• 
    

    
    

      99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

      紫外光譜法研究2-羥甲基苯并咪唑與DNA的相互作用

      2016-12-06 02:20:04郁有祝宋群立郭玉華
      安陽工學院學報 2016年6期
      關鍵詞:苯并咪唑光譜法緩沖溶液

      郁有祝,宋群立,郭玉華

      (1.安陽工學院化學與環(huán)境工程學院,河南安陽455000;2.許昌幼兒師范學校,河南許昌461700)

      紫外光譜法研究2-羥甲基苯并咪唑與DNA的相互作用

      郁有祝1,宋群立2,郭玉華1

      (1.安陽工學院化學與環(huán)境工程學院,河南安陽455000;2.許昌幼兒師范學校,河南許昌461700)

      用紫外光譜法和黏度法研究2-羥甲基苯并咪唑與DNA的相互作用,考察離子強度對兩者相互作用的影響。結果表明:在pH=7.40的Tris-HCl緩沖溶液中,DNA使2-羥甲基苯并咪唑的紫外吸收光譜減色且紅移,測得2-羥甲基苯并咪唑與DNA的結合常數(shù)為5.2×107L·mol-1。隨2-羥甲基苯并咪唑濃度增大,DNA黏度增大,NaCl濃度增加,DNA-2-羥甲基苯并咪唑體系吸光度無明顯變化,2-羥甲基苯并咪唑以嵌插作用方式與DNA結合。

      2-羥甲基苯并咪唑;DNA;紫外光譜;黏度;相互作用

      D01∶10.19329/j.cnki.1673-2928.2016.06.004

      苯并咪唑是含2個氮原子的芳香雜環(huán),這種特殊的結構可以與生物體內的酶和受體等形成氫鍵。以苯并咪唑環(huán)構筑的藥物分子,有廣泛的生物活性,如作為組胺受體拮抗劑、質子泵抑制劑、抗高血壓、抗菌、抗病毒、抗癌、鎮(zhèn)痛等[1]。同時,獨特的π-共軛結構以及對DNA序列具有高度的選擇性親和作用,使它的衍生物作為分子探針應用于DNA結構的研究。唐凌天等[2]研究發(fā)現(xiàn)在pH= 3.4時2-(4-二甲氨基苯基)-5-氟-6-嗎啉-1-氫-苯并咪唑(1)與小牛胸腺DNA存在明顯的相互作用,分子(1)是一種潛在的測定DNA的定量試劑。因此,苯并咪唑化合物與DNA相互作用的研究,有助于人們從分子水平上了解藥物的作用機理,為設計臨床上以DNA為靶標的藥物分子提供理論指導。

      本文利用紫外光譜結合黏度法研究了2-羥甲基苯并咪唑與DNA的相互作用機理及作用方式,并進一步求出它們的結合常數(shù)。

      1 實驗部分

      1.1 儀器與試劑

      HP8453紫外光譜儀;烏貝路德黏度計(上海良晶玻璃儀器廠);pHS-2C型酸度計(上海虹益儀器儀表有限公司)。

      2-羥甲基苯并咪唑按文獻方法合成和純化[3],配制成濃度為1.00×10-3mol.L-1儲備液;小牛胸腺DNA(Sigma公司),用含有50mmol/L NaCl的Tris-HCl(pH=7.40)緩沖溶液配制,其濃度確定見文獻[4],濃度為3.89×10-4mol/L,溶液保存于4℃冰箱中備用;0.05mol/L Tris-HCl溶液(pH=7.4);1mol/L NaCl溶液;所用試劑均為分析純,實驗用水為二次蒸餾水。

      1.2 實驗方法

      1.2.1 紫外吸收光譜

      分別取0.5mL 1.00×10-3mol.L-12-羥甲基苯并咪唑、不同體積3.89×10-4mol/L DNA溶液、2.0mL 0.05mol/L Tris-HCl(pH=7.4)緩沖溶液于10mL比色管中,用蒸餾水定容,混勻后放置30min,以相應的DNA和Tris-HCl緩沖溶液為參比,測定其在200~400nm的紫外吸收光譜圖。

      1.2.2 DNA黏度測定

      用烏貝路德黏度計測量黏度,溫度恒定在(25 土0.1)℃。黏度測試中,固定DNA的濃度,2-羥甲基苯并咪唑濃度逐漸增加。測試液相對黏度的測量方法及計算見文獻[5]。

      2 結果與討論

      2.1 2-羥甲基苯并咪唑與DNA作用的紫外吸收光譜

      2-羥甲基苯并咪唑與DNA相互作用的紫外吸收光譜圖如圖1所示。加入DNA后,沒有新的吸收峰出現(xiàn),但最大吸收波長處的吸收峰強度隨DNA濃度的增大明顯減小,且吸收峰出現(xiàn)少許紅移。據(jù)Long E C[6]的研究結果,減色效應、紅移現(xiàn)象是物質與DNA發(fā)生嵌插作用的標志。通常認為,插入小分子與堿基對之間存在的堆積作用使得小分子的π*軌道與堿基的π軌道發(fā)生偶合,從而導致π-π*躍遷能量減小,產生紅移現(xiàn)象。同時偶合的π*軌道因部分填充電子,使得π-π*躍遷的概率減小,從而產生減色效應。同時還看到在215nm

      處出現(xiàn)等吸收點,這說明二者形成了穩(wěn)定的絡合物[7]。

      圖1 不同DNA濃度下2-羥甲基苯并咪唑紫外吸收光譜圖

      2.2 結合常數(shù)

      可求小分子與DNA的結合常數(shù)kb。其中,εa為加有一定量DNA的2-羥甲基苯并咪唑的摩爾吸光系數(shù),εb為完全結合DNA后2-羥甲基苯并咪唑的摩爾吸光系數(shù),εf為未加DNA的2-羥甲基苯并咪唑的摩爾吸光系數(shù),CDNA為DNA的濃度。根據(jù)該公式,以CDNA/(εa-εf)對CDNA作圖得到直線(如圖2),直線的斜率與截距之比即為結合常數(shù)Kb,求得2-羥甲基苯并咪唑與ctDNA的結合常數(shù)Kb=5.2×107L·mol-1。

      圖2 2-羥甲基苯并咪唑與DNA的結合常數(shù)

      2.3 黏度實驗

      黏度法也被認為是檢測小分子與DNA相互作用的重要依據(jù)之一[9]。當小分子以嵌插模式與DNA結合時,DNA的相鄰堿基對的距離會變大以容納插入的小分子,導致DNA雙螺旋伸長,DNA溶液的黏度增大;而以靜電或者溝槽模式結合,DNA溶液的黏度無明顯變化[10]。由圖3可見,隨著2-羥甲基苯并咪唑濃度的增大,DNA相對黏度不斷增大,表明2-羥甲基苯并咪唑以嵌插模式與DNA結合,這與2.1結論相一致。

      2.4 離子強度的影響

      離子強度對2-羥甲基苯并咪唑-DNA體系吸光度的影響如圖4所示,隨著NaCl濃度的增大,體系的吸光度幾乎沒有變化,說明2-羥甲基苯并咪唑與DNA之間不存在靜電作用[11]。

      圖3 2-羥甲基苯并咪唑對DNA黏度的影響

      圖4 離子強度的影響

      3 結論

      紫外光譜法、離子強度的影響及黏度實驗表明,在pH=7.40的Tris-HCl緩沖體系中,2-羥甲基苯并咪唑以嵌插方式與DNA結合,測得結合常數(shù)為5.2×107L·mol-1。本文為苯并咪唑類藥物的藥理研究提供一定的理論依據(jù)。

      [1]孟江平,耿蓉霞,周成合,等.苯并咪唑類藥物研究進展[J].中國新藥雜志,2009,18(16)∶1506-1514.

      [2]唐凌天,王毅,劉新起,等.光譜法研究2-(4-二甲氨基苯基)-5-氟-6-嗎啉-1-氫-苯并咪唑與小牛胸腺DNA的相互作用[J].光譜學與光譜分析,2005,25(10)∶1618-1621.

      [3]陳偉.苯并咪唑衍生物的合成及其金屬配合物羰基化催化反應研究[D].西安:西北大學,2010.

      [4]CATER M T,RODRIGUEZ M,BARD A J.Voltammetric studies of the interaction of metal chelates with DNA.2.Trischelated complexes of cobalt(III)and iron(II)with 1,10-phen?anthroline and 2,2'-bipyridine[J].J Am Chem Soc,1989,111 (24)∶8901-8911.

      [5]劉幸平,胡潤淮,杜薇.物理化學[M].北京∶科學出版社,2002,275.

      [6]LONG E C,BARTON J K.On Demonstration DNA Interca?lation[J].Accounts Chem.Res.,1990,23(9)∶271-273.book=2016,ebook=27

      O657.32

      A

      1673-2928(2016)06-0010-03

      2016-03-11

      郁有祝(1978-),男,山東臨沂人,安陽工學院副教授,主要從事有機分析方面研究。

      猜你喜歡
      苯并咪唑光譜法緩沖溶液
      幾種緩沖溶液簡介及應用*
      化學與粘合(2020年6期)2020-03-08 09:06:30
      芬頓氧化處理苯并咪唑類合成廢水實驗研究
      基礎化學緩沖溶液教學難點總結
      科技視界(2017年25期)2017-12-11 20:30:32
      直讀光譜法測定熱作模具鋼中硫的不確定度評定
      紅外光譜法研究TPU/SEBS的相容性
      中國塑料(2016年10期)2016-06-27 06:35:22
      原子熒光光譜法測定麥味地黃丸中砷和汞
      中成藥(2016年8期)2016-05-17 06:08:22
      1,1-二(苯并咪唑-2-基)-2-(喹喔啉-2-基)乙烯的合成及其性能
      合成化學(2015年2期)2016-01-17 09:03:42
      原子熒光光譜法測定銅精礦中鉍的不確定度
      2-氨甲基-1H-苯并咪唑鈷(Ⅱ)和鎳(Ⅱ)配合物的合成、晶體結構和抑菌活性
      2-(4-羧基苯基)-苯并咪唑和銅(Ⅱ)二元配位聚合物的合成及晶體結構
      颍上县| 潢川县| 乐至县| 郧西县| 长白| 宁晋县| 武夷山市| 内黄县| 潼南县| 长顺县| 五台县| 扎赉特旗| 河池市| 沁阳市| 古田县| 龙井市| 枣强县| 三门峡市| 新建县| 通州区| 天台县| 曲周县| 佛坪县| 鹤庆县| 庆安县| 镇坪县| 泗阳县| 淳安县| 九台市| 麟游县| 华宁县| 安岳县| 镇平县| 余姚市| 射洪县| 平塘县| 陆河县| 阿尔山市| 广昌县| 蓝山县| 都匀市|