一例比格犬先天性隱睪的組織病理學(xué)觀察

胡建廷，邱 波，王韶艷，屈卉錦，王鳳乾，張 鑫，英 永

(山東省藥學(xué)科學(xué)院 山東省化學(xué)藥物重點(diǎn)實驗室，山東濟(jì)南 250101)

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一例比格犬先天性隱睪的組織病理學(xué)觀察

胡建廷，邱 波，王韶艷，屈卉錦，王鳳乾，張 鑫，英 永*

(山東省藥學(xué)科學(xué)院 山東省化學(xué)藥物重點(diǎn)實驗室，山東濟(jì)南 250101)

通過研究隱睪癥比格(Beagle)犬睪丸、附睪的組織病理學(xué)改變，建立適用于GLP的實驗動物背景性資料。采用常規(guī)組織學(xué)方法，對比格犬隱睪及正常側(cè)睪丸、附睪進(jìn)行光學(xué)顯微鏡觀察，確定組織病理學(xué)變化特點(diǎn)。與正常組織相比，隱睪膠原纖維組織增生，睪丸曲細(xì)精管內(nèi)僅見少量精原細(xì)胞及支持細(xì)胞。附睪間質(zhì)增寬，間質(zhì)內(nèi)填充增生的膠原纖維，附睪管內(nèi)精子缺如。需加強(qiáng)比格犬自發(fā)病變的病理監(jiān)測，為藥物安全性評價提供實驗動物的背景資料。

比格犬；隱睪；組織病理學(xué)

比格犬在解剖學(xué)、生理學(xué)、營養(yǎng)代謝等方面與人類相似，是人類醫(yī)學(xué)研究的理想模型動物，因此廣泛應(yīng)用于藥理毒理學(xué)研究中。比格犬自發(fā)性病變較多，國內(nèi)外學(xué)者也開展了大量的相關(guān)研究[1-4]，但目前對先天性隱睪癥比格犬睪丸、附睪的組織病理學(xué)變化鮮有研究報道。本文以藥物非臨床安全性評價研究中出現(xiàn)的一例單側(cè)隱睪癥比格犬為研究對象,探討其睪丸、附睪的組織病理學(xué)變化特征，為藥物非臨床安全性評價提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與飼養(yǎng)條件

普通級比格犬，購自北京瑪斯生物技術(shù)有限公司，實驗動物生產(chǎn)許可證號：SCXK(京)2011-0003。動物飼養(yǎng)于本中心屏障環(huán)境( 普通級) 動物房[SYXK(魯) 2010-0004]。動物剖檢時體重12 kg，24 月齡。

1.2 方法

1.2.1 動物剖檢 剖檢前動物隔夜禁食不禁水，經(jīng)戊巴比妥鈉麻醉，頸動脈放血處死。腹腔內(nèi)摘取隱睪組織，體外陰囊內(nèi)摘取正常側(cè)睪丸和附睪，觀察隱睪形態(tài)學(xué)變化。所有組織修整后均放入改良的Davidson液中固定[5]。

1.2.2 組織病理學(xué)觀察 對固定好的組織進(jìn)行常規(guī)脫水、石蠟包埋、切片、HE和Masson染色[6]、光學(xué)顯微鏡下觀察。

2 結(jié)果

2.1 解剖學(xué)形態(tài)觀察

隱睪質(zhì)地變硬，體積明顯變小，重量明顯減輕(圖1)。

2.2 組織病理學(xué)觀察

正常側(cè)睪丸曲細(xì)精管內(nèi)精原細(xì)胞、初級精母細(xì)胞、精子細(xì)胞等各時期的生精細(xì)胞，支持細(xì)胞及精子明顯可見，睪丸間質(zhì)未見膠原纖維增生，Leydig細(xì)胞可見。附睪管內(nèi)可見大量成熟的精子，附睪間質(zhì)未見增寬(圖2和圖3)。與正常側(cè)相比，隱睪膠原纖維明顯增生。隱睪睪丸被增生的藍(lán)染的膠原纖維所包裹，曲細(xì)精管內(nèi)僅見少量的精原細(xì)胞及支持細(xì)胞，其余各級生精細(xì)胞缺失，睪丸間質(zhì)未見Leydig細(xì)胞；附睪間質(zhì)增寬，被增生的膠原纖維所填充，管腔內(nèi)未見精子(圖4和圖5)。

圖1 與正常側(cè)(右)相比，隱睪(左)體積明顯減小，重量明顯減輕

Fig.1 Compared with normal(right),the volume and weight of cryptorchid(left) decreased obviously

圖2 正常側(cè)睪丸，曲細(xì)精管內(nèi)可見各時期的生精細(xì)胞、支持細(xì)胞及精子(Masson染色，100×)

Fig.2 Germ cells,Sertoli cells and sperms were observed in seminiferous tubules of normal testis(Masson，100×)

圖3 正常側(cè)附睪，附睪管內(nèi)成熟精子明顯可見 (Masson染色，100×)

圖4 隱睪睪丸被增生的膠原纖維包裹，曲細(xì)精管內(nèi)僅見少量的精原細(xì)胞及支持細(xì)胞，其余各級生精細(xì)胞缺失(Masson染色，100×)

Fig.4 The undescended testis was packaged by proliferated collagen fiber，only a small amount of spermatogonia and Sertoli cells were observed in seminiferous tubules,and lack of other spermatogenic cells (Masson，100×)

圖5 隱睪附睪間質(zhì)增寬，間質(zhì)被增生的膠原纖維所填充，管腔內(nèi)無精子(Masson染色，100×)

Fig.5 Interstitial tissue broaden and filled with collagen fiber in undescendedepididymis,sperms were not observed in ductuse pididymidis(Masson，100×)

3 討論

隱睪癥是指睪丸未能按正常發(fā)育過程通過腹股溝管沿著腹膜鞘突下降至陰囊，而停留在下降途中某一部位的一種常見的先天畸形。正常情況下，犬在出生前后睪丸從腹腔下降至陰囊內(nèi)，若一側(cè)或者兩側(cè)未下降至陰囊，則形成隱睪，一般情況下單側(cè)多見[7]。內(nèi)分泌功能不足或缺乏、先天性纖維帶的阻止、精索過短等是可能導(dǎo)致隱睪癥發(fā)生的主要因素[8]。本研究以單側(cè)隱睪癥比格犬為研究對象，對其睪丸、附睪進(jìn)行了大體解剖學(xué)和組織病理學(xué)觀察。結(jié)果顯示，與正常對照側(cè)相比隱睪質(zhì)地變硬、體積縮小、重量減輕；組織病理學(xué)觀察結(jié)果為隱睪膠原纖維明顯增生，隱睪睪丸被增生的膠原纖維所包裹，睪丸曲細(xì)精管內(nèi)僅見少量的精原細(xì)胞及支持細(xì)胞，其余各級精子細(xì)胞缺失，睪丸間質(zhì)未見Leydig細(xì)胞；附睪間質(zhì)增寬，被增生的膠原纖維所填充，管腔內(nèi)未見精子。檢查結(jié)果與文獻(xiàn)報道相一致[9-10]。

隱睪在發(fā)育過程中停留在腹腔或腹股溝內(nèi)，由于所處環(huán)境溫度較高導(dǎo)致生精細(xì)胞和支持細(xì)胞持續(xù)性損害[11-12],影響精子的正常發(fā)生，因此表現(xiàn)為曲細(xì)精管內(nèi)各級生精細(xì)胞缺失、附睪管內(nèi)見不到成熟的精子。實質(zhì)和間質(zhì)細(xì)胞的持續(xù)性損害引發(fā)機(jī)體損傷修復(fù)機(jī)制[13]，導(dǎo)致膠原纖維的增生，表現(xiàn)為隱睪質(zhì)地變硬、膠原纖維包裹和填充。另外，不適當(dāng)?shù)男迯?fù)還有可能引起睪丸實質(zhì)或間質(zhì)細(xì)胞腫瘤的發(fā)生[14-15]。

本研究以大體解剖觀察為基礎(chǔ)，應(yīng)用Masson三聯(lián)染色，透過光鏡觀察詳細(xì)描述了單側(cè)隱睪癥比格犬患側(cè)睪丸和附睪的組織病理學(xué)變化特征，為隱睪所致生精障礙提供了病理形態(tài)學(xué)依據(jù)，為藥物非臨床安全性評價提供了病理學(xué)背景資料。

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A Case of Histopathological Observation of Inborn Cryptorchid in Beagle Dog

HU Jian-ting, QIU Bo, WANG Shao-yan, QU Hui-jin, WANG Feng-qian, ZhANG Xin, YING Yong

(ShandongPharmaceuticalAcademy,ShandongProvincialKeyLaboratoryofChemicalDrugs,Jinan，Shandong， 250101，China)

To study the histopathological changes of testis and epididymis in cryptorchid of a Beagle dog and establish the backgroud information of experimental animals for GLP.With conventional histological methods,the histopathological feature of cryptorchid was described with optical microscope.Compared with normal, cryptorchid collagen fiber tissue hyperplasia was found.Only a small amount of spermatogonia and Sertoli cells were observed in seminiferous tubules.Interstitial tissue broaden and filled with collagen fibers in epididymis.Sperms were not observed in ductus epididymidis.It is suggested that spontaneous lesions should be monitored so as to provide the shistopathological backgroud information of experimental animal for drug safety evaluation.

Beagle dog；cryptorchid；histopathology

2016-03-24

山東省自主創(chuàng)新及成果轉(zhuǎn)化專項(2014ZZCX02104)

胡建廷(1979-)，男，山東聊城人，副主任藥師，碩士，主要從事毒性病理學(xué)研究。*通訊作者

S852.2

B

1007-5038(2016)11-0133-03