夏麗君,巫雯嘉，楊　瑾

(1.成都市武侯區(qū)人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 成都610041；2.成都核工業(yè)416醫(yī)院 檢驗(yàn)科,四川 成都610051)

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9種呼吸道病原體IgM抗體聯(lián)合檢測(cè)的臨床意義

夏麗君1*,巫雯嘉2，楊瑾1

(1.成都市武侯區(qū)人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科，四川 成都610041；2.成都核工業(yè)416醫(yī)院 檢驗(yàn)科,四川 成都610051)

目的了解9種非典型性病原體在呼吸道感染患者中感染率，探討9種非典型性病原體IgM抗體聯(lián)合檢測(cè)在呼吸道感染中的臨床意義。方法收集681例呼吸道感染患者(其中成人277例，兒童404例)血清，采用間接免疫熒光法(IFA)同時(shí)檢測(cè)嗜肺軍團(tuán)菌(Lp)、肺炎支原體(Mp)、Q熱立克次體(QFR)、肺炎衣原體(Cp)、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IAV)、乙型流感病毒(IBV)和副流感病毒(PIV)9種呼吸道病原體的IgM抗體。結(jié)果1、681例樣本中共檢測(cè)出IgM抗體陽性258例(感染率37.89%)，其中成人79例(感染率28.51%)，兒童179例(感染率44.31%)；各病原體IgM抗體陽性例數(shù)和感染率從高到低依次為：Mp25.11%，IBV14.68%，PIV1-3型3.96%，IAV1.91%，Lp1.76%，RSV1.47%，ADV0.44%,QFR和CP無感染。2、在所有感染病例(IgM抗體陽性)中，九種病原體所占構(gòu)成比依次為：Mp51.20%，IBV29.60%，PIV1-3型7.78%，IAV3.89%，Lp3.59%、RSV2.99%、ADV0.90%。3.在258例感染樣本中，混合感染占71例(27.52 %)。結(jié)論九種非典型性病原體中，肺炎支原體感染率最高；呼吸道病原體IgM抗體聯(lián)合檢測(cè)可以在早期快速同時(shí)檢測(cè)出多種病原體，為臨床對(duì)呼吸道感染患者的早期診斷、治療提供科學(xué)依據(jù)。

呼吸道感染；非典型性病原體；免疫球蛋白M；間接熒光抗體技術(shù)

(Chin J Lab Diagn,2016,20:1477)

呼吸道感染是臨床最常見的疾病之一，引起呼吸道感染的病原體復(fù)雜多樣，其中非典型病原體占很大比例。非典型病原體主要是指肺炎鏈球菌等常見細(xì)菌以外的病毒、衣原體、支原體等病原體，最常見的有肺炎支原體(MP)、肺炎衣原體(CPn)、嗜肺軍團(tuán)菌(Lp)及Q熱立克次體(QFR)等[1]。由于這些非典型性病原體引起的臨床癥狀不典型，一種臨床表現(xiàn)可由多個(gè)病原體引起，同時(shí)一個(gè)病原體也可造成多種臨床表現(xiàn)。因此，呼吸道病原體的快速檢測(cè)，對(duì)臨床早期診斷、合理選擇抗生素、減少抗菌藥物的濫用、提高治愈率具有重要意義[2]。本文擬通過分析間接免疫熒光法(IFA)檢測(cè)681例呼吸道感染患者血清9項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體的結(jié)果，探討呼吸道感染患者的病原體分布情況，為臨床提供早期診斷和治療依據(jù)。

1　資料與方法

1．1一般資料收集2013年1月至2014年12月本院兒科、呼吸科就診的呼吸道感染患者681例，其中，成人277例，平均年齡51.7歲，兒童404例，平均年齡2.9歲。

1．2主要試劑與儀器主要儀器：OLYMPUSCX22RFS1熒光顯微鏡(日本OLYMPUS公司)；主要試劑：9項(xiàng)呼吸道感染病原體IgM抗體檢測(cè)試劑盒(西班牙VIRCELL公司產(chǎn)品)，由鄭州安圖生物科技發(fā)展有限公司提供，包括：載玻片(10孔/片，分別標(biāo)記9種抗原及質(zhì)控1孔)、PBS、陰陽性對(duì)照、FITC結(jié)合物、封閉介質(zhì)、吸附劑等。

1．3檢測(cè)方法用無抗凝劑真空采血管收集患者靜脈血2ml，3 500r/min離心后分離血清備用。當(dāng)天標(biāo)本及時(shí)檢測(cè)，若不在8h內(nèi)檢測(cè),則將標(biāo)本存入2-8℃ 冰箱，若7d內(nèi)不檢測(cè)，則置于-20℃ 以下冷凍保存。采用間接免疫熒光法(IFA)檢測(cè)病原體IgM抗體，可同時(shí)檢測(cè)MP、CPn、Lp、QFR、腺病毒(ADV)、呼吸道合胞病毒(RSV)、甲型流感病毒(IAV)、乙型流感病毒(IBV)、副流感病毒(PIV)等9種呼吸道病原體。嚴(yán)格按操作說明書進(jìn)行，每次試驗(yàn)均設(shè)立陽性和陰性對(duì)照，以保證測(cè)試結(jié)果準(zhǔn)確有效。

2　結(jié)果

2.1681例樣本中共檢測(cè)出IgM抗體陽性258例(感染率37.89%)，其中成人79例(感染率28.51%)，兒童179例(感染率44.31%)；各病原體IgM抗體陽性例數(shù)和感染率從高到低依次為：Mp25.11%；IBV14.68%，PIV1-3型3.96%，IAV1.91%，Lp1.76%、RSV1.47%、ADV0.44%,QFR和CP無感染。成人和兒童的感染率見表1。

表1　681例呼吸道感染患者中各種病原體的感染率

2.2258例感染患者病原體分布在所有感染病例(IgM抗體陽性)中，九種病原體構(gòu)成比依次為：Mp51.20%；IBV29.60%，PIV1-3型7.78%，IAV3.89%，Lp3.59%、RSV2.99%、ADV0.90%。見表2。

表2　所有感染病原體(總數(shù)=感染人次)中各個(gè)病原體分布

2.3在258例感染樣本中，混合感染71例(27.52 %)，其中兒童混合感染52例，占29.1%(52/179)；成人混合感染19例，占24.1%(19/79)。兒童和成人混合感染病原體分布見表3和4。

表3　兒童混合感染病原體分布

表4　成人混合感染病原體分布

3　討論

非典型呼吸道病原體診斷的主要方法有多種。IFA檢測(cè)9項(xiàng)呼吸道病原體IgM抗體由于具有高敏感性、高效、簡(jiǎn)便、成本低廉等優(yōu)點(diǎn)，已逐漸取代其操作繁瑣、檢測(cè)周期長(zhǎng)的“金標(biāo)準(zhǔn)”技術(shù)——呼吸道病原體分離培養(yǎng)及鑒定，是一種可靠的可同時(shí)檢測(cè)多種呼吸道非典型病原體的方法，適合臨床篩查[3]。同時(shí)因機(jī)體在受到病原體的感染時(shí)，血清首先出現(xiàn)IgM抗體，且IgM一般情況下僅存在于感染后2-3個(gè)月。當(dāng)機(jī)體再次感染時(shí)，以IgG為主，可能不會(huì)出現(xiàn)IgM，因此，IgM抗體的出現(xiàn)是近期感染的一個(gè)有效標(biāo)志，對(duì)于急性呼吸道感染早期診斷有重要意義[4]。

本研究顯示，9種呼吸道病原體IgM抗體的陽性檢出率為37.89%，在九種病原體中，排在前三位的是Mp25.11%(兒童29.2 1%)，IBV14.68%，PIV1-3型3.96%，占所有病原體百分比依次為51.20%(兒童50.43%)，29.60%，7.78%，與相關(guān)報(bào)告有所差異，可能與研究的地域、人群及病原體流行季節(jié)的差異有關(guān)[5,6]。但幾乎所有的研究均顯示Mp是九種病原體中感染率最高的，尤其是兒童。這可能兒童免疫系統(tǒng)尚未發(fā)育成熟，當(dāng)?shù)挚沽ο陆禃r(shí)，原已存在或外界侵入的病毒或細(xì)菌繁殖導(dǎo)致多重感染。Mp是兒童時(shí)期肺炎及其他呼吸道感染的重要病原體之一，是介于細(xì)菌與病毒之間的病原微生物，可通過呼吸道飛沫傳播，國(guó)外文獻(xiàn)報(bào)道Mp肺炎的發(fā)病率約占社區(qū)獲得性肺炎的12%[7]。由于Mp對(duì)大環(huán)內(nèi)酯類抗菌藥物敏感，而對(duì)β內(nèi)酰胺類和氨基糖苷類抗菌藥物耐藥[8]，因此，病原體的及時(shí)檢出對(duì)合理使用抗菌藥物至關(guān)重要，可避免病毒感染時(shí)濫用抗菌藥物而導(dǎo)致繼發(fā)耐藥菌株的二重感染[3]。

本研究發(fā)現(xiàn)混合感染71例，占所有感染病例的27.52%，其中主要以Mp合并IBV感染為主35例(兒童33例，成人2例)，說明9種呼吸道病原體IgM抗體聯(lián)合檢測(cè)不僅能及時(shí)檢出病原體，而且能同時(shí)檢出多種病原體。

綜上所述，9種呼吸道病原體IgM抗體聯(lián)合檢測(cè)不僅能快速檢出病原體，而且能同時(shí)檢出多種病原體，為臨床醫(yī)生對(duì)呼吸道感染患者做出及時(shí)、準(zhǔn)確的診斷、治療和合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。

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[4]趙鶴進(jìn).呼吸道九聯(lián)檢的臨床意義[J].臨床合理用藥,2014,7(8)：148.

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Theclinicalvalueofcombiningdetectionof9atypicalpathogensinpatientswithrespiratorytractinfedtions

XIA Li-jun,WU Wen-jia,YANG Jin．

(Department of Clinical Laboratory,Renmin Hospital of Wuhou Region,Chengdu 610041,China)

ObjectiveToexploretheinfectiousratesof9atypicalpathogensinpatientswithrespiratorytractinfedtions(RTI)andinvestigateitsclinicalvalue．Methods681patientswithrespiratorytractinfectionwereenrolled，andtheirfastingserumsampleswerecollected．IndirectimmunofluorescencewasemployedtoconductjointdetectionforLegionellapneumophila1(LP1)，Mycoplasmapneumoniae(MP)，Coxiellaburnetii(COX)，Chlamydiapneumoniae(CP)，adenovirus(ADV)，respiratorysyncytialvirus(RSV)，influenzaAvirus(IFA)，influenzaBvirus(IFB)，parainfluenzavirus(PIV)inrespiratorytract．ResultsAmong681patientswithRTI，258caseswasdetectedpositively,whichaccountedfor258caseswiththeinfectionrateof37.89%(258/681),including79positivecasesinadultswiththeinfectiousrate28.51%and179positivecasesinchildrenwiththeinfectiousrate44.31%；Mpinfectionwaspredominantandthepositiveratewas25.11%，andthepositiveratesofIBV，PIV1-3，IAV，Lp，RSV，ADV，QFRandCPwere14.68%,3.96%,1.91%,1.76%,1.47%，0.44%,0%and0%respectively.Ammonthe9atypicalpathogens,thepercentageofMP，IBV，PIV1-3，IAV，Lp，RSVandADVwere51.20%，29.60%，7.78%,3.89%，3.59%，2.99%，0.90%respectively.Themixedinfectionrateaccountedfor27.52%，andMpcombinedwithFluBweremostcommonwiththerateof49.3%．ConclusionAmmonthe9atypicalpathogensMPhasthehighestpositiveinfectionrate.Combiningdetectionof9atypicalpathogenscandetectseveralpathogensinpatientswithacuterespiratorytractinfedtionsfastearlyatthesametime,andcanprovidescientificevidenceforclinicalearlydiagnosisandtreatmenttothepatientswithacuterespiratorytractinfedtions.

respiratorytractinfedtions；atypicalpathogen；immunoglobulin；indirectimmunofluorescence

1007-4287(2016)09-1477-03

R563.1

A

2015-05-20)