胡 迎 陳旭林

（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院燒傷科，安徽 合肥 230022）

BMX非受體酪氨酸激酶研究進(jìn)展

胡 迎 陳旭林

（安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院燒傷科，安徽 合肥 230022）

BMX非受體酪氨酸激酶又稱骨髓激酶X（bone marrow tyrosine kinase on chromosome X, BMX激酶），是Tec家族成員之一。它廣泛表達(dá)于骨髓造血細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、上皮細(xì)胞及內(nèi)皮血管細(xì)胞和某些惡性腫瘤細(xì)胞(前列腺癌、乳腺癌和腎細(xì)胞癌等)，并參與炎癥反應(yīng)和多種細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)，在細(xì)胞免疫、發(fā)育、增殖和凋亡過(guò)程中起著重要作用。本文對(duì)BMX激酶的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其功能簡(jiǎn)要綜述如下 。

1 Tec家族激酶概述

Tec家族激酶成員有TEC (tyrosine kinase expressed in hepatocellular carcinoma)、BTK (Bruton’s tyrosine kinase)，ITK(interleukin-2 inducible T-cell kinase)/TSK/EMT、TXK/RLK和BMX，是第二大類非受體酪氨酸激酶家族。該家族成員結(jié)構(gòu)具有高度同源性，Tec家族激酶每個(gè)成員都有C-端激酶結(jié)構(gòu)域、SH2（磷酸化酪氨酸相互作用）、SH3（富脯氨酸區(qū)域相互作用）、TH結(jié)構(gòu)域（Tec homology domain）由一個(gè)BH（BTK homology domain）和一到兩個(gè)PRRs（proline-rich regions）組成。除了TXK/RLK激酶以外，其他成員的N-端PH結(jié)構(gòu)域（pleckstrin homology domain）錨定細(xì)胞膜，并在膜上活化(圖1)。TXK激酶半胱氨酸鏈狀結(jié)構(gòu)取代了N-端PH結(jié)構(gòu)域，半胱氨酸鏈狀結(jié)構(gòu)棕櫚?；瘜XK激酶固定于細(xì)胞膜。Tec家族激酶中TEC激酶最早被發(fā)現(xiàn)， TEC激酶主要在肝細(xì)胞表達(dá)，且在人肝細(xì)胞性肝癌（human hepatocellular carcinoma , HCC）中表達(dá)異常。TEC激酶還是一種促生存因子，在人中性粒細(xì)胞中TEC激酶能被胰島素樣生長(zhǎng)因子（insulinlike growth factors-1，IGF-1）調(diào)節(jié)，通過(guò)磷脂-3肌醇（phosphoinositide 3-kinase ，PI3-K）活化[1]，并參與炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)；BTK激酶在B細(xì)胞中有關(guān)鍵性作用，阻斷BTK激酶信號(hào)通路能改善淋巴瘤的進(jìn)展和實(shí)驗(yàn)性關(guān)節(jié)炎[2]。在小鼠前成骨細(xì)胞MC3T3-E1細(xì)胞中，使用BTK激酶抑制劑能影響成骨細(xì)胞分化。BTK激酶通過(guò)絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase，MAPK），核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear factor kappa B，NF-κB ）和蛋白激酶Cα（protein kinase Cα，PKCα）信號(hào)通路參與調(diào)節(jié)成骨細(xì)胞分化；TXK 和ITK激酶不管在正常還是惡性血液疾病中T細(xì)胞和自然殺傷細(xì)胞（natural killercell，NK細(xì)胞），都是細(xì)胞內(nèi)信號(hào)調(diào)節(jié)必要分子[3]；ITK激酶主要表達(dá)在T細(xì)胞，調(diào)節(jié)T細(xì)胞受體(T-cell receptor，TCR)信號(hào)通路和輔助T細(xì)胞分化，尤其是對(duì)Th2細(xì)胞作用顯著，而且對(duì)iNKT細(xì)胞發(fā)育和功能維持也有很重要的作用[4]。Qi 等[5]研究NK細(xì)胞和CDT細(xì)胞中Itk 激酶作用功能，試圖在不同環(huán)境中模擬信號(hào)通路?；仡欁罱芯?，Gomez-Rodriguez 等發(fā)現(xiàn)Tec家族激酶影響T細(xì)胞亞細(xì)胞群，包括Th17細(xì)胞。

圖1 Tec激酶家族結(jié)構(gòu)域（PH：pleckstrin homology；BH：BTK homology；TH由BH和一到兩個(gè)PRRs結(jié)構(gòu)域組成；SH：Src homology，SH3具有選擇性，主要和富含脯氨酸區(qū)域蛋白質(zhì)作用，SH2能識(shí)別特殊肽序磷酸化氨基酸殘基，在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有很重要的作用；kinase：激酶結(jié)構(gòu)域）

Tec家族激酶催化活性中心受激酶調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域之外正性影響[6]。目前，對(duì)Tec家族激酶功能結(jié)構(gòu)完整性還缺乏認(rèn)識(shí)，這些正性信號(hào)是如何傳遞到激酶結(jié)構(gòu)域還是一個(gè)未知數(shù)。與之前描述的結(jié)構(gòu)相比，Tec家族激酶保守結(jié)構(gòu)域存在一個(gè)書脊樣延伸結(jié)構(gòu)域（一個(gè)恒定蛋氨酸含有C-螺旋和一個(gè)恒定色氨酸含有SH2激酶連接結(jié)構(gòu)），該結(jié)構(gòu)域能進(jìn)行組裝和拆除激酶，使激酶處于活化或失活狀態(tài)轉(zhuǎn)換。書脊樣監(jiān)管結(jié)構(gòu)域?qū)S持Tec家族激酶活性至關(guān)重要。

Tec激酶家族SH3結(jié)構(gòu)域的動(dòng)力學(xué)研究表明, SH3 (Src Homology 3)結(jié)構(gòu)域是一個(gè)很重要的調(diào)節(jié)結(jié)構(gòu)域，許多信號(hào)蛋白的分子結(jié)構(gòu)中都含有SH3結(jié)構(gòu)域[7]。類似Src家族激酶，兩家族 SH3結(jié)構(gòu)域具有一定序列相似性，都是形成以β鏈為核心的保護(hù)性結(jié)構(gòu)，但是根據(jù)序列同源性顯示 BMX激酶的 SH3結(jié)構(gòu)域不是標(biāo)準(zhǔn)化結(jié)構(gòu)。氫交換質(zhì)譜（HX MS）和熒光光譜學(xué)顯示BMX激酶的SH3結(jié)構(gòu)域是獨(dú)一無(wú)二的結(jié)構(gòu)。BMX激酶的SH3結(jié)構(gòu)域似乎沒(méi)有結(jié)構(gòu)，驗(yàn)證了非結(jié)構(gòu)化一說(shuō)。BMX激酶的SH3結(jié)構(gòu)域仍然存在，在一定背景下展開有更大的BMX-SH3-SH2雙重分子結(jié)構(gòu)。富脯氨酸多肽沒(méi)有添加到BMX-SH3-SH2結(jié)構(gòu)域，在一定背景下BMX-SH3-SH2結(jié)構(gòu)域的SH3光譜并沒(méi)有觀察到變化。極可能的是，BMX激酶的SH3結(jié)構(gòu)域需要肽和SH2必須同時(shí)存在，共同形成一個(gè)相當(dāng)穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)?？偠灾?，通過(guò)核磁共振、熒光光譜法和氫交換質(zhì)譜的數(shù)據(jù)顯示，BMX激酶SH3結(jié)構(gòu)域處于未折疊狀態(tài)。

2 BMX激酶的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)

BMX是1994年從人骨髓來(lái)源cDNA庫(kù)中克隆分離到的一種新基因，位于Xp22.2染色體區(qū)域DXS197和DXS207之間，編碼一種80 kD非受體酪氨酸激酶，是Tec家族激酶的第5位成員，BMX激酶也稱為上皮/內(nèi)皮細(xì)胞激酶（ETK）。BMX激酶基本結(jié)構(gòu)： C-端激酶結(jié)構(gòu)域、SH3結(jié)構(gòu)域、SH2結(jié)構(gòu)域和N-端羧基殘基激酶結(jié)構(gòu)域[8]，沒(méi)有PRRs區(qū)域。BMX基因與BTK基因關(guān)系最為緊密，均位于X染色體，BMX基因編碼由675個(gè)氨基酸構(gòu)成的蛋白質(zhì)，而該蛋白與BTK基因編碼的蛋白70%相近。BTK、ITK和TXK在骨髓細(xì)胞系中選擇性表達(dá)，而BMX激酶和TEC激酶廣泛表達(dá)于體細(xì)胞在細(xì)胞的分化、增殖和代謝中也有很重要的作用（如在上皮細(xì)胞和心臟內(nèi)皮細(xì)胞參與缺血和血壓調(diào)節(jié)的過(guò)程中起作用）。BMX激酶在髓系造血細(xì)胞-粒細(xì)胞和單核細(xì)胞中也有表達(dá)，而上皮細(xì)胞、粒細(xì)胞和單核細(xì)胞都是炎癥反應(yīng)的重要細(xì)胞，因此炎癥反應(yīng)發(fā)生與BMX激酶有密不可分的聯(lián)系。

研究表明，BMX激酶在多種類型細(xì)胞均有大量表達(dá)，而且能被細(xì)胞內(nèi)磷脂酰肌醇-3激酶（phosphatidylinositol-3 kinase，PI3K）和Src激酶激活[9]。BMX激酶也在多種病理狀態(tài)中起著重要的作用，包括局部缺血時(shí)調(diào)節(jié)微動(dòng)脈和淋巴管生成[10]。研究表明，BMX激酶缺乏的上皮細(xì)胞受到血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）刺激后，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶如Erk激酶修復(fù)上皮細(xì)胞磷酸化，證明了BMX激酶導(dǎo)致血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。此外，BMX激酶也被證實(shí)在惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞和一些實(shí)體腫瘤（前列腺癌、乳腺癌和腎細(xì)胞癌）均表達(dá)異常[11]，參與腫瘤的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)化、浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移。

3 BMX激酶功能

3.1 BMX與腫瘤 TEC激酶家族與腫瘤關(guān)系密切。Mano等在1990年研究肝細(xì)胞癌時(shí)發(fā)現(xiàn)了Tec家族激酶的TEC激酶。BMX激酶在上皮細(xì)胞和前列腺癌細(xì)胞中均有表達(dá)。BMX激酶可以刺激神經(jīng)肽，并且BMX激酶活性對(duì)產(chǎn)神經(jīng)肽雄性激素非依賴性前列腺癌有非常重要的刺激作用。BMX激酶也被證實(shí)在惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞（glioblastoma stem cells，GSCs）中表達(dá)異常[12]，并且在與惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞相關(guān)的非干細(xì)胞和神經(jīng)前體細(xì)胞中差異性表達(dá)。BMX激酶能活化惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子和轉(zhuǎn)錄激活子（signal transducer and activator of transcription，STAT3）而不影響正常神經(jīng)干細(xì)胞或祖細(xì)胞（normal neural stem/progenitor cells，NPCs），并且通過(guò)活化STAT3信號(hào)通路來(lái)維持自我更新并能誘發(fā)惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤干細(xì)胞的致瘤能力。STAT3是惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤一個(gè)關(guān)鍵信號(hào)節(jié)點(diǎn)，BMX基因敲除能強(qiáng)烈抑制STAT3信號(hào)通路活化，同時(shí)抑制惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤GSC轉(zhuǎn)錄因子表達(dá)和顱內(nèi)惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤衍生腫瘤（GSC-derived）生長(zhǎng)。BMX激酶活躍有助于腫瘤血管生成和腫瘤生長(zhǎng)[10]，而且在癌癥的起始、轉(zhuǎn)化、發(fā)展和轉(zhuǎn)移有著重要作用。

2014年Zhuang等[13]研究證實(shí)ETK/BMX在腎癌組織及細(xì)胞系中表達(dá)，并發(fā)現(xiàn)ETK表達(dá)與腫瘤的臨床分期、分級(jí)、轉(zhuǎn)移和生存時(shí)間有相關(guān)性。免疫組織化學(xué)顯示，ETK/BMX在腎細(xì)胞癌中高表達(dá)，并且在與腎細(xì)胞癌臨床分期、分級(jí)和轉(zhuǎn)移呈正相關(guān)。同時(shí)，患者總體生存時(shí)間顯示，ETK/BMX高表達(dá)患者的生存時(shí)間明顯短于低表達(dá)患者。此外，下調(diào)ETK/BMX能顯著抑制腎細(xì)胞癌（renal cell carcinoma，RCC）細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移、侵襲，并且能促進(jìn)細(xì)胞凋亡，血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）和STAT3的表達(dá)也明顯下降。然而ETK/BMX激酶在腎細(xì)胞癌中的表達(dá)機(jī)制仍不清楚。BMX激酶是一個(gè)影響腫瘤預(yù)后的潛在因素，可以作為藥物治療目標(biāo)，進(jìn)行靶向治療。2014年Xu等[14]通過(guò)基因融合技術(shù)，融合出一種新基因BMX-ARHGAP，可以作為胃賁門腺癌的生物標(biāo)記物。

3.2 BMX與炎癥 炎癥反應(yīng)發(fā)生迅速，常由微生物和組織損傷等原因引起。有研究表明，炎癥時(shí)BMX激酶調(diào)節(jié)組織釋放細(xì)胞炎癥因子如腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-1β（IL-1β）和IL-6等[15]。BMX激酶通過(guò)脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）作用于Toll樣受體（Toll-like receptors，TLRs）介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，最終導(dǎo)致炎癥反應(yīng)和膿毒血癥的發(fā)生。TLR4信號(hào)通路又分MyD88依賴和非依賴途徑，MyD88依賴途徑通過(guò)作用p38有絲分裂原激活MAPK、c-Jun氨基末端激酶（c-Jun N-terminal kinase，JNK）和哺乳動(dòng)物的NF-κB，這條通路最終導(dǎo)致炎癥細(xì)胞因子包括TNF-α和IL-1β的釋放。BTK和TEC激酶調(diào)節(jié)幾種類型原代小鼠巨噬細(xì)胞TLR信號(hào)的研究結(jié)果表明，在許多類型髓系細(xì)胞依賴信號(hào)通路中，TLR信號(hào)通路激活需要Tec激酶（BTK、TEC和BMX），所以TEC家族激酶對(duì)于調(diào)節(jié)免疫受體和TLR有至關(guān)重要的作用[16]。Tec激酶家族成員（BTK，TEC，BMX）在單核細(xì)胞和巨噬細(xì)胞均有表達(dá)，并且在不同細(xì)胞亞群中表達(dá)水平不一樣。

3.3 BMX與創(chuàng)傷 BMX激酶有調(diào)節(jié)免疫功能的重要功作用，BMX激酶通過(guò)參與細(xì)胞信號(hào)通路發(fā)揮免疫調(diào)節(jié)作用，如BMX激酶與淋巴細(xì)胞表面抗原、G蛋白偶聯(lián)受體和整合素分子相互作用。ETK/BMX激酶在 上皮細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、造血細(xì)胞中均有表達(dá)，可被細(xì)胞外刺激因子（如細(xì)胞因子、細(xì)胞活素類、細(xì)胞外基質(zhì)和激素）激活。大多數(shù)文獻(xiàn)中以BMX激酶作為一種凋亡調(diào)節(jié)因子和癌細(xì)胞生長(zhǎng)因子，其細(xì)胞特異性功能特點(diǎn)是BMX激酶在多種癌細(xì)胞中均有表達(dá)。BMX激酶與創(chuàng)傷也關(guān)系密切，神經(jīng)損傷后ETK/BMX被激活，而抑制ETK/BMX激酶活化，能防止大腦缺血性神經(jīng)退化[17]。研究還表明，BMX激酶對(duì)于缺血性腦損傷在損傷部位的血管生成和炎癥細(xì)胞招募至關(guān)重要[18]。此外，BMX激酶還能調(diào)節(jié)TLRs誘導(dǎo)IL-6的產(chǎn)生，IL-6與創(chuàng)傷性腦損傷密切相關(guān)。動(dòng)物模型研究顯示，BMX激酶的表達(dá)水平與創(chuàng)傷性腦損傷（traumatic brain injury，TBI）程度呈正相關(guān)，提示BMX激酶可作為神經(jīng)創(chuàng)傷生物標(biāo)志物[19]。BMX激酶可以刺激神經(jīng)肽產(chǎn)生，并且該激酶活性不僅對(duì)產(chǎn)神經(jīng)肽雄性激素非依賴性前列腺癌非常重要，而且還有顯著致神經(jīng)損傷作用。BMX激酶在大腦皮質(zhì)神經(jīng)元表達(dá)，并且通過(guò)酪氨酸磷酸化作用于缺血性腦損害。Tec激酶抑制劑LFM-A13可以降低BMX激酶活性和減輕缺血性腦損傷的嚴(yán)重程度。BMX可以成為預(yù)測(cè)輕度創(chuàng)傷性腦損傷（mild traumatic brain injury）后眩暈癥狀加重的血清學(xué)指標(biāo)，有助于評(píng)估臨床眩暈癥狀的嚴(yán)重程度。BMX基因多態(tài)性對(duì)輕度創(chuàng)傷性腦損傷的臨床癥狀方面也有影響，輕度創(chuàng)傷性腦損傷有臨床眩暈癥狀的患者與健康人群相比，其血清 BMX激酶水平更高。若輕度創(chuàng)傷性腦損傷患者前3周血清BMX激酶水平增高，則其眩暈癥狀在創(chuàng)傷后6周有加重傾向，但是BMX激酶對(duì)眩暈癥狀的敏感性和特異性一般。BMX激酶與缺血性腦損傷之間的關(guān)系，為臨床發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷后腦損傷眩暈癥狀加重提供了新的血清學(xué)觀察指標(biāo)。

3.4 BMX與心血管疾病及心臟重塑 BMX激酶在心肌肥厚和重塑中起著重要作用[20]。心肌肥厚伴隨著各種形式心臟病，包括缺血性心臟病、高血壓、心臟衰竭和瓣膜性疾病等，心肌肥厚增加了這些疾病的發(fā)病率和病死率，影響生活質(zhì)量。日常飲食中，食物中攝入鈉和鉀能調(diào)節(jié)內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)磷脂酶（PhospholipaseC-γ，PLC-γ1）和BMX激酶水平[21]，但高鹽飲食是心血管疾病發(fā)病的危險(xiǎn)因素之一。敲除小鼠BMX基因可以影響動(dòng)脈非受體酪氨酸激酶表達(dá)，能夠抑制小鼠心肌肥厚。相較于野生型小鼠，BMX基因缺失和BMX激酶滅活的小鼠，血管緊張素AngⅡ誘導(dǎo)小鼠心肌肥厚的作用顯著減弱。使用BMX激酶抑制劑也是一種可行的治療方法，可對(duì)心肌肥厚進(jìn)行有效干預(yù)。在胚胎早期，BMX激酶主要介導(dǎo)動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。在人類心肌細(xì)胞，BMX mRNA很少表達(dá)或幾乎不表達(dá)，但在心內(nèi)膜和大血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)豐富，BMX激酶在內(nèi)皮細(xì)胞和心肌細(xì)胞間起橋梁作用，通過(guò)血管緊張素Ⅱ刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞使BMX激酶磷酸化增多，而BMX基因沉默抑制下游STAT3信號(hào)通路，這與心肌肥厚發(fā)生相關(guān)。BMX激酶活性是血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)心肌肥厚的必要條件。這些結(jié)果表明，內(nèi)皮BMX激酶提供了一個(gè)減慢心肌肥厚的發(fā)展的治療方向。

4 BMX抑制劑

Tec家族激酶抑制劑的研究進(jìn)展非常迅速，成為治療癌癥的有效方法之一。BMX激酶參與惡性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤、前列腺癌、乳腺癌和肺癌等惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展。BMX激酶成為治療惡性腫瘤的靶目標(biāo)[22]，是因?yàn)锽MX激酶參與腫瘤上皮細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞遷移及血管形成，因此可以通過(guò)靶向抑制BMX激酶控制腫瘤細(xì)胞的轉(zhuǎn)移和腫瘤血管形成。腫瘤抗血管生成療法配合放療或與化療藥物敏化劑聯(lián)合應(yīng)用于臨床，可達(dá)到抑制腫瘤生長(zhǎng)的目的。Pharmacyclics, Avila Therapeutics等公司相繼研發(fā)出BMX激酶抑制劑，并已申請(qǐng)專利。目前臨床階段已知，表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor）抑制劑可以不可逆抑制BMX激酶。Tec家族激酶和Her家族結(jié)構(gòu)中均含某種稀有半胱氨酸結(jié)構(gòu)，而不可逆Her/ ErbB受體抑制劑能通過(guò)結(jié)合這種稀有半胱氨酸結(jié)構(gòu)抑制Her家族，所以也能抑制Tec家族激酶，并且對(duì)BMX激酶抑制效應(yīng)尤為強(qiáng)烈。表皮生長(zhǎng)因子受體抑制劑如CI-1033不可逆修飾Cys496，能抑制BMX激酶。這種交叉抑制作用的發(fā)現(xiàn)，對(duì)于臨床治療方法的研究有重大意義。

BMX-IN-1[23]是通過(guò)共價(jià)修飾Cys496而得到的一種有效、有選擇性和能不可逆抑制BMX激酶的抑制劑。兩位數(shù)微摩爾濃度BMX-IN-1能抑制Tel-BMX-transformed Ba/F3細(xì)胞增殖，而個(gè)位數(shù)微摩爾濃度BMX-IN-1就能抑制前列腺癌細(xì)胞株的增殖。研究使用篩選組合激酶抑制劑的策略，發(fā)現(xiàn)變構(gòu)Akt抑制劑MK2206聯(lián)合BMX抑制劑，兩者共同使用能有效增強(qiáng)BMX抑制劑抑制前列腺癌細(xì)胞增殖的效能。Ibrutinib是一種高效共價(jià)抑制BTK的激酶抑制劑[24]，Ibrutinib (PCI-32765) 共價(jià)抑制作用很強(qiáng)，同樣也能抑制BMX激酶和Tec家族其他成員。Ibrutinib通過(guò)作用B細(xì)胞受體信號(hào)通路，降低B細(xì)胞活性和誘導(dǎo)B細(xì)胞凋亡。BCR（the B-cell receptor）下游激酶是B細(xì)胞生存和細(xì)胞增殖的關(guān)鍵蛋白，而上調(diào)BCR信號(hào)通路是慢性淋巴細(xì)胞性白血?。╟hronic lymphocytic leukemia ,CLL）和一些亞型非霍奇金淋巴瘤（non-Hodgkin’s lymphoma ,NHL）發(fā)生的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。BTK激酶突變、功能喪失會(huì)導(dǎo)致人類疾病X染色體連鎖丙種球蛋白缺乏癥，亦稱Bruton’s丙種球蛋白缺乏癥，并且引起γ球蛋白缺失和增加感染風(fēng)險(xiǎn)。臨床前研究顯示，Ibrutinib與BTK激酶結(jié)合能力強(qiáng)表現(xiàn)出高親和力，并能處理早期CLL細(xì)胞，終止BCR下游促細(xì)胞生存信號(hào)，降低早期促細(xì)胞生存因子釋放，逐步誘導(dǎo)CLL細(xì)胞凋亡。臨床研究發(fā)現(xiàn)在許多惡性血液病治療中，Ibrutinib能夠被患者良好耐受，并且具有抗腫瘤活性，特別對(duì)CLL和套細(xì)胞淋巴瘤（mantle cell lymphoma）作用顯著[25-26]。

目前已探索出一種小分子雙重抑制劑CTN06，通過(guò)靶向作用于前列腺癌細(xì)胞的BTK、ETK /BMX激酶抑制其活性[27]，從而治療PC3和其他類型前列腺癌。隨著BTK/ETK信號(hào)衰減，CTN06能有效殺滅癌細(xì)胞，而不影響正常上皮細(xì)胞。CTN06相比常用抑制劑如表皮生長(zhǎng)因子受體抑制劑，其殺傷癌細(xì)胞的能力更強(qiáng)。CTN06能使前列腺癌細(xì)胞發(fā)生細(xì)胞凋亡和細(xì)胞自噬，并且是化療藥多西紫杉醇的腫瘤敏化劑。在PC3細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)中，用抑制劑CTN06刺激PC3細(xì)胞16 h后，不僅可以抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng)，還可以抑制該細(xì)胞的遷移[27]。判斷CTN06 可以抑制人前列腺癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移情況。CTN06的抗癌效果，還需建立一個(gè)PC3異種移植小鼠模型，進(jìn)行小鼠體內(nèi)試驗(yàn)，來(lái)進(jìn)一步驗(yàn)證。

目前人們了解到的BMX激酶參與機(jī)體正常代謝和病理情況的研究?jī)?nèi)容還是冰山一角，仍有許多BMX激酶參與的疾病發(fā)病機(jī)制和代謝原理不清楚。因此，在今后的研究中，除了要了解Tec家族激酶共性以外，還應(yīng)進(jìn)一步研究每一個(gè)成員的新特點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)新功能，創(chuàng)造出新的治療方法。BMX激酶結(jié)構(gòu)的完整性和功能作用，還需要大量基礎(chǔ)性和臨床性試驗(yàn)研究來(lái)揭示，以便為腫瘤、炎癥、創(chuàng)傷、免疫和心血管疾病等病理過(guò)程的細(xì)胞分子機(jī)制的闡明和相關(guān)疾病防治提供更好的理論依據(jù)和基礎(chǔ)。

［1］Himpe E, Abdul Rahim SA, Verdood P, Mano H, Kooijman R. Tec kinase stimulates cell survival in transfected Hek293T cells and is regulated by the anti-apoptotic growth factor IGF-I in human neutrophils[J].Cell Signal, 2013,25(3):666-673.

［2］Kaneshiro S, Ebina K, Shi K, Yoshida K, Otsuki D, Yoshikawa H, Higuchi C. Bruton tyrosine kinase (Btk) suppresses osteoblastic differentiation [J].J Bone Miner Metab ,2015,33(5):486-495.

［3］Zhong Y, Dong S, Strattan E, Ren L, Butchar JP, Thornton K, Mishra A, Porcu P, Bradshaw JM, Bisconte A, Owens TD, Verner E, Brameld KA, Funk JO, Hill RJ, Johnson AJ, Dubovsky JA. Targeting interleukin-2-inducible T-cell kinase (ITK) and resting lymphocyte kinase (RLK) using a novel covalent inhibitor PRN694[J].J Biol Chem，2015，290(10):5960-5978.

［4］Qi Q, Kannan AK, August A. Structure and function of Tec family kinase Itk [J].Biomol Concepts，2011，2(3):223-232.

［5］Yu L, Smith CI. Tec family kinases [J].FEBS J， 2011，278(12):1969.

［6］Joseph RE, Xie Q, Andreotti AH. Identification of an allosteric signaling network within Tec family kinases [J].J Mol Biol，2010，403(2):231-242.

［7］Roberts JM, Tarafdar S, Joseph RE, Andreotti AH, Smithgall TE, Engen JR, Wales TE. Dynamics of the Tec-family tyrosine kinase SH3 domains[J].Protein Sci， 2016，25(4):852-864.

［8］August A, Ragin MJ. Regulation of T-cell responses and disease by tec kinase Itk [J].Int Rev Immunol，2012，31(2):155-165.

［9］Chen S, Jiang X, Gewinner CA, Asara JM, Simon NI, Cai C, Cantley LC, Balk SP. Tyrosine kinase BMX phosphorylates phosphotyrosine-primed motif mediating the activation of multiple receptor tyrosine kinases [J].Sci Signal，2013，6(277):ra40.

［10］Holopainen T, López-Alpuche V, Zheng W, Heljasvaara R, Jones D, He Y, Tvorogov D, D'Amico G, Wiener Z, Andersson LC, Pihlajaniemi T, Min W, Alitalo K. Deletion of the endothelial Bmx tyrosine kinase decreases tumor angiogenesis and growth [J].Cancer Res，2012，72(14):3512-3521.

［11］Fox JL, Storey A. BMX negatively regulates BAK function, thereby increasing apoptotic resistance to chemotherapeutic drugs [J]. Cancer Res，2015，75(7):1345-1355.

［12］Guryanova OA, Wu Q, Cheng L, Lathia JD, Huang Z, Yang J, MacSwords J, Eyler CE, McLendon RE, Heddleston JM, Shou W, Hambardzumyan D, Lee J, Hjelmeland AB, Sloan AE, Bredel M, Stark GR, Rich JN, Bao S. Nonreceptor tyrosine kinase BMX maintains self-renewal and tumorigenic potential of glioblastoma stem cells by activating STAT3 [J]. Cancer Cell，2011，19(4):498-511.

［13］Zhuang J, Tu X, Cao K, Guo S, Mao X, Pan J, Huang B, Chen X, Gao Y, Qiu S. The expression and role of tyrosine kinase ETK/BMX in renal cell carcinoma [J]. J Exp Clin Cancer Res，2014，33:25.

［14］Xu X, Xu L, Gao F, Wang J, Ye J, Zhou M, Zhu Y, Tao L. Identification of a novel gene fusion (BMX-ARHGAP) in gastric cardia adenocarcinoma [J].Diagn Pathol， 2014，9:218.

［15］Cenni B, Gutmann S, Gottar-Guillier M. BMX and its role in inflammation, cardiovascular disease, and cancer [J]. Int Rev Immunol ，2012，31(2):166-173.

［16］Tampella G, Kerns HM, Niu D, Singh S, Khim S, Bosch KA, Garrett ME, Moguche A, Evans E, Browning B, Jahan TA, Nacht M, Wolf-Yadlin A, Plebani A, Hamerman JA, Rawlings DJ, James RG. The Tec kinase-regulated phosphoproteome reveals a mechanism for the regulation of inhibitory signals in murine macrophages [J].J Immunol，2015，195(1):246-256.

［17］Chen KY, Wu CC, Chang CF, Chen YH, Chiu WT, Lou YH, Chen YH, Shih HM, Chiang YH. Suppression of Etk/Bmx protects against ischemic brain injury [J]. Cell Transplant, 2012，21(1):345-354.

［18］Chen KY, Tsai TY, Chang CF, Tsai YR, Ou JC, Ma HP, Tsai SH, Chiu WT, Lin JW, Liao KH, Lin CM, Wu JC, Chiang YH. Worsening of dizziness impairment is associated with BMX level in patients after mild traumatic brain injury [J]. J Neurotrauma， 2015-03-06. [Epub ahead of print].

［19］Wang YJ, Hsu YW, Chang CM, Wu CC, Ou JC, Tsai YR, Chiu WT, Chang WC, Chiang YH, Chen KY. The influence of BMX gene polymorphisms on clinical symptoms after mild traumatic brain injury [J]. Biomed Res Int，2014，2014:293687. 2014-04-22.[Epub ahead print].

［20］Holopainen T, R?s?nen M, Anisimov A, Tuomainen T, Zheng W, Tvorogov D, Hulmi JJ, Andersson LC, Cenni B, Tavi P, Mervaala E, Kivel? R, Alitalo K. Endothelial Bmx tyrosine kinase activity is essential for myocardial hypertrophy and remodeling [J].Proc Natl Acad Sci USA， 2015，112(42):13063-13068.

［21］Ying WZ, Aaron KJ, Sanders PW. Sodium and potassium regulate endothelial phospholipase C-γ and Bmx [J].Am JPhysiol Renal Physiol，2014，307(1):F58-F63.

［22］Jarboe JS, Dutta S, Velu SE, Willey CD. Mini-review: bmx kinase inhibitors for cancer therapy[J].Recent Pat Anticancer Drug Discov，2013，8(3):228-238.

［23］Liu F, Zhang X, Weisberg E, Chen S, Hur W, Wu H, Zhao Z, Wang W, Mao M, Cai C, Simon NI, Sanda T, Wang J, Look AT, Griffin JD, Balk SP, Liu Q, Gray NS .Discovery of a selective irreversible BMX inhibitor for prostate cancer[J]. ACS Chem Biol,2013, 8(7):1423-1428.

［24］Davids MS, Brown JR. Ibrutinib: a first in class covalent inhibitor of Bruton's tyrosine kinase[J].Future Oncol，2014，10(6):957-967. Raedler LA.Imbruvica (Ibrutinib), first-in-class Bruton's tyrosine kinase inhibitor, receives expanded indications for

［25］patients with relapsed chronic lymphocytic leukemia[J]. Am Health Drug Benefits，2015，8(Spec Feature):66-69. Byrd JC, Furman RR, Coutre SE, Flinn IW, Burger JA, Blum KA, Grant B, Sharman JP, Coleman M, Wierda WG, Jones JA,

［26］Zhao W, Heerema NA, Johnson AJ, Sukbuntherng J, Chang BY, Clow F, Hedrick E, Buggy JJ, James DF, O'Brien S. Targeting BTK with ibrutinib in relapsed chronic lymphocytic leukemia[J].N Engl J Med， 2013 ，369(1):32-42. Guo W, Liu R, Bhardwaj G, Yang JC, Changou C, Ma AH, Mazloom A, Chintapalli S, Xiao K, Xiao W, Kumaresan P,

［27］Sanchez E, Yeh CT, Evans CP, Patterson R, Lam KS, Kung HJ. Targeting Btk/Etk of prostate cancer cells by a novel dual inhibitor[J].Cell Death Dis ，2014，5:e1409.

2016-06-03)

10. 3969/j. issn. 1672-8521. 2016. 03. 018

國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（81372050）；

陳旭林，主任醫(yī)師（E-mail: xulinchen@126.com）