20130917購(gòu)置上海金穗生物科技有限公司)純度≥98%，亞硝酸鈉(天津博迪化工股份有限公司)、氯化鋁(天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所)、氫氧化鈉(天津市登科化學(xué)試劑有限公司)均為分析純。60%乙醇，保鮮膜，蒸餾水。

1.2儀器

上海菁華754PC 紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)、KQ-250E型醫(yī)用超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)、循環(huán)水式多用真空泵(菏澤市鑫源儀器有限公司)、微量移液器(上海求精生化試劑儀器有限公司)、電子天平/H27-A100(福州華志科學(xué)儀器有限公司)、電子天平/FA2004N(上海菁華儀器有限公司)、DS-T250 型高速多功能粉碎機(jī)(上海市頂帥工貿(mào)有限公司)、上海樹(shù)立FXB101-1 加熱鼓風(fēng)干燥箱。

表1　不同產(chǎn)地、品種和提取部位的石韋中黃酮含量

2　實(shí)驗(yàn)方法

2.1總黃酮的提取及測(cè)定

稱取一定量的石韋藥材置于錐形瓶中，加入60%乙醇20 mL，超聲1.5 h，抽濾，移取濾液1 mL置于試管中，作為供試品藥材溶液。用60%的乙醇稀釋，依次加入顯色劑(5%亞硝酸鈉0.3 mL，10%氯化鋁0.3 mL、1 mol/L氫氧化鈉4 mL)搖勻，顯色15 min后，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法在510 nm波長(zhǎng)處測(cè)吸光度。

2.2標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備

精密稱取蘆丁4.0 mg置于100 mL燒杯中，加入60%乙醇30 mL，經(jīng)超聲溶解，得到0.13 mg/mL的蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

取上述標(biāo)準(zhǔn)品溶液，稀釋不同濃度，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法在510 nm波長(zhǎng)下測(cè)吸光度[11]，以濃度為橫坐標(biāo)，吸光度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，建立回歸方程y=13.331x+0.023 5,R2=0.993 1。

2.4樣品總黃酮含量的測(cè)定

以蘆丁作為對(duì)照品，采用亞硝酸鈉-氯化鋁-氫氧化鈉顯色法、紫外-可見(jiàn)分光光度法進(jìn)行測(cè)定，得各石韋中總黃酮的含量如表1。

3　實(shí)驗(yàn)結(jié)果

從表1中可見(jiàn)，石韋中不同產(chǎn)地、品種和提取部位的總黃酮含量存在著明顯的區(qū)別。其中以安徽的石韋總黃酮最高，湖北的廬山石韋含量次之，有柄石韋中總黃酮含量相對(duì)較少，但是四川成都的有柄石韋中的總黃酮含量最少，還不足10%。同種石韋中，一般葉中的總黃酮含量較高，葉柄和根莖中含量較少，但是產(chǎn)于湖北的廬山石韋和安徽的石韋根莖中總黃酮含量明顯超過(guò)其他的藥用部位。因此，石韋在藥用時(shí)要充分考慮到不同藥材中有效成分的含量以期達(dá)到最好的藥用效果。

本實(shí)驗(yàn)收集了全國(guó)20多種石韋樣品，通過(guò)對(duì)不同提取部位黃酮含量的測(cè)定，發(fā)現(xiàn)有柄石韋(江蘇)、中越石韋(廣西宜州)以及氈毛石韋(安徽亳州)根莖中也含有豐富的黃酮類成分。因此，建議《中國(guó)藥典》增加根莖類入藥部分，以最大限度地利用石韋這一珍貴資源，為其臨床應(yīng)用提供了參考依據(jù)。

[1]張藝軒，李開(kāi)通，李秋月，等.不同產(chǎn)地和品種石韋藥材的高效液相指紋圖譜研究[J].中藥材,2011(1):20-26.

[2]陳露，劉布鳴. 中藥石韋的研究概況[J]. 廣西醫(yī)學(xué)，2011, 33(11): 1486-1489.

[3]中國(guó)科學(xué)院植物研究所.中國(guó)高等植物圖鑒：第1冊(cè)[M].北京：科學(xué)出版社，1983.

[4]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典：一部[S]. 北京: 中國(guó)醫(yī)藥科技出版社, 2010:83-84.

[5]薛芳,許占民. 中國(guó)藥物大全：中藥卷[M]. 北京: 人民衛(wèi)生出版社, 2005.

[6]江蘇省植物研究所.新華本草綱目：第3冊(cè) [M] .上海:上?？萍汲霭嫔? 1991: 715 .

[7]中國(guó)科學(xué)院中國(guó)植物志編輯委員會(huì).中國(guó)植物志：第21卷[M].北京：科學(xué)出版社, 1979： 18-19.

[8]鄭興，許云龍，徐軍. 西南石韋化學(xué)成分的研究[J] . 中國(guó)中藥雜志, 1998, 23( 2) : 98-99.

[9]PARALLADE J ,GUINEA M. Flavonoid inhibitors of trypsin and leucineaminopeptidase :A proposed mathematical model for IC50estimation [J]. J Nat Prod, 1995, 58 (6): 823-829.

[10]朱賁峰,賀肇東,王政峰,等.不同產(chǎn)地青錢(qián)柳的總黃酮含量比較[J].海峽藥學(xué), 2004, 16(3): 88-8.

[11]李曉丹，肖婭萍. 5種藥用石韋總黃酮的提取及測(cè)定[J]. 中國(guó)野生植物資源, 2009,2(1): 59-61.

Determination of Total Flavone inPyrrosiafrom Different Areas, Species and Extractive Fractions

Liu Yanfang, Zhong Beibei, Xin Xiaowei, Gao Demin*

(School of Pharmacy, Shandong University of TCM, Jinan 250355, China)

Objective : To compare total flavone in different areas, different species and different extractive fractions ofPyrrosia. Methods: To extract with 60% ethyl alcohol then detect by UV-VIS spectrophotometry in 510 nm. Results: There are obvious differences of total flavone content in different species, different areas and different extract fractions ofPyrrosia. Conclusion: According to the analysis of total flavone content in differentPyrrosia, some references were provided for the identification and research ofPyrrosiaspecies.

Pyrrosia; UV-VIS spectrophotometry; total flavone

10.3969/j.issn.1006-9690.2016.04.010

2015-12-21

山東中醫(yī)藥大學(xué)2014年SRT資助項(xiàng)目(2014382)。

劉燕芳(1994—)，女，山東中醫(yī)藥大學(xué)2012級(jí)中藥學(xué)本科生。

高德民，男，副教授，碩士生導(dǎo)師，研究方向：中藥資源與質(zhì)量控制。E-mail:gdm607@126.com

R284.1

A

1006-9690(2016)04-0037-03