陳金素+李忠瓊+楊江媛

【摘 要】 目的：建立金水丸的薄層色譜鑒別方法。方法：對(duì)金水丸制劑中的藥味進(jìn)行TLC鑒別方法研究，并進(jìn)行方法學(xué)考察。結(jié)果：建立了金水丸中紫丹參、黃芩、枳殼、麥冬的薄層色譜鑒別方法。結(jié)論：所建立的方法簡(jiǎn)便易行，專(zhuān)屬性強(qiáng)，重復(fù)性好，可用于金水丸制劑的質(zhì)量控制。

【關(guān)鍵詞】 金水丸；薄層色譜；鑒別

【中圖分類(lèi)號(hào)】R284.1 【文獻(xiàn)標(biāo)志碼】 A【文章編號(hào)】1007-8517（2016）14-0016-03

Abstract：Objective To establish the TLC identification method of Jinshuiwan.Method Create effective TLC identification method by studing of herbal medicines in prescription of jinshuiwan. Result The TLC identification method of Salviae yunnanensis Radix， Scutellariae Radix， Aurantii Fructus， Ophiopogonis Radix in Jinshuiwan preparation have been established. Conclusion The method is simple， specific， reproducible and can be applied to quality control of Jinshuiwan.

Keywords：Jinshuiwan；TLC； Identification

金水丸為云南省中醫(yī)醫(yī)院制劑室制備的院內(nèi)中藥制劑，是由麥冬、地黃、山藥、茯苓、牡丹皮、紫菀、麻黃、枳殼、黃芩、紫丹參等十八味藥材制成的濃縮水丸，具有滋陰潤(rùn)燥、止咳平喘的功效，臨床用于陰虛肺燥之咳喘等癥?，F(xiàn)行質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)僅對(duì)方中的牡丹皮、麻黃進(jìn)行薄層色譜鑒別及丸劑的通則檢查，為進(jìn)一步提高其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、更有效地控制其質(zhì)量，進(jìn)行了有關(guān)藥味的薄層色譜鑒別研究，建立了金水丸中紫丹參、黃芩、枳殼、麥冬的薄層色譜鑒別方法，方法專(zhuān)屬性強(qiáng)、重復(fù)性好。

1 儀器與材料

1.1 儀器 FUNGILAB超聲儀；BINDER烘箱；sartorius BS224S天平；CAMAG REPROSTAR 3紫外光燈儀。

1.2 材料 硅膠G薄層板（批號(hào)：20152046，青島康業(yè)鑫藥用硅膠干燥劑有限公司；批號(hào)：20131118，青島海洋化工廠分廠；批號(hào)：20151118，煙臺(tái)維啟化工產(chǎn)品有限公司）；丹參酮IIA對(duì)照品（批號(hào)：110766-201520）、黃芩苷對(duì)照品（批號(hào)：110715-201318）、柚皮苷對(duì)照品（批號(hào)：110722-201312）、麥冬對(duì)照藥材（批號(hào)：121013-201310）均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院；金水丸樣品（批號(hào)：20150319、20150630、20151029，云南省中醫(yī)醫(yī)院制劑室）；所用試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 紫丹參的鑒別 取本品研細(xì)，過(guò)三號(hào)篩，稱(chēng)取10g，加乙醚50mL，超聲處理10min，濾過(guò)，濾液揮干（藥渣備用），殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另按處方取除去紫丹參的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取丹參酮IIA對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含0.5mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚（30～60℃）-乙酸乙酯（9∶[KG-*3/5]1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的紅色斑點(diǎn)，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無(wú)斑點(diǎn)（見(jiàn)圖1）。

2.2 黃芩的鑒別 取“2.1”項(xiàng)下乙醚提取后的備用藥渣，揮干乙醚，加甲醇50mL，超聲處理60min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL溶解，用稀鹽酸調(diào)節(jié)pH至2～3，用乙酸乙酯30mL振搖提取，取乙酸乙酯部分蒸干（水層備用），殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另按處方取除去黃芩的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取黃芩苷對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各5μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶[KG-*3/5]3∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]1）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5%三氯化鐵乙醇溶液，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的深綠色斑點(diǎn)，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無(wú)斑點(diǎn)（見(jiàn)圖2）。

2.3 枳殼的鑒別 取“2.2”項(xiàng)下的供試品溶液。另按處方取除去枳殼的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取柚皮苷對(duì)照品，加甲醇制成每1 mL含1 mg的對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各2～4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇-水（13∶[KG-*3/5]6∶[KG-*3/5]2）的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)9 cm，取出晾干后，再展開(kāi)一次，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，105℃加熱約5min，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無(wú)斑點(diǎn)（見(jiàn)圖3）。

2.4 麥冬的鑒別 取“2.2”項(xiàng)下乙酸乙酯提取后的備用水層，用氨試液調(diào)節(jié)pH至中性，再用水飽和正丁醇30mL振搖提取，取正丁醇部分蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。另按處方取除去麥冬的其余藥味模擬本品制備工藝，同法制成陰性供試品溶液。再取麥冬對(duì)照藥材粉末1g，加甲醇30mL，超聲處理60min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，用水飽和正丁醇30mL振搖提取，取正丁醇部分蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各2～4μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-甲醇（10∶[KG-*3/5]1.5）為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱約2min至斑點(diǎn)顯色清晰，置日光下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯一個(gè)相同的淺紅色主斑點(diǎn)，而陰性樣品在相應(yīng)的位置無(wú)斑點(diǎn)（見(jiàn)圖4）。

3 討論

處方中的紫丹參為云南省地方習(xí)用中藥材，收載于2005年版《云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)》第一冊(cè)，其薄層色譜鑒別以丹參酮IIA為對(duì)照，展開(kāi)劑為苯-乙酸乙酯（19∶[KG-*3/5]1）[1]，研究中比較了甲苯-乙酸乙酯（19∶[KG-*3/5]1）[2]及石油醚（30～60℃）-乙酸乙酯（9∶[KG-*3/5]1），采用本文規(guī)定的展開(kāi)劑能獲得良好分離，易于結(jié)果判斷，并避免了使用有毒試劑，利于檢驗(yàn)者健康及環(huán)保。

《中國(guó)藥典》2015年版收載的黃芩及含黃芩成方制劑的薄層色譜鑒別多采用聚酰胺薄膜、硅膠G薄層板，展開(kāi)劑為醋酸、甲苯-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（10∶[KG-*3/5]3∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]2）、乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水（5∶[KG-*3/5]3∶[KG-*3/5]1∶[KG-*3/5]1）等[2]，經(jīng)試驗(yàn)比較，使用本文規(guī)定的色譜條件能有效鑒別金水丸中的黃芩。

枳殼的鑒別采用《中國(guó)藥典》2015年版枳殼項(xiàng)下薄層色譜條件試驗(yàn)時(shí)，柚皮苷Rf值較小且分離不佳，經(jīng)試驗(yàn)通過(guò)二次展開(kāi)可獲得有效分離。

麥冬的鑒別采用《中國(guó)藥典》2015年版麥冬項(xiàng)下方法試驗(yàn)時(shí)，金水丸樣品色譜中斑點(diǎn)較多分離不佳。根據(jù)麥冬所含化學(xué)成分[3]，采用本文規(guī)定的方法并比較了展開(kāi)劑①三氯甲烷-甲醇-水（13∶[KG-*3/5]6∶[KG-*3/5]2）的下層溶液、②三氯甲烷-甲醇（10∶[KG-*3/5]4）、③三氯甲烷-甲醇（10∶[KG-*3/5]1.5），結(jié)果用①時(shí)斑點(diǎn)分離不佳、陰性干擾大，用②時(shí)目標(biāo)斑點(diǎn)Rf值過(guò)大，采用③展開(kāi)劑斑點(diǎn)分離良好且Rf值適中。

研究建立的4項(xiàng)薄層色譜鑒別，考察不同廠家的硅膠G預(yù)制板并經(jīng)不同實(shí)驗(yàn)者試驗(yàn)均可獲得良好重現(xiàn)性。同時(shí)也比較了不同溫濕度條件下的展開(kāi)效果，各目標(biāo)斑點(diǎn)的Rf值在不同條件下略有差異，但斑點(diǎn)能分離清晰，易于結(jié)果判斷。其中紫丹參鑒別的供試品溶液制備簡(jiǎn)便，而黃芩、枳殼、麥冬鑒別中的供試品溶液制備方法均經(jīng)過(guò)優(yōu)化實(shí)驗(yàn)建立。

參考文獻(xiàn)

[1]云南省食品藥品監(jiān)督管理局.云南省中藥材標(biāo)準(zhǔn)（第一冊(cè)）[S].昆明：云南美術(shù)出版社，2005：45.

[2]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典（一部）[S].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2015：301，577，735，1214.

[3]陳屏，徐東銘，雷軍.麥冬化學(xué)成分及藥理作用的研究現(xiàn)狀[J].長(zhǎng)春中醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2004，20（1）：35.

（收稿日期：2016.05.11）