谷建
摘要:口蹄疫的病原學(xué)監(jiān)測(cè),需要采集牛羊OP液(食道咽部分泌物)。正確采集及保存樣品對(duì)檢測(cè)結(jié)果具有重要作用。本文根據(jù)操作標(biāo)準(zhǔn)以及工作經(jīng)驗(yàn),總結(jié)反芻動(dòng)物OP液采集方法和注意事項(xiàng)。
關(guān)鍵詞:反芻動(dòng)物;OP液;采集方法;注意事項(xiàng)
中圖分類(lèi)號(hào):S851.3 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:B文章編號(hào):2095-9737(2016)05-0180-01
1 準(zhǔn)備工作
OP液探杯,大離心管,MARK筆,封口膜,一次性乳膠手套。生理鹽水,PBS液(0.04 mL/L,pH值7.4,并加入雙抗)。動(dòng)物在采樣前禁食12h以上,適量飲水,避免采樣時(shí)胃內(nèi)容物返出污染OP液。OP液探杯使用前徹底消毒。采樣過(guò)程中,采樣動(dòng)物站立保定確實(shí)。
2 樣品的采集
將消毒好的探杯把手握緊,打開(kāi)牛羊口部伸入到食道上部,隨著吞咽動(dòng)作進(jìn)入,切勿蠻力,避免插入氣管或造成食道咽部損傷。進(jìn)入后,在食道上部10cm左右輕輕反復(fù)移動(dòng)3次,再將探杯拉出。若采集的樣品有胃內(nèi)污染物,用清水或生理鹽水清洗口腔后再重新采樣。
3 送樣及保存
采樣后,將探杯采集到的OP液倒入帶蓋的滅菌離心管中,離心管事先要加入10 mL的PBS液,并用PBS進(jìn)行沖洗探杯并倒入離心管內(nèi)。將離心管密封、搖勻、編號(hào),然后放入到裝有冰塊的冷藏箱或者冰箱中冷凍保存,盡快送檢,如不能及時(shí)送檢,置于-30℃冷凍保存。
4 注意事項(xiàng)
PBS液一定要冷藏保存,盡量減少降解酶的污染。
探杯使用后要徹底消毒,并且每只動(dòng)物采樣結(jié)束后都要清洗消毒,避免污染,導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果不準(zhǔn)確。
采集過(guò)程中,要注意盡量避免刮傷動(dòng)物口腔以及食道,經(jīng)常檢查探杯質(zhì)量,避免探杯斷裂進(jìn)入動(dòng)物體內(nèi)或探杯損壞對(duì)動(dòng)物造成人為的損傷。