98例輸血前檢查疑難標(biāo)本的原因分析及解決對(duì)策

楊槐波

（通遼市中心血站 內(nèi)蒙通遼 028000）

98例輸血前檢查疑難標(biāo)本的原因分析及解決對(duì)策

楊槐波

（通遼市中心血站 內(nèi)蒙通遼 028000）

輸血前需要進(jìn)行常規(guī)的血型血清學(xué)檢查，而在常規(guī)檢查中經(jīng)常會(huì)發(fā)現(xiàn)各種影響正常定型的因素。本站2013年10月—2015年10月接收了98例醫(yī)院血庫(kù)在ABO定型和不規(guī)則抗體篩選中出現(xiàn)疑難問題的患者標(biāo)本，本站血型室通過血型血清學(xué)試驗(yàn)查找出產(chǎn)生疑難問題的原因并采取了相應(yīng)的解決方法，保證了患者正確定型和安全輸血。

ABO正反定型 吸收放散 型物質(zhì) 亞型

1 材料

1.1 樣本來源

2013年10月—2015年10月通遼市各醫(yī)院血庫(kù)輸血前檢查疑難血樣98例。

1.2 試劑

抗-A標(biāo)準(zhǔn)血清、抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清、ABO標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞、抗-AB試劑、抗-A1試劑、抗-H試劑、抗-Lea試劑、抗-Leb試劑、三組篩選細(xì)胞和十組譜細(xì)胞（上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司）。

2 方法

2.1 ABO正反定型

正定型：抗-A標(biāo)準(zhǔn)血清和抗-B標(biāo)準(zhǔn)血清與被檢細(xì)胞分別加入標(biāo)記好的試管；反定型：Ac、Bc、Oc與被檢血清分別加入標(biāo)記好的試管并做自身對(duì)照,分別在4℃、室溫和37℃放置5-10分鐘,3400r/min離心判讀結(jié)果,根據(jù)正反定型的結(jié)果,分析判斷產(chǎn)生不符合的原因并根據(jù)具體情況,加做抗-A1、抗-AB、抗-H和A1c、A2c。

2.2 對(duì)于減弱的和可疑的抗原可進(jìn)行吸收放散試驗(yàn)和唾液型物質(zhì)檢測(cè)

按文獻(xiàn)［1］操作。

2.3 Lewis血型

用抗-Lea試劑和抗-Leb試劑判斷分泌性和非分泌性,檢測(cè)結(jié)果為L(zhǎng)e（a+b-）為非分泌型；Le（a-b+）為分泌型。

2.4 抗體篩查與鑒定

出現(xiàn)Oc有凝集反應(yīng)、自身對(duì)照陰性的標(biāo)本血清應(yīng)考慮有ABO系統(tǒng)以外的不規(guī)則抗體,應(yīng)與三組篩選細(xì)胞試驗(yàn),試驗(yàn)結(jié)果陽(yáng)性的再加做十組譜細(xì)胞,以陰性排除法確定抗體的特異性。

2.5 ABO亞型的判斷方法

按文獻(xiàn)［1］標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行相關(guān)的血型血清學(xué)試驗(yàn)判斷不同的亞型及其分類。

2.6 DTT處理紅細(xì)胞

可以用DTT處理有自身凝集的紅細(xì)胞。

2.7 鹽水替代法排除緡錢狀凝集

3 結(jié)果

（1）經(jīng)過對(duì)2013年10月—2015年10月98例輸血前檢查中出現(xiàn)疑難問題的患者標(biāo)本進(jìn)行血型血清學(xué)試驗(yàn),其產(chǎn)生的原因分析見表1。

（2）對(duì)各種影響ABO血型定型的原因,我們采用了相應(yīng)的血型血清學(xué)解決方法：

3.1自身冷抗體

出現(xiàn)自身冷抗體干擾的標(biāo)本,可將血清和紅細(xì)胞分別在37℃預(yù)溫5-10分鐘,再3400r/min離心判讀結(jié)果。對(duì)于冷凝集素效價(jià)較高,紅細(xì)胞已經(jīng)凝集的標(biāo)本,可在56℃10分鐘放散細(xì)胞至直抗陰性,用此細(xì)胞進(jìn)行正定型。用直抗陰性細(xì)胞4℃吸收血清30-60分鐘,用此血清進(jìn)行反定型。此外還可采用DTT處理后的紅細(xì)胞進(jìn)行定型。［2］

3.2 抗體減弱

抗體減弱可由下列四種原因引起：年齡（新生兒或老年人）、丙球蛋白過低血癥、丙球蛋白缺乏血癥及嵌合現(xiàn)象。根據(jù)抗體減弱或缺失的不同原因,可通過適當(dāng)加大抗體量,延長(zhǎng)抗原抗體反應(yīng)時(shí)間,降低抗原抗體反應(yīng)溫度等方法解決。

3.3 ABO亞型

出現(xiàn)排除疾病影響的抗原減弱時(shí),應(yīng)考慮亞型的可能性。常用的ABO亞型定型試劑有抗-A1、抗-AB、抗-H、A1c、A2c?？?A1用于判斷是否存在A1抗原,抗-AB用于檢測(cè)弱的A抗原和B抗原,特別適用于Ax、Bx亞型的檢測(cè),抗-H是因?yàn)榇蟛糠謥喰图?xì)胞上有較多的H抗原,與抗-H反應(yīng)較強(qiáng)。A1c、A2c用于判斷A亞型的抗-A1抗體。另外還可以通過吸收放散試驗(yàn)、唾液型物質(zhì)檢測(cè)輔助亞型的判斷。［3］

34 同種抗體

通過與O細(xì)胞、三組篩選細(xì)胞和十組譜細(xì)胞反應(yīng)確定同種抗體的存在及特異性。需要注意的是在少數(shù)情況下會(huì)出現(xiàn)血清與反定A細(xì)胞或B細(xì)胞反應(yīng)而與O細(xì)胞不反應(yīng),這是因?yàn)榉炊?xì)胞上有相應(yīng)的抗原而O細(xì)胞上卻沒有。［4］

3.5 血漿異常

血漿蛋白濃度異常,球蛋白濃度升高（如多發(fā)性骨髓瘤）、原發(fā)性巨球蛋白血癥、血漿增容劑等會(huì)引起緡錢樣凝集,如果聚集生成具有錢串樣特征的團(tuán)塊,就容易識(shí)別,但這種聚集常常是形狀不規(guī)則而且很像通常的凝集?？刹捎孟蛟嚬苤械渭?-3滴生理鹽水或鹽水替代法排除緡錢樣假凝集。

3.6 抗原減弱

稀有的A或B等位基因存在時(shí)或白血病及其它惡性疾病時(shí)可能會(huì)引起抗原減弱,用抗-A、抗-A1、抗-AB、抗-H重復(fù)試驗(yàn)并在室溫及4℃放置30分鐘,對(duì)陰性結(jié)果用顯微鏡檢查,還可通過吸收放散試驗(yàn)、唾液型物質(zhì)檢測(cè)；調(diào)查患者以前的血型等方法。

3.7 近期輸血

對(duì)于近期輸血的患者應(yīng)通過毛細(xì)管離心方法,獲得的患者的自身紅細(xì)胞,用此細(xì)胞進(jìn)行定型。

表1 98例正反定型不符的原因

4 討論

ABO血型系統(tǒng)是與輸血相關(guān)的最重要的血型系統(tǒng),ABO血型的鑒定會(huì)受許多因素的干擾,造成正反定型不符,ABO血型正確定型直接關(guān)系到患者的生命安全,所以應(yīng)以認(rèn)真的態(tài)度、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行試驗(yàn)。一定要保證患者臨床輸血及時(shí)、安全和有效。

［1］李勇，楊貴貞主編.人類紅細(xì)胞血型學(xué)實(shí)用理論與實(shí)驗(yàn)技術(shù)［M］.北京：中國(guó)科學(xué)出版社，1999，37-43；267-268；272-274；289-290；298-299.

［2］張魯平，李繼明，劉雯馨.自身免疫溶血性貧血引起血型及配血困難2例［J］.臨床血液學(xué)雜志（輸血與檢驗(yàn)版），2007，4（2）：95-96.

［3］向東，劉曦，郭忠慧，等.上海地區(qū)中國(guó)人群中ABO亞型的研究.中國(guó)輸血雜志，2006，19（1）25-26.

［4］徐智杰，周小玉.天然抗M抗體致ABO血型鑒定正反定型不符1例［J］.臨床血液學(xué)雜志（輸血與檢驗(yàn)版），2007，4（3）：142-143.

R11

A

1674-2060（2016）03-0113-01