黎先偉 譯 By vetsweb

病毒抑制劑
——未來防控豬瘟的另一選擇

黎先偉 譯 By vetsweb

自從1992年以來，歐盟應(yīng)對豬瘟（CSF）開始采用不接種疫苗的政策。這主要是由于無法區(qū)分是疫苗毒還是野毒感染動(dòng)物。為了找到一種合適的控制疾病的替代方式，比利時(shí)的研究員R.Vrancken、A. Haegeman、J.Neyts和 F.Koenen開發(fā)研究病毒抑制劑的使用。

迄今為止，預(yù)防動(dòng)物病毒性疾病主要的方法還是依賴于接種疫苗和撲殺，尤其是對于家畜。其中一個(gè)可供選擇的策略是使用具有阻止病毒復(fù)制的抑制劑。雖然一些抗病毒藥物可以用于治療人類的某些病毒性感染（例如，艾滋病病毒（HIV）、乙型和丙型肝炎、皰疹病毒、流感病毒等），但是這些抗病毒藥物在獸醫(yī)上的使用上幾乎沒有研發(fā)過。只有在寵物，人們利用干擾素治療犬細(xì)小病毒病和貓的白血病。對于控制一些沒有疫苗或疫苗效果不佳的傳染病，抗病毒藥物可能對人們尤為的吸引?？蒲腥藛T以豬瘟為模型，研究病毒抑制劑對于控制家畜病毒性疾病的功效。

重要的經(jīng)濟(jì)性疾病

豬瘟（CSF）從19世紀(jì)初起已經(jīng)是世界養(yǎng)豬業(yè)的一大威脅，被認(rèn)為是嚴(yán)重影響?zhàn)B豬業(yè)經(jīng)濟(jì)發(fā)展的重要病毒性傳染病之一。豬瘟是由黃病毒科豬瘟病毒屬豬瘟病毒引起的一種急性、發(fā)熱、接觸性傳染傳染病。本病在自然情況下，不同年齡、性別、品種的豬和野豬都易感。病豬是主要的傳染源，健康豬通過直接接觸病豬經(jīng)口鼻途徑感染本病。另一方面，本病也可通過泔水、受污染的器具、衣服甚至氣溶膠等傳播。發(fā)病動(dòng)物可以表現(xiàn)出各種不同的臨床癥狀（見圖1），從癥狀不明顯到嚴(yán)重的病理變化，這主要取決于宿主（例如年齡和健康狀態(tài)）與病毒（例如病毒的毒力）相關(guān)的因素。雖然豬瘟已經(jīng)在許多歐洲地區(qū)成功的根除，但是在許多其他國家仍然廣泛的流行。

目前控制的主要方法

目前，控制豬瘟的暴發(fā)主要有兩種措施，疫苗接種和非疫苗接種。疫苗接種的措施已經(jīng)得到證實(shí)可以有效的撲滅和/或控制豬瘟。弱毒活疫苗在南美洲和亞洲地區(qū)依然廣泛的使用。歐洲地區(qū)也曾經(jīng)使用接種疫苗的方法控制豬瘟，但由于無法區(qū)分是疫苗毒還是野毒感染動(dòng)物，歐洲地區(qū)停止使用這種防控策略。判斷豬群未感染豬瘟病毒的指標(biāo)仍然是以不含有豬病病毒抗體為標(biāo)準(zhǔn)，所以疫苗接種可能會(huì)嚴(yán)重影響到國際貿(mào)易的進(jìn)行。因此，歐盟禁止使用豬瘟疫苗，從1992年起采用非疫苗接種的措施控制豬瘟。盡管豬瘟病毒在歐洲養(yǎng)豬業(yè)已經(jīng)成功的根除，但是病毒仍然在野豬內(nèi)傳播。而在某些地區(qū)，家豬與野豬有直接接觸的機(jī)會(huì)，這意味著豬瘟病毒有可能從野豬傳播給家豬的危險(xiǎn)。

目前，應(yīng)對豬瘟的暴發(fā)主要是實(shí)施撲殺和優(yōu)先淘汰根除的策略。對所有的感染動(dòng)物和鄰近豬場的疑似感染動(dòng)物進(jìn)行全面的撲殺以控制和阻斷病毒的傳播。這種相當(dāng)激進(jìn)的策略往往會(huì)屠殺大量的動(dòng)物，經(jīng)常也包括一些健康動(dòng)物，例如最近一次（1997～1998年）荷蘭暴發(fā)的豬瘟大流行。撲殺和淘汰共屠殺了超

過150萬頭動(dòng)物，其中110萬頭動(dòng)物是被淘汰的。這種大量屠殺動(dòng)物的措施不僅帶來巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)負(fù)擔(dān)，而且也引起民眾強(qiáng)烈的意見。附加的或可替代的措施呼之欲出。

對于疫苗接種策略，人們研究出一個(gè)沒有經(jīng)濟(jì)約束（可區(qū)分疫苗毒和野毒感染）的方法—E2蛋白亞單位疫苗。這種類型的疫苗直到最近才開始投放市場，但由于效力的易變性和缺乏相應(yīng)的精確的診斷方法嚴(yán)重影響疫苗的使用。

病毒抑制劑

病毒抑制劑是否可以作為另一種有效的取代方法？人們提出這個(gè)問題試圖想填補(bǔ)豬瘟控制與人道疾病防控措施之間的缺口。因此，2004年荷蘭獸醫(yī)與農(nóng)業(yè)化學(xué)品研究中心（VRA）和比利時(shí)魯汶大學(xué)里加醫(yī)學(xué)研究所啟動(dòng)了一項(xiàng)聯(lián)合計(jì)劃，主要目的是為了研究這個(gè)問題。這項(xiàng)研究聯(lián)合了獸醫(yī)（VAR）和人病毒學(xué)（Rega Institute)）的專家共同研究挑選出一類具有抗病毒活性的化合物，可以用來對抗牛病毒性腹瀉病毒，這種病毒與豬瘟病毒屬于同一家族。這類化合物將會(huì)研究并評(píng)估對抗豬瘟病毒的效果。其中經(jīng)鑒定的BPIP（一種小分子-咪唑[4,5c]吡啶衍生物）作為一種代表分子具有有效的體外抗病毒活性。

抑制病毒的復(fù)制

隨著BPIP（早期但仍未優(yōu)化的先導(dǎo)化合物）的鑒定，接下來的目標(biāo)就是研究這種病毒抑制劑是否能有效地保護(hù)宿主免受病毒的感染。對此，研究人員做了以下的試驗(yàn)。其中一組（治療組）用了8頭豬作為研究對象，在豬飼料中混入抗病毒抑制藥BPIP（劑量75 mg/kg/day）連續(xù)使用15 d。在試驗(yàn)的第一天對所有的豬感染豬瘟病毒，每兩天或三天分析豬血液中病毒的含量，同時(shí)設(shè)立感染不治療組作為對照。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，兩組實(shí)驗(yàn)組有著顯著的差異。所有治療組的豬只都能從感染中存活，而對照組中有兩頭未死的豬考慮到道德的因素不得不對其進(jìn)行安樂死處理。在豬體內(nèi)可以檢測到病毒的期間，治療組動(dòng)物血液內(nèi)病毒持續(xù)時(shí)間比對照組明顯要短。不僅治療組豬只病毒血癥持續(xù)的時(shí)間要短，而且其中有一頭豬在整個(gè)試驗(yàn)期間豬瘟病毒檢測呈陰性。另外，當(dāng)我們分析感染7天后病毒滴度的情況時(shí)，發(fā)現(xiàn)BPIP治療組的病毒滴度有相當(dāng)顯著的下降。

減少豬瘟病毒的傳播

為了達(dá)到控制疾病暴發(fā)的目的，其中一個(gè)至關(guān)重要的因素就是要能夠有效的減少豬瘟病毒的傳播和控制疫點(diǎn)病毒的擴(kuò)散。我們評(píng)估了抗病毒療法在減少病毒傳播過程中的潛能。試驗(yàn)過程大致為分別設(shè)立兩組動(dòng)物，一組為治療組（感染BPIP治療組）；另一組為對照組（感染不治療組），再分別用4只動(dòng)物（未感染未治療）與2組動(dòng)物共同飼養(yǎng)。每兩天檢測所有動(dòng)物血液內(nèi)病毒的含量。試驗(yàn)結(jié)果表明，即使與感染動(dòng)物有直接的接觸，但是BPIP治療組的感染動(dòng)物與未感染動(dòng)物間病毒的傳播明顯的減少。其中只有一只動(dòng)物檢測到是由于接觸BPIP治療組動(dòng)物而引起感染的。另一只陽性動(dòng)物很有可能是由于第一個(gè)感染動(dòng)物而引起的二次感染所引起的。對照組中，所有的動(dòng)物都呈陽性，這表明發(fā)生明顯的病毒傳播。通過此次研究取得了一個(gè)清晰的驗(yàn)證，利用病毒抑制劑（例如BPIP）可以有效的控制豬群豬瘟病毒的感染。研究還證實(shí)病毒抑制劑能有效減少病毒對未治療動(dòng)物的傳播，我們強(qiáng)烈的建議病毒抑制劑可以考慮發(fā)展作為控制和撲滅家畜傳染性疾?。ɡ纾i瘟）的一種附加的工具。

“環(huán)式”治療法

“環(huán)式”治療法大體是使用病毒抑制劑作為預(yù)防疫點(diǎn)周圍的動(dòng)物感染病毒，使他們不易于受到病毒的感染。在這個(gè)范圍內(nèi)的所有動(dòng)物也將會(huì)接受治療，以減少潛在感染動(dòng)物將病毒傳播給未感染動(dòng)物。如果日后這種“環(huán)式”治療法得到應(yīng)用，那么兩種方案將可能有所區(qū)別。其中“治療/撲殺”（treat-to-kill）方案的目的主要是緊急的減少傳染病進(jìn)一步擴(kuò)散的壓力。這種方案意味著要屠殺所有需要淘汰的動(dòng)物（不管是否患?。?，但是如果能第一時(shí)間利用抗病毒抑制劑將可以明顯的減少病毒繼續(xù)播散的機(jī)會(huì)，使疫區(qū)的范圍縮小，這表明更少的動(dòng)物將會(huì)受到感染和被屠殺。這種策略也可以綜合的應(yīng)用在目前撲殺和優(yōu)先淘汰的策略上。當(dāng)然，“治療/撲殺”（treat-to-live）方案的最終目的就是使用抗病毒藥物治療，這有可能經(jīng)過治療、未感染和血清陰性動(dòng)物的肉都會(huì)進(jìn)入人的食物鏈。

然而，要想實(shí)現(xiàn)這個(gè)目的，還需要進(jìn)行更徹底深入的研究（例如，藥物殘留，對環(huán)境的影響等）以確保消費(fèi)者的安全健康。萬一暴發(fā)傳染病，使用這種策略需要保證國家或跨國間的合作對于病毒抑制劑的配送落實(shí)到位以保證確實(shí)有效的執(zhí)行措施。通過簡單的使用病毒抑制藥與飼料混合的方法（本文研究所使用的方法），可以快速的達(dá)到抗病毒的效果，而且還可以將藥物送往受威脅的地區(qū)。病毒抑制劑都具有的快速反應(yīng)及即時(shí)的保護(hù)將可以有效的穩(wěn)定疫情。這說明不管是選擇“治療/撲殺”還是“治療/撲殺”方案，病毒抑制劑都可以極大的減少需要撲殺的動(dòng)物數(shù)量，因此可以最大的限制豬瘟暴發(fā)所帶來的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)的影響。