祛痰通絡(luò)湯對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響*

王麗華劉麗秋楊鵬鵬王福榮于俊生鄭　燕李平海李淑秀

（1.青島大學(xué)附屬海慈醫(yī)院，山東　青島266003；2.青島大學(xué)附屬醫(yī)院，山東　青島266000；3.中國人民解放軍91286部隊(duì)門診部，山東　青島266000）

祛痰通絡(luò)湯對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響*

王麗華1劉麗秋2△楊鵬鵬2王福榮1于俊生1鄭燕1李平海3李淑秀1

（1.青島大學(xué)附屬海慈醫(yī)院，山東青島266003；2.青島大學(xué)附屬醫(yī)院，山東青島266000；3.中國人民解放軍91286部隊(duì)門診部，山東青島266000）

目的觀察祛痰通絡(luò)湯對(duì)糖尿病腎病大鼠腎組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78，Caspase12的影響。方法高糖高脂飼料聯(lián)合腹腔注射STZ制備糖尿病腎病模型，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、祛痰通絡(luò)湯組、四苯基丁酸組，干預(yù)8周。觀察各組24 h尿蛋白定量、肌酐、腎臟病理學(xué)變化；免疫組化和Western blot檢測(cè)腎組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78，Caspase-12的表達(dá)。結(jié)果經(jīng)過祛痰通絡(luò)湯治療后，大鼠體質(zhì)量上升，24 h尿蛋白定量、糖化血紅蛋白、肌酐下降；病理改變減輕；模型組腎組織的GRP78、Caspase12表達(dá)明顯升高；祛痰通絡(luò)湯組GRP78、Caspase-12表達(dá)明顯降低（均P＜0.05）。結(jié)論糖尿病腎病大鼠腎臟中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)明顯增強(qiáng)，祛痰通絡(luò)湯降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，可能是其腎臟保護(hù)作用的重要機(jī)制。

糖尿病腎病祛痰通絡(luò)湯內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激

【Abstract】Objective：To investigate the effects of Qutan Tongluo Decoction on the expression of endoplasmic reticulum stress-related molecules GRP78 and Caspase12 in renal of diabetic nephropathy rats.M ethods：The diabetic nephropathy ratmodelwas induced by feeding high-glucose high-fat diet in combination with intraperitoneal injection of STZ.Wistar rats were random ly divided into 4 groups：the normal control group，the model group，Qutan Tongluo Decoction group，and 4-phenyl butyric acid treatment（PBA group）.At the end of 8 weeks，24-hour urinary protein excretion，serum creatinine（Scr）and renal pathological changeswere determined；the expression of glucose-regulated protein 78（GRP78）and Caspase-12 were examined by immunohistochemistry and western blotting respectively.Results：Qutan Tongluo Decoction treatment raised bodymass of rats，reduced 24-hour urinary protein excretion，glycosylated hemoglobin，and serum creatinine，and relieved pathological changes. The expressions of GRP78 and Caspase12 proteins in themodel group was significantly higher；The expressions of GRP78 and Caspase12 proteins in Qutan Tongluo Decoction group dropped significantly（P＜0.05）.Conclusion：Endoplasmic reticulum stress is abundantly expressed in the kidneys of diabetic nephropathy rats.Qutan Tongluo Decoction decreases ER stress，whichmay be an importantmechanism in renal protective effects.

【Key words】Diabetic nephropathy；Qutan Tongluo Decoction；Endoplasmic reticulum stress

糖尿病腎病是糖尿病常見的微血管并發(fā)癥，是導(dǎo)致終末期腎?。‥SRD）的重要原因，發(fā)展為ESRD的比例高達(dá)20%～40%［1］，目前其發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，缺乏有效的治療手段。多數(shù)人認(rèn)為腎臟血流動(dòng)力學(xué)改變、血糖、蛋白質(zhì)及脂肪代謝紊亂是糖尿病腎病的病變基礎(chǔ)。目前越來越多的證據(jù)表明［2］，持續(xù)高糖和蛋白尿誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激是糖尿病腎臟病的重要發(fā)病機(jī)制［1］?！捌⒛I氣虛，痰瘀阻絡(luò)”是糖尿病腎病的重要病機(jī)，為此擬定了以祛痰通絡(luò)法為主的中藥復(fù)方，我們前期研究已明確其降低尿蛋白，具有保護(hù)足細(xì)胞、改善糖尿病早期腎臟損傷的作用［3］，而其機(jī)制仍不十分明確。本研究觀察祛痰通絡(luò)湯對(duì)糖尿病大鼠腎組織中內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激的影響，為糖尿病腎病的治療提供依據(jù)。

1　材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物50只成年雄性Wistar大鼠，8周齡，體質(zhì)量200～220 g［由青島市動(dòng)物研究所提供，動(dòng)物許可證號(hào)SCXK（魯）201300001］。室溫23～25℃，濕度40%～60%，12 h交替照明，大鼠自由進(jìn)食和飲水。

1.2試藥與儀器祛痰通絡(luò)湯組成：當(dāng)歸12 g，川芎12 g，赤芍12 g，白術(shù)15 g，土茯苓30 g，制大黃10 g，瓦楞子30 g，僵蠶30 g，海藻15 g，葫蘆巴15 g。由青島市中醫(yī)醫(yī)院制劑室制成滅菌濃煎密封制劑，藥物相對(duì)密度為1.0 g/L，生藥含量為1.5 g/mL。鏈脲佐菌素（STZ）、4-苯基丁酸（4-PBA）（美國Sigma公司）；兔抗鼠GRP78抗體，兔抗鼠Caspase-12抗體（abcam公司）；PV-9000二步法免疫組化試劑（北京中杉生物技術(shù)有限公司）；BCA蛋白定量試劑盒（碧云天公司）。全自動(dòng)生化分析儀（日本olympus AU640）；RM2135型石蠟切片機(jī)（LEICA，美國）；顯微BMJ-Ⅲ型病理組織包埋冷凍臺(tái)（常州中威電子儀器廠）；凝膠成像系統(tǒng)（美國UVP公司）。

1.3分組與造模50只成年雄性Wistar大鼠，適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，按隨機(jī)數(shù)字表法抽取10只為正常對(duì)照組，余40只建立糖尿病腎病大鼠模型。正常對(duì)照組予以普通顆粒飼料喂養(yǎng)；其余大鼠均予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，喂養(yǎng)8周后，禁食12 h，將STZ溶于0.1mmol/L的枸櫞酸緩沖液（pH 4.3）中，腹腔注射STZ 30 mg/kg，72 h后尾靜脈取血，檢測(cè)血糖≥16.7 mmol/L，為糖尿病大鼠造模成功［1］。造模同時(shí)，正常對(duì)照組給予等體積0.1mmol/L的枸櫞酸緩沖液腹腔注射。40只造模大鼠中，2只大鼠血糖不符合糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)被剔除，死亡4只。繼續(xù)高糖高脂飼料喂養(yǎng)6周，4只大鼠不符合糖尿病腎病標(biāo)準(zhǔn)（24 h尿蛋白定量大于20μg/min）被剔除，余30只糖尿病腎病大鼠隨機(jī)分為模型組（10只）、祛痰通絡(luò)湯組（10只）、4-PBA組（10只）。

1.4干預(yù)措施祛痰通絡(luò)湯組大鼠按2 mL/100 g劑量灌胃，4-PBA組大鼠按1 g/kg的劑量每日灌胃，治療8周。正常對(duì)照組和模型組予等量生理鹽水灌胃。干預(yù)過程中模型組、祛痰通絡(luò)湯組、4-PBA組大鼠各死亡2只。

1.5標(biāo)本采集與檢測(cè)1）24 h尿量白定量：第8周末，收集各組大鼠第8周末的24 h尿液，ELISA法檢測(cè)24 h尿蛋白定量。各組大鼠禁食12 h，處死取材，具體如下：以10%水合氯醛（4 mL/kg）腹腔麻醉試驗(yàn)大鼠，腹主動(dòng)脈取血6 mL，分別置于EDTA抗凝管3 mL檢測(cè)糖化血紅蛋白和促凝管內(nèi)3mL檢測(cè)肌酐。2）免疫組化檢測(cè)：大鼠血液采集后，取出雙側(cè)腎臟，生理鹽水洗凈，左右腎各取1/2放入10%甲醛中固定，作免疫組織化學(xué)檢測(cè)。采用SP法。2μm腎組織切片，常規(guī)脫蠟至水，一抗GRP78（1∶200），CHOP（1∶100）稀釋，PBS代替一抗作陰性對(duì)照，DAB染色，顯微鏡控制下顯色，棕黃色顆粒為陽性。3）Western blot檢測(cè)：剩余1/2腎臟放入EP管置于-80℃保存，行Western blot檢測(cè)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78，Caspase12的表達(dá)。取-80℃保存腎臟組織，提取并測(cè)定蛋白含量；取樣品加入loading buffer，配制SDS-PAGE膠，取樣品上樣蛋白20μg，100 V電泳；0.22μm PVDF膜（甲醛處理），40 min，脫脂牛奶封閉1 h，加入一抗（1∶1000），4℃過夜，TBST清洗3次，每次5 min；加入二抗（1∶30000），室溫1 h，TBST清洗3次，每次5min，顯影，所得結(jié)果以內(nèi)參GAPDH校正。

1.5統(tǒng)計(jì)學(xué)處理應(yīng)用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（表示，成組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2　結(jié)　果

2.1各組大鼠一般狀況比較見表1。模型組大鼠出現(xiàn)典型的多飲、多尿、多食、體質(zhì)量減輕等糖尿病癥狀，毛色暗淡，血糖持續(xù)≥16.7 mmol/L。祛痰通絡(luò)湯組大鼠體質(zhì)量增加最多，明顯高于模型組（P＜0.05），祛痰通絡(luò)湯組與4-PBA組大鼠體質(zhì)量相比，無明顯差別（P＞0.05）。與正常對(duì)照組相比，模型組糖化血紅蛋白、肌酐水平明顯升高（P＜0.05）；祛痰通絡(luò)湯組的肌酐較模型組明顯下降（P＜0.05），與4-PBA組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），4-PBA組糖化血紅蛋白較模型組及祛痰通絡(luò)湯組明顯下降（P＜0.05）。

表1　各組大鼠一般情況比較（

表1　各組大鼠一般情況比較（

與正常對(duì)照組比較，▲P＜0.05；與模型組比較，*P＜0.05；與4-PBA組比較，△P＜0.05。下同。

組別n肌酐（μmol/L）體質(zhì)量（g）　糖化血紅蛋白（%）正常對(duì)照組10 23.8±2.56模型組8 55.9±5.7▲祛痰通絡(luò)湯組8 34.6±4.38▲*427.18±9.56*2.62±0.33 370.04±12.27 6.97±0.65▲434.54±9.38*6.60±0.31▲△4-PBA組8 31.9±2.27▲*425.60±7.27*4.67±0.58▲*

2.2各組大鼠干預(yù)前后24 h尿蛋白定量比較見表2。治療前，模型組、祛瘀通絡(luò)湯組及4-PBA組的24 h尿蛋白定量較正常對(duì)照組明顯升高（P＜0.05），模型組及治療組的24 h尿蛋白定量無明顯差別（P＞0.05）。治療8周后，祛痰通絡(luò)湯組24 h尿蛋白量較模型組明顯下降（P＜0.05），與4-PBA組相比無明顯差別（P＞0.05），正常對(duì)照組的24 h尿蛋白定量無明顯變化（P＞0.05）。

表2　各組大鼠干預(yù)前后24 h尿蛋白定量比較（μg/min，

表2　各組大鼠干預(yù)前后24 h尿蛋白定量比較（μg/min，

組別n干預(yù)前　干預(yù)后正常對(duì)照組10 3.70±0.56 3.72±0.41模型組8 20.58±2.31▲26.35±7.31▲祛痰通絡(luò)湯組8 21.48±2.48▲16.78±3.65▲*4-PBA組8 20.31±3.68▲17.19±2.29▲*

2.3各組干預(yù)后GRP78、Caspase12免疫組化結(jié)果見圖1，圖2。在正常對(duì)照組，GRP78在腎小管上皮細(xì)胞中少量表達(dá)；模型組腎小管表達(dá)顯著增多，腎小球呈陽性表達(dá)；祛痰通絡(luò)湯組及4-PBA組腎小球及腎小管表達(dá)明顯低于模型組。Caspase12主要位于腎小管上皮細(xì)胞內(nèi)，正常對(duì)照組表達(dá)弱，模型組表達(dá)明顯增強(qiáng)（P＜0.05），祛痰通絡(luò)湯組及4-PBA組較模型組明顯降低（P＜0.05）。祛痰通絡(luò)湯組與4-PBA組相比無明顯差別。

圖1　各組大鼠第8周GRP78免疫組化圖片（DAB染色）

圖2　各組大鼠第8周Caspase12免疫組化圖片（DAB染色）

2.4各組干預(yù)后Western blot檢測(cè)結(jié)果比較見表3，圖3。與正常對(duì)照組相比，模型組GRP78、Caspase12表達(dá)明顯升高（P＜0.05）。祛痰通絡(luò)湯治療后，GRP78蛋白及Caspase12蛋白表達(dá)較模型組明顯降低（P＜0.05）。祛痰通絡(luò)湯組與4-PBA組相比無明顯差別。

3　討　論

越來越多的證據(jù)表明，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激可能是腎臟發(fā)病的一個(gè)重要機(jī)制。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激與腎小球疾病的蛋白尿有關(guān)［4］；糖尿病腎病中，PERK/eIF2α和IRE1/JNK途徑被激活，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激反應(yīng)上調(diào)［5］。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激主要通過激活內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的3種跨膜蛋白：雙鏈RNA依賴的蛋白激酶樣ER激酶、活化轉(zhuǎn)錄因子6和跨膜蛋白激酶1［6］，這3種膜蛋白也被稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)感受器［7］。正常情況下，與內(nèi)質(zhì)網(wǎng)葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78）結(jié)合，處于無活性狀態(tài)，當(dāng)未折疊蛋白或錯(cuò)誤折疊蛋白在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔蓄積時(shí)，這3種蛋白可與GRP78解離，下游的信號(hào)通路被激活。

表3　各組大鼠第8周末GRP78，Caspase12蛋白表達(dá)比較（

表3　各組大鼠第8周末GRP78，Caspase12蛋白表達(dá)比較（

組　別n GRP78/GAPDH Caspase12/GAPDH正常對(duì)照組10 0.30±0.03 0.24±0.05模型組8 1.04±0.20▲0.84±0.20▲祛痰通絡(luò)湯組8 0.46±0.11▲*0.51±0.11▲*4-PBA組8 0.47±0.08▲*0.52±0.10▲*

圖3　各組干預(yù)后GRP78，Caspase12蛋白表達(dá)電泳圖

GRP78［8］又稱免疫球蛋白重鏈結(jié)合蛋白，是熱休克蛋白70 kDa家族成員之一，是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中重要的分子伴侶，幫助蛋白質(zhì)的折疊和成熟，其表達(dá)增高是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生和存在的標(biāo)志［9］。Fukami等［10］發(fā)現(xiàn)，AGEs引起大鼠足細(xì)胞GPR78表達(dá)上調(diào)，通過一系列反應(yīng)誘導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，最終導(dǎo)致足細(xì)胞凋亡。Chen等［11］對(duì)糖尿病腎病小鼠的研究發(fā)現(xiàn)，小鼠腎組織GRP78水平及尿蛋白水平顯著增高，并伴有顯著腎小球硬化，與我們的研究一致。Caspase-12屬于半胱天冬酶家族，位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)外膜，是介導(dǎo)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激凋亡的關(guān)鍵蛋白酶，是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡特有的［12］。Marie L等［13］發(fā)現(xiàn)20周齡糖尿病db/db小鼠近端小管Caspase-12的mRNA表達(dá)明顯升高，蛋白表達(dá)上調(diào)。本研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病大鼠模型組Caspase-12蛋白表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05），其分布范圍和表達(dá)強(qiáng)度明顯高于正常對(duì)照組。祛痰通絡(luò)湯可降低Caspase-12蛋白表達(dá)水平。

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為本病多屬于“消渴”“水腫”“尿濁”“脹滿”“癃閉”“關(guān)格”的范疇。糖尿病腎病與“痰瘀”有密切關(guān)系，痰瘀是糖尿病腎病進(jìn)展過程中的必然產(chǎn)物［14］，并形成惡性循環(huán)，影響腎的氣血運(yùn)行和津液輸布。消渴日久，纏綿不愈，毒邪入絡(luò)，伏藏不去，毒自內(nèi)生，損害腎臟，絡(luò)脈瘀阻，故擬定祛痰通絡(luò)湯以活血通絡(luò)治療。該方由當(dāng)歸芍藥散為基礎(chǔ)方加減而來，以當(dāng)歸、川芎、赤芍活血通絡(luò)為君，以瓦楞子、僵蠶、海藻消痰軟堅(jiān)，白術(shù)健補(bǔ)脾氣，葫蘆巴溫腎祛濕，共為臣藥，佐以赤芍除血痹，破堅(jiān)積；大黃、土茯苓解毒排毒，泄?jié)嵬ńj(luò)。以通為補(bǔ)，祛邪為務(wù)，緩攻緩補(bǔ)，使泄而不傷正，補(bǔ)而不滯邪，共奏祛痰通絡(luò)、邪祛正安之功效。

本研究應(yīng)用高糖高脂飼料聯(lián)合腹腔注射STZ制備糖尿病腎病模型，隨機(jī)分為正常對(duì)照組、模型組、祛痰通絡(luò)湯組、4-PBA組。4-PBA酸能夠穩(wěn)定蛋白構(gòu)象，改善內(nèi)質(zhì)網(wǎng)折疊能力，降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，目前已廣泛用于動(dòng)物模型［15-16］。我們應(yīng)用免疫組化和Western blot對(duì)糖尿病腎病大鼠的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)分子研究，發(fā)現(xiàn)模型組GRP78蛋白表達(dá)水平明顯升高（P＜0.05），提示糖尿病腎病大鼠腎組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激發(fā)生，4-PBA抑制內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，改善腎功能，降低尿蛋白，與以往的研究一致。祛痰通絡(luò)湯治療后，GRP78水平較模型組明顯降低（P＜0.05），說明祛痰通絡(luò)湯能夠改善糖尿病腎病內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，免疫組化與Western-blot的研究結(jié)果一致，與以往的研究一致［17］；模型組Caspase-12的表達(dá)明顯增強(qiáng)（P＜0.05），祛痰通絡(luò)湯干預(yù)后，其蛋白表達(dá)明顯降低（P＜0.05）；治療前，模型組及治療組的24 h尿蛋白定量較對(duì)照組明顯升高，治療8周后，祛痰通絡(luò)湯組24 h尿蛋白量較模型組明顯下降（P＜0.05）。

本研究發(fā)現(xiàn)祛痰通絡(luò)湯能夠降低尿蛋白，改善腎功能指標(biāo)，降低內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激相關(guān)蛋白GRP78、Caspase12的表達(dá)，說明祛痰通絡(luò)湯可以減輕糖尿病腎病大鼠腎組織中的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，延緩糖尿病腎病大鼠腎功能的進(jìn)展。

［1］Lindenmeyer MT，Rastaldi MP，Ikehata M，et al．Proteinuria and hyperglycemia induce endoplasmic reticulum tress［J］．J Am Soc Nephrol，2008，19（11）：2225-2236．

［2］Ron D，Walter P.Signal integration in the endoplasmic reticulum unfolded protein response［J］.Nat Rev Mol Cell Biol，2007，8（7）：519-529.

［3］王麗華，陶璐，孫云山，等.祛痰通絡(luò)湯對(duì)早期糖尿病腎病大鼠足細(xì)胞podocin表達(dá)的影響［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2013，31（4）：876-878.

［4］Cybulsky AV.Endoplasmic reticulum stress in proteinuric kidney disease［J］.Kidney Int，2010，77（3）：187-193.

［5］Cunard R，Sharma K.The endoplasmic reticulum stress response and diabetic kidney disease［J］.Am JPhysiol Renal Physiol，2011，300（5）：1054-1061.

［6］Glembotski CC．The role of the unfolded protein response in theheart［J］．JMolCellCardio1，2008，44（3）：453-459．

［7］Ron D，Walter P.2007.Signal integration in the endoplasmic retic-ulum unfolded protein response［J］．Nature Reviews Molecular CellBiology，2007，8（7）：519-529.

［8］David A，Ojeiru E.Gene expression in primary cultured astrocytes affected by aluminum：alteration of chaperons involved in protein folding［J］.Environm Heal PreventMed，2011，16（1）：16-24.

［9］Arisa H，Eric C.Redox signaling loops in the unfolded protein response［J］.CellulSignal，2012，24（8）：1548-1555.

［10］Fukami K，Yamagishi S，Ueda S，et al．Role of AGEs in diabeticnephropathy［J］.CurtPharm Des，2008，14（10）：946-952．

［11］Chen Y，Liu CP，Xu KF，et al.Effect of taurine-con jugated ursodeoxy cholic acid on endoplasmic reticulum stress and apoptosis induced by advanced glycation end products in cultured mouse podocytes［J］.Am JNephrol，2008，28（6）：1014-1022．

［12］SergeevIN.Genistein induces Ca2+-mediated，calpain/caspase-12 dependent apoptosis in breastcancer cells［J］.Biochem Biophys Res Commun，2004，321：462-467.

［13］Marie-Luise Brezniceanu，Cara J，Lau，Nicolas Godin，etal．Reactive oxygen species promote Caspase-12 expression and tubular apoptosis in diabetic nephropathy［J］.JAm Soc Nephrol，2010，21（6）：943-954.

［14］于俊生.痰瘀相關(guān)學(xué)說與疑難病治療［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：280．

［15］Ayala P，Montenegro J，Vivar R，et al．Attenuation of endoplasmic reticulum stress using the chemical chaperone 4-phenylbutyric acid prevents cardiac fibrosis induced by isoproterenol［J］．Exp MolPathol，2012，92：97-104．

［16］Park CS，Cha H，Kwon EJ，etal．The chemical chaperone 4-phenylbutyric acid attenuates pressure-overload cardiac hypertrophy by alleviating endoplasmic reticulum stress［J］．Biochem BiophysRes Commun，2012，421：578-584．

［17］齊偉，牟嬌，葉自林，等.4-苯基丁酸鈉對(duì)大鼠糖尿病腎病的治療作用［J］.中國糖尿病雜志，2010，18（10）：781-783.

Effect of Qutan Tongluo Decoction on Protein Expression of Endoplasm ic Reticulum Stress in Renal of Diabetic Nephropathy Rats

WANG Lihua，LIU Liqiu，YANG Pengpeng，et al.Haici Hospital Affiliated of Qingdao University，Shandong，Qingdao 266003，China.

R285.5

A

1004-745X（2016）09-1667-04

10.3969/j.issn.1004-745X.2016.09.007

2016-05-12）

山東省青島市中醫(yī)局計(jì)劃項(xiàng)目（2015-ZYY005）

（電子郵箱：liuliqiu@medmail.com.cn）