用GC法測(cè)定克利貝特中5種殘留溶劑的效果分析

彭 杰 張 娟 王翠香

（德州德藥制藥有限公司 山東 德州 253015）

克利貝特是我公司研發(fā)的一種調(diào)脂藥。此藥在生產(chǎn)過(guò)程中使用了乙醇、二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃和環(huán)己烷這五種有機(jī)溶劑。其中，二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃和環(huán)己烷均屬于二類(lèi)限制性有機(jī)溶劑，乙醇屬于三類(lèi)限制性有機(jī)溶劑。因此，準(zhǔn)確地檢測(cè)出克利貝特中殘留的上述5種溶劑對(duì)證實(shí)克利貝特屬于合格藥品具有重要的意義[1]。在本次研究中，我公司使用GC法測(cè)定克利貝特中的5種殘留溶劑，取得了很好的效果?，F(xiàn)將此情況報(bào)告如下：

1 實(shí)驗(yàn)用的儀器與藥品

本次實(shí)驗(yàn)使用的儀器包括Agilent7890B型氣相色譜儀、Mettler AL104型電子天平、氫火焰離子化檢測(cè)器、氮?dú)?、克利貝特、乙醇、二氯甲烷、環(huán)己烷、正己烷、四氫呋喃。在本次研究中，我公司根據(jù)《中國(guó)藥典》（2010年版）規(guī)定的內(nèi)容，選用N,N-二甲基甲酰胺作為溶劑[2]。本次實(shí)驗(yàn)選用的乙醇、二氯甲烷、環(huán)己烷、正己烷、四氫呋喃和N,N-二甲基甲酰胺均為色譜純。

2 測(cè)定條件

本次實(shí)驗(yàn)的色譜柱為：DB-624(30m×530μm×3.0μm)，進(jìn)樣口的溫度為：200℃，檢測(cè)器的溫度為250℃，采用程序升溫法對(duì)柱溫進(jìn)行升溫，起始溫度為40℃，保持3min后按照15℃/min的速度將柱溫升至200℃，保持10min。本次實(shí)驗(yàn)的進(jìn)樣方式為直接進(jìn)樣，進(jìn)樣量為：1μl。

3 溶液配制

3.1 對(duì)照品溶液的配制

精密稱(chēng)取適量的乙醇、二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃和環(huán)己烷。向每種成分中加入1ml的 N，N-二甲基甲酰胺，分別制成有效含量為0.029mg、0.5mg、0.072mg、0.388mg和0.06mg的對(duì)照品溶液。

3.2 供試品溶液的配制

精密稱(chēng)取適量的克利貝特，將其加入到N，N-二甲基甲酰胺中并稀釋?zhuān)瞥蓾舛葹?.1g/ml的供試品溶液。

4 方法學(xué)考察

4.1 進(jìn)行線(xiàn)性關(guān)系試驗(yàn)

精密稱(chēng)取乙醇1.2386g、二氯甲烷0.1450g、環(huán)己烷0.9594g、正己烷0.0757g、四氫呋喃0.1729g。將這5種溶劑分別放入25ml的量瓶中，向每個(gè)量瓶中加入適量的DMF進(jìn)行稀釋?zhuān)缓髶u勻，作為1級(jí)貯備液。分別精密稱(chēng)取5種1級(jí)貯備液各10ml，將其分別放入100ml的量瓶中，加DMF進(jìn)行稀釋?zhuān)缓髶u勻，作為對(duì)照品貯備液。精密稱(chēng)取5 種 對(duì) 照 品 貯 備液各 0.5ml、1.0ml、3.0ml、5.0ml、6.0ml、8.0ml，將其分放入50ml的量瓶中，用DMF進(jìn)行稀釋?zhuān)缓髶u勻并進(jìn)行線(xiàn)性關(guān)系測(cè)定。結(jié)果：這5種溶劑的線(xiàn)性關(guān)系良好。詳情見(jiàn)表1

表1 這5種溶劑的線(xiàn)性關(guān)系

環(huán)己烷 Y=3.0749x+0.1748 38.38～614.02μg/ml 0.9996

4.2 進(jìn)行精密度試驗(yàn)

取4.1中的對(duì)照品貯備液作為精密度溶液，對(duì)其連續(xù)進(jìn)樣6次。其中，乙醇峰面積的RSD值為：2.3%，二氯甲烷峰面積的RSD值為：2.9%，環(huán)己烷峰面積的RSD值為：3.8%，正己烷峰面積的RSD值為：2.7%，四氫呋喃峰面積的RSD值為：3.8%。這5種溶劑峰面積的RSD值均小于5%[2]，表明儀器的精密度良好。

4.3 進(jìn)行加樣回收率試驗(yàn)

精密稱(chēng)取“4.1”中的5種1級(jí)貯備液各5ml，將其放入50ml的量瓶中，用N，N二甲基甲酰胺進(jìn)行稀釋后作為2級(jí)貯備液。精密稱(chēng)取2級(jí)貯備液4.0ml、5.0ml、6.0ml，將其分別放入50ml的量瓶中，用DMF進(jìn)行稀釋?zhuān)缓筮M(jìn)行回收率的測(cè)定。稱(chēng)取9份（每分1g）克利貝特，分別放入10ml的量瓶中，向其中加入低、中、高濃度的貯備液各三份，然后精密稱(chēng)取本品0.9762g放入10ml的量瓶中，加入DMF進(jìn)行稀釋?zhuān)瑩u勻后作為作為供試品溶液。對(duì)供試品溶液進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，采用本法測(cè)定克利貝特中殘留的5種溶劑效果很好，且回收率良好。詳情見(jiàn)表2

4.4 進(jìn)行檢測(cè)限試驗(yàn)

經(jīng)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，乙醇的檢測(cè)限為：0.03μg/ml，二氯甲烷的檢測(cè)限為：0.6μg/ml，正己烷的檢測(cè)限為：0.15μg/ml，四氫呋喃的檢測(cè)限為：0.35μg/ml，環(huán)己烷的檢測(cè)限為：0.04μg/ml。

4.5 進(jìn)行樣品測(cè)定

對(duì)3批次的克利貝特樣品進(jìn)行溶劑殘留測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 進(jìn)行加樣回收率試驗(yàn)的結(jié)果

表3 進(jìn)行樣品測(cè)定的結(jié)果

總之，使用GC法可準(zhǔn)確地測(cè)定克利貝特中殘留的乙醇、二氯甲烷、正己烷、四氫呋喃和環(huán)己烷。此方法值得在藥物質(zhì)量控制工作中推廣使用。