郭 卉,董瑤佳,吳 冰
(1、九江市第一人民醫(yī)院,江西九江332000;2、九江市婦幼保健醫(yī)院,江西九江332000)
自身抗體的聯(lián)合檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義
郭 卉1,董瑤佳2,吳 冰2
(1、九江市第一人民醫(yī)院,江西九江332000;2、九江市婦幼保健醫(yī)院,江西九江332000)
目的觀察抗核抗體(ANA)與抗核抗體譜(ANAs)聯(lián)合檢測在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義。方法分別用間接免疫熒光法和免疫印跡法檢測自身抗體。結(jié)果在SLE組中,ANA陽性率為94.2%,抗nRNP/Sm抗體陽性率為41.7%,抗Sm抗體陽性率為35.0%,抗SSA抗體陽性率為76.7%,抗SSB抗體陽性率為26.7%,抗dsDNA抗體陽性率為22.5%,抗核小體抗體陽性率為32.5%,抗組蛋白抗體陽性率為17.5%,抗核糖P蛋白抗體陽性率為33.3%;SLE組與健康對照組的各項(xiàng)結(jié)果相比較均有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論自身抗體的聯(lián)合檢測有助于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷。
系統(tǒng)性紅斑狼瘡;自身抗體;聯(lián)合檢測
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(systemic lupus erythematosus,SLE)是一種臨床表現(xiàn)有多系統(tǒng)損害癥狀的慢性系統(tǒng)性自身免疫病,常累及全身多系統(tǒng)、多器官,患者血清具有以抗核抗體為主的大量不同的自身抗體,并由此導(dǎo)致組織和器官的損傷[1]。自身抗體的檢測系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷的重要指標(biāo),因此本次研究選取了幾種與SLE相關(guān)性較好的指標(biāo)[2],包括ANA、抗nRNP/Sm抗體、抗Sm抗體、抗SSA抗體、抗SSB抗體、抗dsDNA抗體、抗核小體抗體、抗組蛋白抗體和抗核糖P蛋白抗體,通過分析抗核抗體和抗核抗體譜的檢測結(jié)果來探討其在系統(tǒng)性紅斑狼瘡診斷中的意義。
1.1 觀察對象篩選2014年1月至2015年12月江西省九江市第一人民醫(yī)院院門診及住院系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者120例,其中男性8例,女性112例,年齡16~62歲,均符合美國風(fēng)濕病協(xié)會(huì)(ARA)于1997年修訂的SLE診斷標(biāo)準(zhǔn);另選取100例健康體檢者作為對照組,其中男性10例,女性90例,年齡22~58歲。
1.2 標(biāo)本處理抽取受檢者靜脈血2~3ml,置于離心機(jī)中以3500r/min離心5min后分離血清。
1.3 實(shí)驗(yàn)試劑抗核抗體(ANA)檢測試劑盒由北京和杰創(chuàng)新生物醫(yī)學(xué)科技有限公司提供;抗核抗體譜(ANAs)檢測試劑盒由歐盟(德國)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)診斷有限公司提供。
1.4 實(shí)驗(yàn)儀器奧林巴斯BX41熒光顯微鏡;低速離心機(jī)6K-D(長沙鑫奧儀器儀表有限公司);轉(zhuǎn)移脫色搖床TS-8型(海門市其林貝爾儀器制造有限公司)。
1.5 實(shí)驗(yàn)方法抗核抗體檢測采用間接免疫熒光法,抗核抗體譜檢測采用免疫印跡法,實(shí)驗(yàn)操作均嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行。
1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法采用SPSS 19.0軟件進(jìn)行分析,SLE組與健康對照組之間的比較采用卡方檢驗(yàn),以P<0.05為差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
SLE組與健康對照組ANA及ANAs檢測結(jié)果見表1。
系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)是自身免疫介導(dǎo)的,以免疫性炎癥為突出表現(xiàn)的彌漫性結(jié)締組織病。血清中出現(xiàn)以抗核抗體為代表的多種自身抗體和多系統(tǒng)受累是SLE的主要臨床特征[3],臨床表現(xiàn)以面部紅斑、頭痛發(fā)熱、關(guān)節(jié)腫痛及下肢水腫為主。系統(tǒng)性紅斑狼瘡以女性發(fā)病較多,與疾病的發(fā)作呈正相關(guān),這與女性的雌激素水平較高,而雌激素能增強(qiáng)T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞的反應(yīng)性有關(guān)[4]。
根據(jù)表1結(jié)果可知,SLE組與健康對照組中的各項(xiàng)結(jié)果相比較均有顯著性差異(P<0.05),說明這些項(xiàng)目對于診斷SLE都是必不可少的。
抗核抗體(ANA)是一組將自身真核細(xì)胞的各種細(xì)胞核成分作為靶抗原的自身抗體的總稱。一般應(yīng)用免疫熒光的方法檢測。ANA在未治療的SLE患者中的滴度較高,在大多數(shù)自身免疫疾病中均可呈現(xiàn)陽性,正常老年人也可由低滴度的ANA。未經(jīng)治療的SLE患者幾乎95%以上都有抗核抗體,且滴度較高,所以抗核抗體檢測是SLE的最佳篩選試驗(yàn)[5]。本文中,SLE組中ANA陽性者共113例,占94.2%;而在健康對照組中的ANA陽性者共3例。
抗Sm抗體是SLE的血清標(biāo)志性抗體,已列入SLE的診斷標(biāo)準(zhǔn)。約30%~40%的SLE患者抗Sm抗體陽性,此抗體陰性不能排除SLE的診斷。本次研究中SLE組的抗Sm抗體陽性檢出率為35.0%,健康對照組中未檢出養(yǎng)性,此結(jié)果與文獻(xiàn)報(bào)道相似[6]。相對于抗dsDNA抗體而言,抗Sm抗體水平不與SLE疾病的活動(dòng)性相關(guān),亦不與SLE的任何臨床表現(xiàn)相關(guān),治療后的SLE患者也可存在抗Sm抗體陽性??筍m抗體的檢測對早期、不典型的SLE或治療后的回顧性診斷具有很大幫助。
由于Sm和RNP是同一分子復(fù)合物(RNA-蛋白質(zhì)顆粒)中的不同抗原位點(diǎn),兩種抗原具有相關(guān)性,因此抗Sm抗體陽性常伴有抗RNP抗體陽性,單一的抗Sm抗體或抗RNP抗體陽性較少見[7]。根據(jù)表1可知抗RNP/Sm抗體在SLE組中共檢出50例,陽性率為41.7%,在健康對照組中未檢出陽性。
抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗體,該抗體陽性為SLE的重要診斷指標(biāo)之一。70%~90%的活動(dòng)期SLE患者該抗體陽性,效價(jià)較高,并與病情相關(guān),但其敏感性較低[8],本次研究中SLE組陽性者共27例,健康體檢組中未檢出陽性。部分活動(dòng)期SLE患者抗dsDNA抗體結(jié)果為陰性,可能是由于患者血清中過多的游離的DNA抗原與相應(yīng)的DNA抗體結(jié)合所致。因此當(dāng)抗dsDNA抗體結(jié)果為陰性時(shí)不能排除SLE的診斷[9]。
表1 SLE組與健康對照組的自身抗體檢測結(jié)果
本文中,SLE組中抗SSA抗體陽性共92例,占76.7%,健康對照組中檢出陽性2例??筍SA抗體能直接參與組織的病理損害,特別是皮膚的損害。有報(bào)道認(rèn)為ANA陰性SLE患者抗SSA抗體檢出率顯著高于ANA陽性患者[10],因此在臨床癥狀符合但ANA為陰性時(shí),需進(jìn)一步檢測抗核抗體譜,避免漏診。
抗SSB抗體主要見于干燥綜合征,是干燥綜合征的特異性抗體。SLE患者中也可檢測到,但只占10%~20%??筍SB抗體常與抗SSA抗體同時(shí)存在。
核小體是真核生物細(xì)胞染色的基本單位,當(dāng)細(xì)胞受到致病因素作用時(shí),細(xì)胞發(fā)生線粒體腫脹,細(xì)胞膜破裂并導(dǎo)致核小體的釋放。已有資料表明核小體是SLE的發(fā)病過程中一種主要的自身抗原,它可以刺激B細(xì)胞的增生活化,從而激活B細(xì)胞,產(chǎn)生抗體(即抗核小體抗體、抗dsDNA抗體),并形成抗原抗體復(fù)合物參與SLE的發(fā)?。?1]??购诵◇w抗體對SLE的敏感性高、特異性強(qiáng),是SLE診斷的標(biāo)志性抗體之一[12]。有臨床資料顯示,在抗ds-DNA抗體陰性的SLE患者中,有15%~19%為抗核小體抗體。因此,聯(lián)合檢測抗dsDNA抗體及抗核小體抗體可提高SLE的診斷率[13]。本次研究中,SLE組中檢出抗核小體抗體陽性39例,健康對照組中未檢出陽性。
本文中,抗組蛋白抗體在SLE組中的檢出率為33.3%,在健康對照組中未檢出??菇M蛋白抗體檢測對結(jié)締組織病,尤其是藥物性狼瘡的診斷和鑒別診斷有重要意義??菇M蛋白抗體可以在多種結(jié)締組織病中出現(xiàn),因此不具有診斷特異性。
抗核糖體P蛋白抗體是SLE的高度特異性血清學(xué)標(biāo)志,在其他自身免疫性疾病和感染性疾病中都未檢測到。某些抗核抗體陰性的SLE患者體內(nèi)可檢測出抗核糖體P蛋白抗體[14]。
綜上所述,由于SLE患者血清中可出現(xiàn)多種自身抗體,且不同自身抗體之間的敏感性和特異性有所差異,因此切不可以某一項(xiàng)的檢測結(jié)果而做出診斷,而必須以抗核抗體和抗核抗體譜的聯(lián)合檢測結(jié)果做出診斷,只有這樣才能避免因單項(xiàng)檢測造成的漏檢情況,有利于提高檢出率[15]。
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