楊曉明　李彩紅　孫冬霞　竇海燕

邯鄲市婦幼保健院1婦一科，2病理科，河北　邯鄲　056001

α-SMA及TIMP在宮頸癌患者中的表達及臨床意義分析

楊曉明1#李彩紅1孫冬霞2竇海燕1

邯鄲市婦幼保健院1婦一科，2病理科，河北邯鄲056001

目的本研究旨在對α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）及基質金屬蛋白酶抑制劑（TIMP）在宮頸癌患者中的表達及臨床意義分析，為臨床診斷與治療提供參考。方法對120例宮頸癌患者的臨床資料進行回顧性研究，分析α-SMA及TIMP1和TIMP2在不同臨床分期及預后的患者中表達情況。以本院100例同期健康體檢者設為對照組。結果隨著宮頸癌患者臨床分級增高α-SMA及TIMP1和TIMP2表達逐步增強，且不同分級之間具有統(tǒng)計學差異性（P＜0.05）；在相同臨床分期患者中，α-SMA及TIMP1和TIMP2與患者預后有關。結論α-SMA及TIMP1和TIMP2蛋白表達與宮頸癌患者臨床分期及預后密切相關，可作為臨床診斷宮頸癌和患者預后判斷的重要標志物。

宮頸癌；基質金屬蛋白酶抑制劑；α-平滑肌肌動蛋白；臨床分期；預后

Prog，2016，14（7）

宮頸癌是臨床上最常見的婦科惡性腫瘤，嚴重影響患者生活質量，給患者和家庭帶來沉重的經(jīng)濟和心理負擔［1-2］。已有證據(jù)顯示宮頸癌發(fā)病率和病死率有逐年升高趨勢。宮頸癌的發(fā)病原因有多種，但是其確切的分子機制尚不明確，臨床上也無有效的治療方法［3］。因此，探索其發(fā)病與預后的相關分子標志物，提高臨床早期診斷水平具有重要意義。α-平滑肌肌動蛋白（α-SMA）與細胞的增殖和分化過程密切相關，且參與了多種惡性腫瘤的病理過程［4］；基質金屬蛋白酶是細胞外基質降解與重構生理過程的關鍵酶，也與多種惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切相關［5］。本研究旨在對α-SMA及基質金屬蛋白酶抑制劑（TIMP）在宮頸癌患者中的表達及臨床意義分析，為臨床診斷與治療提供參考。

1　資料與方法

1.1一般資料

對邯鄲市婦幼保健院2010年1月至2014年12月診治的120例經(jīng)病理切片確診的宮頸癌患者為實驗組，取其刷片細胞進行研究?；颊吣挲g41～64歲，平均年齡（51.4±6.8）歲。所有患者均符合世界衛(wèi)生組織WHO對宮頸癌的臨床診斷標準。120例患者中Ⅰ期患者30例，Ⅱ期患者50例，Ⅲ期患者40例。本研究中相同臨床分期的患者所采取的治療方式一致。以本部門同期健康體檢者100例設為對照組，年齡41～63歲，平均年齡（51.3±6.9）歲。兩組受試者在一般資料方面差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。所有患者均知情并簽署知情同意書。排除標準：哺乳期患者；嚴重的肝腎功能異?；颊撸惶悄虿』颊?；心肺功能異?；颊?。

1.2試劑與方法

光學顯微鏡購自日本奧林巴斯公司；α-SMA免疫組化試劑盒購自福州邁新生物技術公司；TIMP1檢測試劑盒購自美國R&D公司；TIMP2檢測試劑盒購自美國Santa Cruz公司。所有操作過程均按照試劑盒說明書進行。

1.3評分標準

對每一研究參數(shù)（α-SMA、TIMP1及TIMP2）選擇10個有代表性的視野，每個視野計數(shù)30個細胞，統(tǒng)計陽性細胞數(shù)及陽性區(qū)域的染色強度。①陽性率計分標準：陽性細胞占據(jù)同類細胞＜5%為0分，＜25%為1分，＜50%為2分，＜75%為3分，＞75%為4分；②染色強度計分標準：無著色為0分，淡棕色為1分，中等棕色為2分，深棕色為3分。統(tǒng)計總分，按照如下標準計分：弱陽性（+）：1～4分，中等陽性（++）：5～8分，強陽性（+++）：9～12分。

1.4統(tǒng)計學分析

數(shù)據(jù)統(tǒng)計采用SPS-S 19.0軟件進行分析，計量資料用均數(shù)±標準差（x±s）表示，組間比較用單因素方差分析，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗，對相同臨床分期、接受類似治療的患者生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-rank顯著性檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2　結果

2.1α-SMA與宮頸癌患者臨床分期的關系

本研究發(fā)現(xiàn)α-SMA表達強度與宮頸癌臨床分期密切相關，隨宮頸癌患者臨床分期的增高α-SMA蛋白陽性率逐步增強，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（表1）

表1　α-SMA與宮頸癌患者臨床分期的關系［n（％）］

2.2TIMP1與宮頸癌患者臨床分期的關系

TIMP1表達強度與宮頸癌臨床分期密切相關，隨宮頸癌患者臨床分期的增高TIMP1蛋白陽性率逐步增強，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（表2）

表2　TIMP1 與宮頸癌患者臨床分期的關系［n（％）］

2.3TIMP2與宮頸癌患者臨床分期的關系

TIMP2表達強度與宮頸癌臨床分期密切相關，隨宮頸癌患者臨床分期的增高TIMP2蛋白陽性率逐步增強，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。（表3）

表3　TIMP2 與宮頸癌患者臨床分期的關系［n（％）］

2.4α-SMA及TIMP1/2與宮頸癌患者預后的關系

Kaplan-Meier生存分析顯示α-SMA和TIMP1/2與宮頸癌患者的預后有關，Log-Rank檢驗（α-SMA：χ2=6.447，P＜0.05；TIMP1：χ2=5.478，P＜0.05；TIMP2：χ2=5.396，P＜0.05），三者陽性程度越高，患者預后越差，且α-SMA（+++）表達患者的生存期最長為60個月，TIMP2（+++）表達患者的生存期最長為72個月，TIMP1（+++）表達患者的72個月后的生存率為20.0%。（圖1）

圖1　α-SMA及TIMP1/2與宮頸癌患者預后的關系

3　討論

宮頸癌是臨床上最常見的婦科惡性腫瘤之一，但是其發(fā)病的確切分子機制尚存在不明確。因此，探索宮頸癌發(fā)病及預后相關的標志物，對臨床相關的新藥開發(fā)及治療具有重要的意義。

以往研究證實α-SMA與多種惡性腫瘤的病理過程密切相關，且SMA高表達是宮頸癌的基質重構及腫瘤惡化的重要標志物［6］。在研究星形細胞腫瘤中CD13和α-SMA的表達及其與CD31陽性微血管相關性的研究中發(fā)現(xiàn)二者均可作為血管周圍的特異性標志物，且與微血管壁缺陷及腫瘤臨床分級相關［7］。在研究鼻咽癌間質組織中腫瘤相關纖維母細胞CD34和α-SMA表達意義的研究中也發(fā)現(xiàn)α-SMA與鼻咽癌的浸潤和轉移密切相關，且與患者預后有一定相關性［8］。在分析乳腺腫瘤組織間質中α-SMA表達意義的研究中也發(fā)現(xiàn)該蛋白的異常增強表達在乳腺腫瘤從良性向惡性轉化過程中發(fā)揮重要作用［9-10］。本研究發(fā)現(xiàn)α-SMA表達強度與宮頸癌臨床分期密切相關，隨宮頸癌患者臨床分期的增高α-SMA蛋白陽性率逐步增強，差異具有統(tǒng)計學意義，且與患者的預后有關。

基質金屬蛋白酶是膠原蛋白降解的主要酶，也是腫瘤細胞發(fā)生轉移的重要參與蛋白［11］。研究發(fā)現(xiàn)胃癌組織高遷移率族蛋白A2與基質金屬蛋白酶-9表達與腫瘤侵襲轉移及患者的預后具有密切的相關性［12］，且基質金屬蛋白酶-2、9及其抑制劑的表達水平也參與了MMI-166對腫瘤發(fā)展的抑制作用過程［13］。基質金屬蛋白酶-9和人抗原蛋白在宮頸癌組織中呈現(xiàn)高表達［14］，且基質金屬蛋白酶-2的表達與宮頸癌患者的臨床分期與預后呈明顯的負相關［15］。同時，基質金屬蛋白酶及其抑制因子參與宮頸癌的浸潤轉移過程［16］，且基質金屬蛋白酶及其抑制因子聯(lián)合檢測對宮頸癌復發(fā)具有重要的臨床預測價值［17］。尹香花等［18］也發(fā)現(xiàn)基質金屬蛋白酶-2及其抑制劑TIMP-2在宮頸癌中呈明顯的高表達，且是患者預后效果的重要指標。本研究發(fā)現(xiàn)TIMP1/2表達強度與宮頸癌臨床分期密切相關，隨宮頸癌患者臨床分期的增高TIMP1/2蛋白陽性率逐步增強，且差異具有統(tǒng)計學意義，表明基質金屬蛋白酶也與宮頸癌的臨床分期和患者預后密切相關。

因此，α-SMA及TIMP1/2蛋白表達與宮頸癌患者臨床分期及預后具有明顯關系，可作為臨床診斷宮頸癌和患者預后判斷的重要標志物。

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The expression and clinical significance of α-SMAand TIMP1/2 in cervical cancer patients

YANG Xiao-ming1#LI Cai-hong1SUN Dong-xia2DOU Hai-yan1
1Department of Obstetrics，2Department of Pathology，Maternal and Child Health Care Center，Handan 056001，Hebei，China

ObjectiveTo investigate the expression level and clinical significance of α-SMA，TIMP1 and TIMP2 in cervical cancer patients，and discuss the role of them in diagnosis and treatment.Method120 cases of cervical cancer patients were retrospectively analyzed，and the expression of α-smooth muscle action（α-SMA）and tissue inhibitor of metalloproteinase（TIMP1）and TIMP2 in patients with different clinical stage and prognosis were compared.In the same period，another 100 normal healthy adults were included as control.ResultThe expression of α-SMA and TIMP1 as well as TIMP2 were increased as the clinical stage escalated，with significant differences observed between different clinical stages（P＜0.05）；For patients with same clinical stage，the expression of α-SMA and TIMP1/2 were negatively associated with patients'prognosis.ConclusionThe expression of α-SMA and TIMP1，TIMP2 are markedly associated with the clinical stage and prognosis of cervical cancer，and may be utilized as predictors for diagnosis and prognosis of cervical cancer patients.

cervical cancer；tissue inhibitors of metalloproteinase；α-SMA；clinical stages；prognosis Oncol

R737.33

A

10.11877/j.issn.1672-1535.2016.14.07.13

2016-03-03）

（corresponding author），郵箱：yangmr23@163.com