黃仨，李瑞好，朱燁妍，付裕，張韋深，劉瓊

（中山大學(xué)新華學(xué)院，廣東廣州 510520）

廣金錢草生物堿最大耐受試驗(yàn)

黃仨，李瑞好，朱燁妍，付裕，張韋深，劉瓊*

（中山大學(xué)新華學(xué)院，廣東廣州 510520）

該實(shí)驗(yàn)用硫酸水溶液結(jié)合超聲技術(shù)處理提取廣金錢草生物堿，經(jīng)一次性灌胃于昆明種小鼠，并觀察其一周給藥后反應(yīng)，結(jié)果表明小鼠最大耐受量為55 g/kg，為以后藥理研究提供用藥劑量設(shè)置依據(jù)。

廣金錢草；生物堿；最大耐受劑量

廣金錢草始載于肖步丹所著的《嶺南采藥錄》，又名廣東金錢草、金錢草、銅錢草、落地金錢、假花生、馬蹄草、銀蹄草及馬蹄香等，統(tǒng)一藥用名稱源于《嶺南草藥志》[1]。根據(jù)2010版中國藥典，廣金錢草[Desmodium styracifolium（Osb.）merr.]為 豆 科山螞蝗屬植物的干燥地上部分，性微寒，味甘、淡，歸膀胱、肝、膽、腎經(jīng)，能清熱去濕、利水通淋、排石。主治泌尿系感染、泌尿系結(jié)石、腎炎水腫、膽囊炎、膽結(jié)石、黃疸型肝炎、小兒疳積及癰腫等。主產(chǎn)于廣東、福建、廣西、湖南等省區(qū)，越南、印度、緬甸亦有分布[2,3]，是兩廣地區(qū)大宗栽培的藥材，是廣東地產(chǎn)藥材。廣金錢草主要含有黃酮、生物堿、酚類、鞣質(zhì)和多糖等成分，還含有揮發(fā)性成分、皂苷、有機(jī)酸等。近年來，關(guān)于廣金錢草藥用成分研究主要集中在對黃酮和水提液的藥理作用方面。而廣金錢草生物堿毒性實(shí)驗(yàn)研究暫未見報(bào)道。該實(shí)驗(yàn)以其一般毒副反應(yīng)為觀察指標(biāo)，觀察小鼠對廣金錢草的最大耐受劑量。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動物

從廣東省實(shí)驗(yàn)動物中心購置昆明種小鼠，體重18～22g，雌雄各半共90只，分5組，每組10只。實(shí)驗(yàn)前12h禁食。

在創(chuàng)建國家森林城市期間，濟(jì)寧堅(jiān)持城鄉(xiāng)統(tǒng)籌上下聯(lián)動、四級聯(lián)創(chuàng)一體推進(jìn)，山水林田湖草系統(tǒng)治理，實(shí)施城區(qū)森林網(wǎng)絡(luò)、環(huán)城森林、森林村鎮(zhèn)、山區(qū)森林生態(tài)屏障、濕地生態(tài)環(huán)境、森林健康體系、林業(yè)產(chǎn)業(yè)體系、森林文化旅游體系、森林管護(hù)能力、科技支撐體系等10項(xiàng)重點(diǎn)建設(shè)任務(wù)，以及“水韻圣城森林濟(jì)寧”大綠化行動。今年10月成功創(chuàng)建為國家森林城市，鄒城市、曲阜市成功創(chuàng)建為縣級國家森林城市，市級以上森林公園16處，其中國家級3處，初步形成區(qū)域化森林城市群。

表1 小鼠對廣金錢草生物堿的毒副反應(yīng)觀察（n=10）

1.2 藥物

（6）查看空氣儲罐進(jìn)氣閥門和出氣閥門的開啟、關(guān)閉是否有醒目指示，防止由于操作人員的誤操作而導(dǎo)致空氣儲罐內(nèi)部壓力急劇上升從而引起爆炸。

1組（0.140g/g），給藥后3d內(nèi)全部死亡；2組（0.105g/g）給藥后3h內(nèi)全部死亡；3組（0.070g/g）給藥后3h內(nèi)全部死亡；4組（0.035g/g）給藥后12h內(nèi)無死亡，觀察48h無死亡。

根據(jù)2010年版中華人民共和國藥典一部收載，廣金錢草成人口服劑量15～30g/d。預(yù)實(shí)驗(yàn)：取35g干燥粗提物，溶于10mL水中得溶液。以0.140g/ g（0.4mL/10g），0.105g/g（0.3mL/10g），0.070g/ g(0.2mL/10g)，0.035g/g(0.1mL/10g)，分別灌胃，不足0.8mL組用水補(bǔ)齊，每組10只小鼠。

1.3 給藥量

廣金錢草由市藥材公司購入，經(jīng)本校藥學(xué)系鑒定。按照范樹國等硫酸水溶液結(jié)合超聲技術(shù)處理提取廣金錢草生物堿[4]。取廣金錢草粉末100 g，分別置于2 000mL燒杯中，用1%H2SO4溶液1 000mL浸泡48 h以上，超聲處理30min。所得酸水液用石灰中和至pH值為7，放置后過濾，濾液用濃鹽酸酸化至pH值1～2，并加入食鹽，抽濾，所得濾液用酒精燈蒸干備用，測得生物堿含量為17.5g/100g生藥。

現(xiàn)代學(xué)徒制通過校企深度合作與教師、師傅的聯(lián)合傳授基于邊工作邊學(xué)習(xí)的職業(yè)教育制度，結(jié)合了學(xué)歷職業(yè)教育和在職職業(yè)培訓(xùn)的優(yōu)點(diǎn)，是理想的高等職業(yè)教育形式。

1.4 方法

對死亡小鼠進(jìn)行解剖發(fā)現(xiàn)：胃壁完整，胃內(nèi)容物和胃壁為深褐色，心肺鮮紅，未見出血點(diǎn)、壞死灶；肝顏色暗紅，無明顯腫脹，腎、腸等臟器未見明顯異常。2只小鼠死亡后解剖情況大致相同。初步判斷動物的死亡與生物堿的毒性有關(guān)，有關(guān)生物堿的毒性成分有待進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。該實(shí)驗(yàn)選取0.070～0.035g/g進(jìn)行最大耐受量實(shí)驗(yàn)。

每組小鼠以0.85∶1.00劑量遞增，按小鼠體重計(jì)算用藥量，加水至0.5mL胃內(nèi)灌注。給藥后連續(xù)觀察7d，觀察小鼠是否出現(xiàn)聳毛、臥、耳殼蒼白，或充血、突眼、步履蹣跚、肌肉癱瘓、呼吸困難、昏迷、抽搐及大小便失禁等。

2 結(jié)果

第4組小鼠66%有輕度反應(yīng)，第5組小鼠100%出現(xiàn)嚴(yán)重反應(yīng)，但均于第3天后恢復(fù)正常（見表1）。故小鼠最大耐受量取第4組、第5組平均值0.055g/g （55g/kg）。

隨著我國各個領(lǐng)域企業(yè)的不斷發(fā)展，商業(yè)經(jīng)濟(jì)領(lǐng)域的發(fā)展規(guī)模也在不斷擴(kuò)大，在各式各樣的企業(yè)中，財(cái)務(wù)管理所涉及的管理工作已經(jīng)不再局限于企業(yè)各個階段的數(shù)據(jù)分析以及整理反饋，傳統(tǒng)的管理模式已經(jīng)不能使企業(yè)發(fā)展得到滿意的效果。就當(dāng)今企業(yè)而言，企業(yè)運(yùn)作的核心與資金鏈的把控都與財(cái)務(wù)管理息息相關(guān)，企業(yè)的財(cái)務(wù)部門可以為企業(yè)的發(fā)展提供資金方案，確保企業(yè)的正常運(yùn)作，從而使企業(yè)的發(fā)展可以更加穩(wěn)定，因此，企業(yè)的財(cái)務(wù)管理在決策和管理上是非常重要的，因此，在財(cái)務(wù)管理上要科學(xué)合理的進(jìn)行管制。在經(jīng)濟(jì)快增長的新中國，財(cái)務(wù)管理在管理模式上要適當(dāng)加以改進(jìn)。

3 討論

現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)證明，廣金錢草有增加犬血漿中膽囊收縮素含量使膽囊明顯收縮的利膽[5，6]、利水利鈉的利尿作用，經(jīng)證實(shí)大于鉀鹽（灰分）的作用[7]。使腎中草酸鈣晶體形成程度比成石組明顯減輕，有抗尿路結(jié)石[8，9]。在心血管方面，研究證實(shí)廣金錢草可增加冠脈血流量，降低冠脈阻力指數(shù)，降低心肌耗氧量；使腦、腎、股動脈血流量增加，腎血管阻力下降，血壓下降。還能對抗垂體后葉素引起的冠脈血流量減少及血壓升高，預(yù)防垂體后葉素引起的家兔急性心肌缺血和心律失常[2，3，10]。廣金錢草醇提物對白色念珠菌有一定抑制作用[11]。廣金錢草有提高小鼠學(xué)習(xí)記憶能力，抗缺氧能力，益智效果與其腦保護(hù)作用有關(guān)。廣金錢草黃酮在體內(nèi)和體外有抗血栓作用[1]。

已有實(shí)驗(yàn)得出廣金錢草小鼠腹腔給藥半數(shù)致死量（LD50）為（11.57±1.48）g（生藥）/kg，灌胃（400g/kg）7d內(nèi)無小鼠死亡。給小鼠腹腔注射廣金錢草黃酮的LD50為（1 583±251）mg/kg[12]。該研究顯示廣金錢草生物堿的最大耐受量為0.055g/g（55g/kg）。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)廣金錢草生物堿的總還原能力、-OH及超氧陰離子清除率三方面作用，證實(shí)廣金錢草生物堿有清除-OH及超氧陰離子作用，總還原能力與生物堿含量有關(guān)。而現(xiàn)在藥理研究多集中在廣金錢草黃酮、多糖等三分成，而對廣金錢草生物堿有藥理作用研究暫未見詳細(xì)全面的報(bào)道，因此深入研究廣金錢草生物堿藥理作用，對全面認(rèn)識了解廣金錢藥理作用及機(jī)制有重要意義，值得深入探討。

[1]金淑琴.金錢草、廣金錢草、連錢草的考證及臨床應(yīng)用[J].首都醫(yī)藥,2001,8(11):54.

[2]國家中醫(yī)藥管理局《中華本草》編委會.中華本草[M].上海:上?？茖W(xué)技術(shù)出版社,1999:454.

[3]《廣東中藥志》編輯委員會.廣東中藥志(第1卷)[M].廣州:廣東科學(xué)技術(shù)出版社,1991:17.

[4]范樹國,王恩忠,邱璐,等.廣金錢草中生物堿的提取方法[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2011，39(1):301-303.

[5]李方淑,孫斌,趙攀,等.健康人體對廣金錢草總黃酮膠囊單次給藥的耐受試驗(yàn)研究[J].2014,14(12):1074-1077.

[6]劉敬軍,鄭長青,周卓,等.廣金錢草、木香對犬膽囊運(yùn)動及血漿CCK含量影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].四川中醫(yī),2008,26(4):31.

[7]劉學(xué),崔健,陳新.廣金錢草現(xiàn)代研究進(jìn)展[J].長春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào),2006,22(4):84.

[8]李惠芝,莊利民.廣金錢草抑制一水草酸鈣結(jié)晶生長有效部分的研究[J].沈陽藥學(xué)院學(xué)報(bào),1992,9(3):194.

[9]王涌泉,朱寶軍,安瑞華,等.金錢草注射液抑制鼠草酸鈣結(jié)石形成作用的研究[J].中華泌尿外科雜志,1999,20(11):689.

[10]梅全喜.現(xiàn)代中藥藥理與臨床應(yīng)用手冊[M].北京：中國中醫(yī)藥出版社,2008:593.

[11]顧麗貞,張白舜,南繼紅.四川大金錢草與廣金錢草抗炎作用的研究[J].中藥通報(bào),1988,13(7):40.

[12]范文昌,全喜,海標(biāo).金錢草的藥理作用和臨床應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國藥房，2010,21(31):2961-2963.

Desmodium Styracifolium Alkaloids Maximum Tolerance Test

Huang Sa , Li Rui-hao, Zhu Ye-yan, Fu Yu , Zhang Wei-shen , Liu Qiong*
(Xinhua College of Sun Yat-sen Univesity, Guangdong Guangzhou 510520)

The experiment with aqueous sulfuric acid treatment combined with ultrasonic technology to extract Desmodium styraci foLium alkaloids, the one-time intragastric to Kunming mice and observed a week after the administration of its response, the result showed that the maximum tolerated dose in mice was 55 g/kg, which provided the basis for the dose setting of pharmacological studies.

Desmodium styracifolium; Alkaloids; Maximum tolerated dose

R284

A

2096-0387（2016）01-0049-03

項(xiàng)目：2015廣東省大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練項(xiàng)目（項(xiàng)目編號22）；2014中山大學(xué)新華學(xué)院重點(diǎn)課程“實(shí)驗(yàn)生理科學(xué)”；2013中山大學(xué)新華學(xué)院機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)示范中心（項(xiàng)目編號2013S001）。

黃仨（1995-），男，廣東廣州人，本科在讀，研究方向：藥學(xué)。

劉瓊（1969-），女，廣東廣州人，碩士，實(shí)驗(yàn)師，研究方向：從事基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)和實(shí)驗(yàn)室管理方面的研究及藥理學(xué)研究。