尚宗民

摘要 介紹了羊黑疫并發(fā)羊肝片吸蟲病的病原及致病機(jī)理，分析了流行特點與臨床癥狀，并為羊養(yǎng)殖戶及相關(guān)人員提出具體診斷和防治方法，以供參考。

關(guān)鍵詞 羊黑疫并發(fā)羊肝片吸蟲病；診斷；防治

中圖分類號 S858.26 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1007-5739（2016）05-0296-02

羊黑疫并發(fā)羊肝片吸蟲病在羊養(yǎng)殖過程中時常遇到，特別是潮濕低洼沼澤地區(qū)，2種病在疾病發(fā)生發(fā)展過程中相輔相成。肝片吸蟲的幼蟲對肝臟的損傷，使羊黑疫的感染風(fēng)險增高，疾病損傷程度加重，發(fā)病急，臨床癥狀不甚明顯，內(nèi)臟以肝臟實質(zhì)性壞死為特征，但該病原在有氧條件下極難培養(yǎng)，經(jīng)常給羊養(yǎng)殖戶防治該病造成困難。在診斷上必須以2種病原的檢出作為診斷依據(jù)，防治上必須消滅病原、健康羊接種疫苗與驅(qū)蟲，結(jié)合飼養(yǎng)管理綜合防治才能見成效。

1 病原

1.1 B型諾維氏梭菌

B型諾維氏梭菌是一種革蘭氏染色陽性、粗大厭氧性細(xì)菌，B型諾維氏梭菌95 ℃ 15 min仍然存活，105～120 ℃ 5～6 min可滅活，5%苯酚、1%福爾馬林和次氯酸鹽能迅速殺滅其芽孢。

1.2 肝片吸蟲

扁平葉狀，體表有很多小刺，體長2.0～3.5 cm、寬0.5～1.3 cm，蟲體前段為圓錐狀頭錐，頭錐前部有口吸盤，頭錐向下擴(kuò)展變寬形成肩狀，肩后逐漸變窄，肩部水平線有腹吸盤。從肝臟中取出的新鮮蟲體為棕紅色，福爾馬林固定后呈灰白色。蟲卵為黃褐色橢圓形，120～150 μm，寬63～90 μm，外觀前窄后鈍，前端有不明顯卵蓋。

肝片吸蟲的抵抗力與外界環(huán)境條件有關(guān)，蟲卵在12 ℃時停止發(fā)育，2～4 ℃下18個月后仍有60%孵化率，結(jié)冰后迅速死亡；不耐高溫和干燥，40～50 ℃或干燥條件下不到10 min就死亡；潮濕環(huán)境下蟲卵能存活8個月以上，在椎實螺體內(nèi)存活時間會延長。

2 致病機(jī)理

B型諾維氏梭菌的芽孢普遍附著于牧草和飼料上，隨羊只飲食通過腸道進(jìn)入肝臟潛伏下來不發(fā)病，當(dāng)有肝片吸蟲感染致使肝臟受損時，B型諾威氏梭菌大量繁殖感染，在體內(nèi)產(chǎn)生大量毒素造成毒血癥而發(fā)??；肝片吸蟲幼蟲在肝臟中移行形成機(jī)械性損傷肝臟的同時，釋放各種毒素，溶血和造成肝臟炎癥以及神經(jīng)癥狀[1-2]。

3 傳染來源

受B型諾維氏梭菌和肝片吸蟲蟲卵污染的土壤、牧草、飼料、飲水等都是半黑疫并發(fā)羊肝片吸蟲病的傳染來源。

4 流行特點

4.1 羊黑疫

多發(fā)于每年秋末，多發(fā)于南方潮濕低洼沼澤地區(qū)；周歲羊多發(fā)，死亡率高，老齡羊和羔羊發(fā)病少，死亡率低，肝片吸蟲是誘發(fā)羊黑疫的主要原因。

4.2 肝片吸蟲病

多發(fā)于低洼潮濕多沼澤放牧地區(qū)，主要流行于春末、夏秋溫暖多雨季節(jié)，多雨年份會促進(jìn)流行，常造成幼羊大批死亡或嚴(yán)重營養(yǎng)不良。

5 臨床癥狀和病變特征

5.1 臨床癥狀

離群或站立，流涎，磨牙，貧血，黏膜蒼白，眼瞼、胸前腹下水腫，食欲減退，間歇性瘤胃臌脹，腹瀉與便秘交替進(jìn)行，平時低熱，肝區(qū)有壓痛表現(xiàn)，叩診呈濁音；發(fā)病時突然高熱41 ℃以上，反芻停止，呼吸困難，臥地昏睡，幾小時內(nèi)突然死亡或拖延1～2 d后死亡，死亡率幾乎100%。

5.2 病理變化特征

尸體迅速腐敗，皮下顯著充血，使羊皮外觀呈暗黑色，皮下組織有透明膠樣浸潤；左心室內(nèi)膜下常有出血點，真胃幽門黏膜和小腸充血出血；肝臟腫脹，表面有大大小小的壞死灶，并被出血性帶狀物包圍，常能發(fā)現(xiàn)肝臟表面有黃綠色像蟲一樣彎曲的帶狀痕跡；胸腹腔和心包有積液。

6 疾病診斷

根據(jù)以上臨床癥狀、流行病學(xué)和病理變化特點可以作出初步診斷。另外，獸醫(yī)臨床上因為羊快疫、羊猝疽、羊腸毒血癥、羔羊痢疾是由3種不同的梭菌引起的傳染病，所以還需要與3種病相鑒別：羊快疫是腐敗梭菌引起羊急性致死性疾病，也是發(fā)病急，病程短，死亡快，真胃和十二指腸黏膜呈出血性壞死性炎癥；羊猝疽是C型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起羊急性死亡的傳染病，特征是腹膜炎和潰瘍性腸炎；羊腸毒血癥是D型產(chǎn)氣莢膜梭菌引起的急性致死性傳染病，同樣是發(fā)病急，病程短，特征病變是腎組織軟化無彈性，俗稱“軟腎病”。確診還需要下面幾個步驟檢出病原[3-5]。

6.1 羊黑疫病原的檢出

6.1.1 B型諾維氏梭菌培養(yǎng)基制備和培養(yǎng)。培養(yǎng)基的配制：將含有0.1%的葡萄糖和0.1%硫乙醇酸鈉的滅菌融化的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基冷卻到45～50 ℃，無菌加入培養(yǎng)基總量的5%～10%新鮮的脫纖維血，迅速搖勻，立即倒入滅菌平皿中冷凝即成。梭菌的分離和培養(yǎng)：將羊肝臟切塊放入組織搗碎機(jī)絞碎，加入2倍量蒸餾水，加熱至80 ℃保持20 min，消除不耐熱細(xì)菌的污染，有利于梭菌的分離，然后無菌挑取少許劃線移植于葡萄糖鮮血瓊脂平面上，迅速放置在二氧化碳培養(yǎng)箱中25 ℃下培養(yǎng)1～2 d，挑取單個菌落移植于另一培養(yǎng)基中放入二氧化碳培養(yǎng)箱中25 ℃下培養(yǎng)1～2 d，觀察細(xì)菌菌落形態(tài)和溶血類型。

6.1.2 羊黑疫病原的鑒定。羊死亡后，迅速無菌采取羊肝臟被膜觸片革蘭氏染色鏡檢，如果有細(xì)長絲狀細(xì)菌，接種豚鼠后，采取豚鼠肝臟被膜觸片染色鏡檢，也發(fā)現(xiàn)大量細(xì)長絲狀細(xì)菌，此為引起羊快疫的腐敗梭菌；如果肝臟壞死灶邊緣組織觸片后，發(fā)現(xiàn)革蘭氏染色呈陽性的典型巨大桿菌，兩端鈍圓，單個或成雙散在，或3～4個以短鏈連接的，則懷疑為產(chǎn)生羊黑疫的B型諾維氏梭菌；若呈單個散在的桿菌可疑為產(chǎn)生羊腸毒血癥或羔羊痢疾的產(chǎn)氣莢膜桿菌。

從培養(yǎng)基上的菌落形態(tài)來鑒別：腐敗梭菌菌落灰白稍隆起，邊緣不整齊；B型諾維氏梭菌菌落淺薄透明；產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落呈灰白圓形，周邊有明顯鋸齒狀。從培養(yǎng)基上的溶血類型上來鑒別：腐敗梭菌菌落有溶血，但沒有明顯溶血環(huán)；B型諾維氏梭菌菌落周圍有β型溶血環(huán)；呈雙溶血環(huán)的則是產(chǎn)氣莢膜梭菌菌落。接種動物試驗鑒別：死亡羊只剛剖檢的病料，做成混懸液肌肉注射豚鼠，豚鼠發(fā)病死亡后剖檢，可見豚鼠肌肉注射部位有出血性水腫，腹部皮下有膠凍樣浸潤，無色透明或呈玫瑰色，該癥狀極具診斷意義。毒素鑒定試驗：病料中的毒素具有卵磷脂酶試驗陽性特征。

6.2 肝片吸蟲病原的檢出

6.2.1 成蟲的檢出。死亡羊只剖檢肝臟在膽管中可發(fā)現(xiàn)呈扁平葉狀的成蟲。

6.2.2 幼蟲的檢出。在肝臟表面有黃綠色像蟲一樣彎曲的帶狀痕跡，切開后觸片鏡檢，往往能找到幼蟲。

6.2.3 蟲卵的檢出。取糞便5 g，加蒸餾水100 mL，攪勻后用40目網(wǎng)篩過濾到三角瓶中靜置30 min，小心倒去上清液，再加水?dāng)噭蜢o置30 min，反復(fù)3遍，直到上清液透明為止，吸取沉淀物涂片鏡檢，鏡下可見長卵圓形黃褐色，大小（116～132）μm×（66～82）μm，前窄后鈍，卵殼細(xì)薄透明，卵黃內(nèi)有1個胚細(xì)胞和許多卵黃細(xì)胞的肝片吸蟲蟲卵。

7 疾病防治

7.1 預(yù)防

一是驅(qū)蟲。每年冬末春初和秋末冬初各進(jìn)行1次驅(qū)蟲，使用三氯苯唑1 kg體重5～15 mg，各內(nèi)服1次。二是糞便和內(nèi)臟處理。羊圈經(jīng)常清理，集中堆積發(fā)酵消滅蟲卵；內(nèi)臟廢棄化制，禁止人畜食用。三是飲水和放牧。最好飲用自來水、井水或流動的河水，避免到低洼潮濕或沼澤地域放牧，有條件的或創(chuàng)造條件進(jìn)行輪牧；不要更換飼料太快，少食青飼料和谷物，多食顆粒飼料。四是殺滅中間宿主。1 m2水池或沼澤用1/50 000的硫酸銅溶液5 L，牧區(qū)噴灑石灰1 000～1 500 kg/hm2，殺滅中間宿主椎實螺。

7.2 治療

病程緩和的羊，可注射氨芐青霉素等抗革蘭氏陽性菌的抗菌藥物，急性病例可肌肉注射抗諾維氏梭菌血清10～80 mL。

8 參考文獻(xiàn)

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