Snail在胃癌組織中的表達(dá)及其與胃癌預(yù)后的關(guān)系*

陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院(咸陽712000)

吳宏培△ 李俊海 魯 鳴 劉娟妮 閆 妍△ 王健生△▲

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·臨床病理·

Snail在胃癌組織中的表達(dá)及其與胃癌預(yù)后的關(guān)系*

陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院(咸陽712000)

吳宏培△李俊海魯 鳴劉娟妮閆 妍△王健生△▲

目的：探討Snail在胃癌中的表達(dá)及其表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系。方法：對(duì)60例胃癌患者手術(shù)切除組織，采用免疫組化方法分別檢測(cè)Snail在胃癌組織和癌旁組織中的表達(dá)，并分析其表達(dá)與臨床病理資料和患者預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果：Snail在癌旁組織中有19例強(qiáng)表達(dá)，強(qiáng)表達(dá)率為31.7%；在癌組織中，有47例強(qiáng)表達(dá)，表達(dá)率為78.3%，明顯高于癌旁組織(P<0.05)。Snail在胃癌組織中的表達(dá)與胃癌的分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)，而與患者性別、年齡、腫瘤大小、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等指標(biāo)之間未見明顯相關(guān)性(P>0.05)。并且Snail在胃癌組織中的表達(dá)與胃癌預(yù)后相關(guān)(P<0.05)。結(jié)論：Snail在胃癌組織中高表達(dá)，其表達(dá)與胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移及預(yù)后相關(guān)，Snail在胃癌中的表達(dá)情況可以作為判斷胃癌預(yù)后的參考指標(biāo)。

Snail是一種鋅指結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)錄抑制因子,在胚胎發(fā)育中的上皮間質(zhì)化(EMT)過程起到重要的作用,與中胚層和神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育密切相關(guān)[1-2]。過表達(dá)Snail的上皮細(xì)胞獲得遷移和浸潤(rùn)的潛能,與鈣粘附蛋白E(E-cadherin)的下調(diào)有關(guān)[3-4]。由于這種促進(jìn)細(xì)胞遷移和浸潤(rùn)潛能的特性，Snail在腫瘤中的表達(dá)和作用越來越受到人們的關(guān)注。本研究通過免疫組化方法測(cè)定Snail在胃癌組織中的表達(dá),并分析其表達(dá)與臨床病理特征與疾病預(yù)后的關(guān)系。

材料與方法

1 材 料 收集陜西省核工業(yè)二一五醫(yī)院和西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院2009年1月至2012年1月的胃癌手術(shù)患者60例,術(shù)后病理診斷均為胃腺癌。其中男38例,女22例；年齡45～68歲。位于胃上中下部分的患者分別為20例,14例,26例；腫瘤組織高分化者10例,中分化37例,低分化13例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者37例；TNM分期：I～I(xiàn)I期24例,III～I(xiàn)V期36例。60例病人均以電話或門診的方式隨訪至2015年1月,臨床病理資料完整。取距癌組織邊緣5 cm以上的癌旁組織作為對(duì)照組。

2 免疫組化染色 組織石蠟包埋，4 μm厚連續(xù)切片。切片脫蠟后，按試劑盒(中國(guó)中杉金橋公司)說明書行兩步法免疫組化染色。兔抗人Snail抗體bs-1371R購(gòu)自英國(guó)Abcom公司。用已知的陽性切片作為陽性對(duì)照。用PBS代替一抗作為陰性對(duì)照。

3 結(jié)果判定 以胞核內(nèi)出現(xiàn)明顯黃色或棕黃色為陽性細(xì)胞。每張切片在顯微鏡下5個(gè)隨機(jī)視野(×200)中計(jì)數(shù)陽性細(xì)胞，細(xì)胞計(jì)數(shù)總數(shù)不少于1000。①計(jì)數(shù)評(píng)分：無陽性細(xì)胞,記0分；陽性細(xì)胞百分比<25%，記 1分；陽性細(xì)胞百分比25%～49%，記1分；陽性細(xì)胞百分比50%～74%，記3分；陽性細(xì)胞百分比>74%，記4分。②著色評(píng)分：無著色或基本無著色,記0分；著色為淡黃色,記1分；著色為棕黃色,記2分；著色為棕褐色；記3分。總評(píng)分為兩項(xiàng)評(píng)分相乘,總分≤3分記為弱表達(dá),>3分記為強(qiáng)表達(dá)。

4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 使用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。用χ2檢驗(yàn)分析Snail表達(dá)與臨床病理資料的相關(guān)性，用Kaplan-Meier法進(jìn)行生存分析，以Log-rank檢驗(yàn)進(jìn)行組間比較。當(dāng)P<0.05時(shí)，認(rèn)為結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

結(jié) 果

1 Snail在胃癌中的表達(dá) 見圖1。Snail主要在胞核中表達(dá)，在60癌組織中，有47例強(qiáng)表達(dá)，強(qiáng)表達(dá)率為78.3%。60例癌旁組織中，有19例強(qiáng)表達(dá)，強(qiáng)表達(dá)率為31.7%。癌組織中強(qiáng)表達(dá)率高于癌旁組織(P<0.05)。

A: 腫瘤組織; B: 癌旁組織

2 Snail表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系 見附表。Snail的表達(dá)與胃癌組織分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移相關(guān)(P<0.05)。

3 Snail表達(dá)與胃癌患者預(yù)后的關(guān)系 見圖2。Kaplan-Meier分析發(fā)現(xiàn)，胃癌患者中Snail的表達(dá)水平與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.01)。Snail強(qiáng)表達(dá)者生存期為33.23個(gè)月, 弱表達(dá)者生存期為49.46個(gè)月,表明Snail強(qiáng)表達(dá)的胃癌患者預(yù)后較差。

圖2 Snail表達(dá)情況與胃癌患者預(yù)后Kaplan-Meier生存曲線

附表 Snail表達(dá)與臨床病理指標(biāo)的相關(guān)性

討 論

Snail屬于鋅指轉(zhuǎn)錄因子大家族,早期研究認(rèn)為Snail通過上皮間質(zhì)化在胚胎中胚層及神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育過程中起重要作用[5-6]。隨著上皮間質(zhì)化在腫瘤發(fā)生過程中的重要作用被證實(shí),Snail也逐漸成為腫瘤研究的熱點(diǎn)之一，但其表達(dá)與腫瘤患者生存時(shí)間的關(guān)系研究目前較少[7]。

本實(shí)驗(yàn)通過免疫組化技術(shù)檢測(cè)60例胃癌手術(shù)標(biāo)本中Snail在胃癌組織和癌旁組織中的表達(dá)情況及其與臨床病理特點(diǎn)和胃癌患者預(yù)后之間的關(guān)系。Snail主要在細(xì)胞核中表達(dá),在60例標(biāo)本中,癌組織中Snail的表達(dá)明顯高于癌旁組織，并且Snail的表達(dá)與腫瘤組織分化程度、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移明顯相關(guān)(P<0.05)，與性別、年齡、腫瘤大小等臨床病理指標(biāo)無明顯相關(guān)性。與此同時(shí)，通過Kaplan-Meier分析Snail的表達(dá)與60例胃癌患者預(yù)后之間的關(guān)系發(fā)現(xiàn)，胃癌患者中Snail的表達(dá)水平與患者預(yù)后相關(guān)(P<0.01)。

綜上所述,Snail的強(qiáng)表達(dá)與胃癌不良預(yù)后明顯相關(guān),在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程中起到重要作用，可以作為胃癌預(yù)后的參考指標(biāo),但其相關(guān)分子機(jī)制尚不明確,需要對(duì)其具體調(diào)控機(jī)制行進(jìn)一步研究。

[1] Larue L,Bellacosa A. Epithelial-mesenchymal transition in development and cancer: role of phosphatidylinositol 3' kinase/AKT pathways[J]. Oncogene,2005,24(50)：7443-7454.

[2] Huber MA,Kraut N,Nand H.Molecular requirements for epithelial-mesenchymal transition during tumor progression[J]. Curr Opin Cell Biol,2015,17(5)：548-558.

[3] Nieto MA.The snail superfamily of zinc-finger transcription factors[J]. Nat Rev Mol Cell Biol,2012，3(3)：155-166.

[4] De Craene B,Van F,Roy GB.Unraveling signalling cascades for the Snail family of transcription factors[J]. Cell Signal, 2005,17(5)：535-547.

[5] Kaler P,Augenlicht L,Klampfer L.Activating mutations in beta-catenin in colon cancer cells alter their interaction with macrophages; the role of snail[J]. PLoS One, 2012,7(9),454-462.

[6] 蔡鳳林,章佳新.Twist 和 Snail 在乳腺癌中的表達(dá)及其與血管生成的關(guān)系[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2013,21(2):298-301.

[7] 唐志鋒,蘇曉娟.RhoA 和Snail的表達(dá)與胃癌生物學(xué)行為的關(guān)系[J].中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志,2013,20(8)：884-889.

(收稿：2016-02-28)

High expression of Snail in gastric cancer, associated with poor prognosis

No.215 Hospital of Shaanxi Nuclear Industry(Xianyang 712000)

Wu HongpeiLi Junhai Lu Minget al

Objective: This study assessed the expression of Snail in gastric cancercorrelated with clinicopathological features, and demonstratedcorrelations between the expression and prognosis. Methods:Immunohistochemistry was used to estimate the expressions of Snailin 60 surgical specimens of gastric cancer.Clinicopathological featuresand immunohistochemical resultsof each section were scored by two experienced pathologists respectively.Results:Snail usually expressed in nucleus. In gastric cancer , the positive rate of Snail was 78.3%,which was significantly higher than that in para-carcinoma tissue(31.7%). The expression of Snailis related todegree of tumor differentiation and invasion, lymph metastasisandclinical stage(P<0.05),whereas there was no correlation with age, sex, size, location, and distant metastasis(P>0.05).Moreover, a negative correlation was found between expression of Snail and clinical outcomes in gastric cancer (P<0.05). Conclusions: As a high expression of Snail in gastriccancer predicted a poor clinical outcome, Snail plays an important role in gastric cancer development. Snail can be used as a prognostic biomarker to predict outcomes of gastric cancer.

Stomach neoplasms Immunohistochemistry Prognosis @Snail

*陜西省科技攻關(guān)項(xiàng)目(2009K01-85)

△西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院

▲通訊作者

胃腫瘤 免疫組織化學(xué) 預(yù)后 @Snail

R735.2

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2016.10.057