李煉星，李 浩，沈和定，杜文俊

( 上海海洋大學(xué) 省部共建水產(chǎn)種質(zhì)資源發(fā)掘與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201306 )

縊蟶流水育苗試驗(yàn)

李煉星，李 浩，沈和定，杜文俊

( 上海海洋大學(xué) 省部共建水產(chǎn)種質(zhì)資源發(fā)掘與利用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，上海 201306 )

為探索流水條件與換水操作對(duì)縊蟶育苗初期的影響，2015年9月在三門(mén)東航水產(chǎn)育苗場(chǎng)進(jìn)行試驗(yàn)，試驗(yàn)桶X(編號(hào)1、2、3*、4*、5*、6*)設(shè)置篩絹網(wǎng)與進(jìn)出水開(kāi)關(guān)控制流水速度，試驗(yàn)桶Y(編號(hào)7、8)未設(shè)置篩絹網(wǎng)且進(jìn)行倒池操作，水溫26～27.5 ℃，pH 8.0～8.2，鹽度13，光照度低于1000 lx。結(jié)果表明,對(duì)于非流水性育苗，加大換水量與設(shè)置篩絹網(wǎng)減少機(jī)械損傷能夠顯著提高縊蟶幼蟲(chóng)期的存活率(P<0.05)，對(duì)孵化及生長(zhǎng)變態(tài)等指標(biāo)無(wú)顯著影響(P>0.05)；對(duì)于流水性育苗，當(dāng)換水量逐漸加大時(shí)，縊蟶卵子的受精率降低，受精卵的孵化率在提高后回落，D形幼蟲(chóng)規(guī)格無(wú)顯著差異(P>0.05)，稚貝規(guī)格與變態(tài)率降低，變態(tài)時(shí)間延長(zhǎng)，縊蟶幼蟲(chóng)的殼長(zhǎng)在試驗(yàn)中后期生長(zhǎng)速率減緩、存活率降低，但與非流水性試驗(yàn)組的殼長(zhǎng)及存活率數(shù)據(jù)進(jìn)行對(duì)比得出，當(dāng)流水量較小時(shí)，縊蟶幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)無(wú)顯著差異(P>0.05)，存活率有明顯提高。本試驗(yàn)驗(yàn)證了適量的流水性育苗與不倒池?fù)Q水操作可以顯著提高縊蟶幼蟲(chóng)孵化率、變態(tài)率、存活率，對(duì)變態(tài)時(shí)間與稚貝規(guī)格無(wú)顯著影響。

縊蟶；流水；育苗；殼長(zhǎng)；存活率

縊蟶(Sinonovaculaconstricta)俗稱蟶子、青子，屬軟體動(dòng)物門(mén)、瓣鰓綱、異齒亞綱、簾蛤目、竹蟶科、縊蟶屬[1]。我國(guó)沿海均已開(kāi)展養(yǎng)殖，2014年的全國(guó)產(chǎn)量達(dá)786 828 t[2]。

縊蟶人工育苗技術(shù)研究已有諸多報(bào)道，多是關(guān)于親蟶催產(chǎn)及后期培養(yǎng)等，如金彬明[3]通過(guò)工廠化育苗生產(chǎn)試驗(yàn)表明，選取灘涂養(yǎng)殖的成熟縊蟶作為育苗親貝可以取得更好的效果；吳洪喜等[4]的縊蟶人工育苗試驗(yàn)表明，縊蟶受精卵發(fā)育速度主要受水溫影響，其孵化積溫為370～390 ℃·h，同時(shí)溫度也是浮游幼蟲(chóng)生長(zhǎng)速度的主要影響因素；何進(jìn)金等[5]關(guān)于縊蟶浮游幼蟲(chóng)餌料的研究表明，叉鞭金藻(Dicrateriazhanjiangensis)、鈣質(zhì)角毛藻(Chaetoceroscalcutrans)和三角褐指藻(Phaeodactylumtricornutum)均為縊蟶浮游幼蟲(chóng)的良好餌料，但對(duì)稚貝而言只有叉鞭金藻和鈣質(zhì)角毛藻才能起到良好效果。

縊蟶人工育苗技術(shù)可以顯著提高育苗產(chǎn)量，但在工廠化育苗過(guò)程中，浮游期幼蟲(chóng)死亡率高，變態(tài)期間變態(tài)率低等問(wèn)題突出，是制約出苗量的主要原因，而關(guān)于縊蟶工廠化育苗技術(shù)進(jìn)一步優(yōu)化的相關(guān)研究仍少見(jiàn)報(bào)道。為進(jìn)一步提高并保證縊蟶工廠化育苗的苗種產(chǎn)量與質(zhì)量，根據(jù)淡水四大家魚(yú)已有的流水育苗經(jīng)驗(yàn)[6]對(duì)縊蟶早期育苗進(jìn)行了流水育苗探索，得到了良好效果，旨在為當(dāng)今縊蟶苗種產(chǎn)業(yè)提供一定的技術(shù)支持。

1 材料與方法

1.1 縊蟶親貝來(lái)源與催產(chǎn)

殼長(zhǎng)5.1～5.3 cm、體質(zhì)量7.6～8.2 g的縊蟶親貝取自樂(lè)清灣南岳鎮(zhèn)，選取體表完好、無(wú)機(jī)械損傷、無(wú)畸形、性腺充分發(fā)育的1 齡縊蟶100粒，陰干流水催產(chǎn)[7]，挑選正在排卵與排精的親貝，沖洗后分別放入小桶中繼續(xù)排卵與排精，直至停止，卵子計(jì)數(shù)。砂濾海水水溫26～27.5 ℃，pH值8.0～8.2，鹽度13，光照度低于1000 lx[8]。

1.2 試驗(yàn)裝置設(shè)置

試驗(yàn)桶X在距離底部15 cm處固定一層300目篩絹網(wǎng)，進(jìn)水口設(shè)置在水桶頂部，出水口接近水桶底部，進(jìn)水口與出水口均設(shè)閥門(mén)，試驗(yàn)桶Y除未安裝300目篩絹網(wǎng)外，設(shè)置均與試驗(yàn)桶X相同。試驗(yàn)桶高70 cm，底直徑36 cm，容積約65 L(圖1)。

圖1 試驗(yàn)桶結(jié)構(gòu)示意

1.3 操作過(guò)程

(1)設(shè)置試驗(yàn)桶X 6個(gè)和試驗(yàn)桶Y 2個(gè)，預(yù)先放入40 L砂濾海水，曝氣。

(2)卵子平均分配入各桶，密度為12粒/mL[9-10]。

(3)往各桶中倒入適量的精子懸濁液，控制精卵比為1000∶1。

(4)通過(guò)閥門(mén)控制換水，其中1、2、7、8號(hào)桶為非流水性育苗，3*、4*、5*、6*號(hào)桶為流水性育苗(以B1、B2、B3*、B4*、B5*、B6*、B7、B8表示各試驗(yàn)組)，換水操作如下：

a.試驗(yàn)桶X直接通過(guò)出水閥門(mén)換水：

① B1：孵化后半量換水一次，之后隔24 h半量換水；

② B2：孵化后全量換水一次，之后隔24 h全量換水；

③ B3*、B4*、B5*、B6*：始終保持桶內(nèi)水體流動(dòng)，換水速率分別控制為5 L/h，15 L/h，25 L/h，35 L/h；

b.試驗(yàn)桶Y在出水口套上300目篩絹網(wǎng)袋進(jìn)行濾苗換水：

① B7：孵化后半量換水一次，之后隔24 h半量換水；

② B8：孵化后全量換水一次，之后隔24 h全量換水。

(5)試驗(yàn)階段為精卵結(jié)合至試驗(yàn)組中幼蟲(chóng)完成變態(tài)的時(shí)間，較早完成變態(tài)的試驗(yàn)組幼苗用200目篩絹網(wǎng)過(guò)濾后，轉(zhuǎn)移至預(yù)先鋪有約3 mm厚海泥(烘烤消毒且經(jīng)200目篩絹網(wǎng)過(guò)濾處理)的試驗(yàn)桶中且容量及編號(hào)不變，定時(shí)使用虹吸法換水15 L/d。

(6)試驗(yàn)設(shè)置兩組重復(fù)。當(dāng)觀察到試驗(yàn)桶中幼蟲(chóng)約有30%以上變態(tài)至D形幼蟲(chóng)時(shí)開(kāi)始投喂餌料。D形幼蟲(chóng)和殼頂前期早晚2次投喂密度約2.5×106個(gè)/mL的叉鞭金藻1 L；殼頂中后期改為早晚2次投喂密度6×106個(gè)/mL的鈣質(zhì)角毛藻1 L，變態(tài)伏底后增加投喂量至1.5 L。

1.4 測(cè)定指標(biāo)

測(cè)定受精率、孵化率、變態(tài)率和變態(tài)時(shí)間，各日齡幼蟲(chóng)的殼長(zhǎng)與成活率。

分別對(duì)各試驗(yàn)組的受精卵、面盤(pán)幼蟲(chóng)、變態(tài)階段進(jìn)行計(jì)數(shù)。自D形幼蟲(chóng)期開(kāi)始，每隔24 h測(cè)量殼長(zhǎng)，每組隨機(jī)測(cè)量30粒個(gè)體。孵化率為D形幼蟲(chóng)密度與受精卵密度的百分比，存活率為幼蟲(chóng)密度與初始D形幼蟲(chóng)密度的百分比；變態(tài)率為長(zhǎng)出斧足、水管的幼蟲(chóng)與D形幼蟲(chóng)數(shù)量的百分比；變態(tài)時(shí)間為自孵化至90%幼蟲(chóng)完成變態(tài)的時(shí)間[11]。

應(yīng)用SPSS 17.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理分析，對(duì)各桶間的數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析，Turkey HSD進(jìn)行多重比較，差異顯著性設(shè)為P<0.05。

2 結(jié) 果

2.1 各試驗(yàn)組孵化參數(shù)

表1 各試驗(yàn)組的幼蟲(chóng)孵化參數(shù)

注：相同符號(hào)的同一列表明無(wú)顯著差異(P>0.05)，下同.

各試驗(yàn)組幼蟲(chóng)孵化參數(shù)見(jiàn)表1。由表1可見(jiàn)，除B5*、B6*外，其余各試驗(yàn)組受精率無(wú)顯著差異(P>0.05)，B6*與B5*受精率差異顯著(P<0.05)且受精水平均顯著低于其余各試驗(yàn)組(P<0.05)，B6*的受精率(89.69%)最低。通過(guò)對(duì)各試驗(yàn)組受精卵孵化率進(jìn)行比較，B1、B2、B7、B8的孵化率差異不顯著(P>0.05)，且處于較低水平；B5*的孵化率(74.47%)最高，顯著大于其余各試驗(yàn)組(P<0.05)。各試驗(yàn)組中D形幼蟲(chóng)規(guī)格差異不顯著(P>0.05)。

2.2 各試驗(yàn)組縊蟶幼蟲(chóng)的變態(tài)情況

各試驗(yàn)組的變態(tài)參數(shù)見(jiàn)表2。由表2可見(jiàn)，比較各試驗(yàn)組中稚貝規(guī)格,除B5*、B6*外其余各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，B6*變態(tài)規(guī)格(285.31 μm)最小，與其余各試驗(yàn)組差異顯著(P<0.05)。比較各試驗(yàn)組中幼蟲(chóng)的變態(tài)時(shí)間，除B5*、B6*外其余各試驗(yàn)組差異不顯著(P>0.05)，B5*、B6*的變態(tài)時(shí)間顯著大于其余各試驗(yàn)組(P<0.05)，B6*的變態(tài)時(shí)間(178.60 h)最長(zhǎng)。比較各試驗(yàn)組中幼蟲(chóng)的變態(tài)率，B1、B2、B5*、B7、B8差異不顯著，B4*的變態(tài)率(79.64%)最高，B6*的變態(tài)率(45.83%)最低，B4*與B6*的變態(tài)率相差33.81%。

表2 各試驗(yàn)組的變態(tài)參數(shù)

圖2 幼蟲(chóng)的殼長(zhǎng)

圖3 幼蟲(chóng)的存活率

2.3 試驗(yàn)階段中各試驗(yàn)組的生長(zhǎng)情況及幼蟲(chóng)存活率

B3*、B4*組的幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)在生長(zhǎng)早期顯著大于其余各試驗(yàn)組(P<0.05)，之后生長(zhǎng)速度減緩，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)B3*、B4*稚貝殼長(zhǎng)略小于B1、B2、B7、B8，同時(shí)B4*的稚貝平均殼長(zhǎng)小于B3*；B5*、B6*的幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)分別在試驗(yàn)開(kāi)始5 d和4 d之后顯著小于其它各試驗(yàn)組(P<0.05)，且B6*顯著低于B5*(P<0.05)；B1、B2、B7、B8的幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)在整個(gè)試驗(yàn)階段并未表現(xiàn)出顯著差異，但從平均殼長(zhǎng)可以看出，B7、B8的殼長(zhǎng)在一定程度上小于B1、B2(圖2)。

B4*中幼蟲(chóng)的存活率在整個(gè)試驗(yàn)階段均處于最高水平，且在4 d之后與其余各試驗(yàn)組之間差異顯著(P<0.05)；B3*的幼蟲(chóng)存活率僅次于B4*，在試驗(yàn)階段的第5、7、8 日與其余各試驗(yàn)組差異顯著(P<0.05)；B8的幼蟲(chóng)存活率在試驗(yàn)早期處于中等水平，但隨著試驗(yàn)的推進(jìn)其存活率明顯下降，至試驗(yàn)結(jié)束時(shí)處于最低水平；B5*與B6*的幼蟲(chóng)存活率從試驗(yàn)開(kāi)始1 d后差異顯著(P<0.05)，且處于各試驗(yàn)組中較低水平(圖3)。

3 討 論

3.1 非流水性育苗

通過(guò)對(duì)結(jié)果中非流水性試驗(yàn)組直接半量換水組、直接全量換水組、篩絹半量換水組、篩絹全量換水組的數(shù)據(jù)進(jìn)行分析表明，不同換水量與篩絹網(wǎng)的設(shè)置僅顯著影響縊蟶幼蟲(chóng)的存活率。

直接半量換水組中幼蟲(chóng)存活率在試驗(yàn)階段均低于直接全量換水組，在第3、5、6、7、8日齡具有顯著差異，說(shuō)明加大換水量有利于提高幼蟲(chóng)的存活率；篩絹半量換水組的幼蟲(chóng)存活率在試驗(yàn)階段中后期顯著高于篩絹全量換水組，初步推測(cè)為換水過(guò)程中的沖苗與篩洗等人為操作造成較高的幼蟲(chóng)死亡率[12]，同時(shí)這種人為操作甚至能抵消加大換水量對(duì)幼蟲(chóng)成活率帶來(lái)的有利影響，因此篩絹半量換水組的幼蟲(chóng)存活率要高于篩絹全量換水組。由此可見(jiàn)，在人工育苗生產(chǎn)過(guò)程中要格外注意人為操作給幼蟲(chóng)帶來(lái)的影響；通過(guò)比較直接半量及全量換水組與篩絹半量及全量換水組的幼蟲(chóng)存活率表明，加大換水量與設(shè)置篩網(wǎng)可顯著提高縊蟶育苗初期的幼蟲(chóng)存活率。

3.2 流水對(duì)縊蟶孵化的影響

結(jié)合各試驗(yàn)組的孵化參數(shù)可以看出，隨著換水量加大，卵子受精率有一定降低，受精卵的孵化率提高后回落，D形幼蟲(chóng)的規(guī)格沒(méi)有顯著差異。初步推測(cè)造成這種變化的原因是換水量加大,流水速度過(guò)快，導(dǎo)致一部分卵子、受精卵或D形幼蟲(chóng)被吸附在篩絹網(wǎng)的網(wǎng)孔上無(wú)法擺脫，從而導(dǎo)致消亡或計(jì)數(shù)結(jié)果失真，通過(guò)對(duì)篩網(wǎng)檢查驗(yàn)證了推測(cè)。孵化率先升高后回落，表明換水量的加大有利于孵化率的提高，其原因可能是流水有利于快速帶走水體中的一些幼蟲(chóng)代謝物質(zhì)及一些死亡個(gè)體及藻類的腐敗雜質(zhì)[13]，保證水體質(zhì)量。由于縊蟶自受精卵孵化到D形幼蟲(chóng)的過(guò)程中，其能量來(lái)源主要是卵黃，換水量的大小對(duì)D形幼蟲(chóng)規(guī)格并未造成直接影響，因此各流水組的D形幼蟲(chóng)規(guī)格沒(méi)有顯著差異。

3.3 流水對(duì)縊蟶幼蟲(chóng)變態(tài)的影響

結(jié)合各試驗(yàn)組的變態(tài)參數(shù)可以看出，當(dāng)流水量加大時(shí)，幼蟲(chóng)的稚貝規(guī)格和變態(tài)率減小，變態(tài)時(shí)間增長(zhǎng)。初步推測(cè)為流水量加大時(shí)，桶中的藻類餌料流失速度加快，影響幼蟲(chóng)攝食，無(wú)法攝取充足能量完成變態(tài)發(fā)育[14]，同時(shí)對(duì)篩網(wǎng)進(jìn)行檢查表明，變態(tài)率的降低還有部分原因是由于流水速度過(guò)快導(dǎo)致活力弱的幼蟲(chóng)吸附于篩網(wǎng)上而死亡。

3.4 流水對(duì)縊蟶幼蟲(chóng)生長(zhǎng)及存活的影響

結(jié)合各試驗(yàn)組幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)情況和存活率可以看出，流水量加大時(shí)，幼蟲(chóng)在中后期生長(zhǎng)緩慢，存活率不斷降低，與非流水性試驗(yàn)組的殼長(zhǎng)及存活率對(duì)比，當(dāng)流水量較小時(shí)，幼蟲(chóng)殼長(zhǎng)無(wú)顯著差異，存活率顯著提高，表明適當(dāng)?shù)牧魉繉?duì)縊蟶幼蟲(chóng)的殼長(zhǎng)影響不大，但對(duì)存活率影響顯著，部分原因可能是新鮮海水提高了存活率，而過(guò)高的流水量導(dǎo)致餌料流失從而降低幼蟲(chóng)的生長(zhǎng)速率與存活率，同時(shí)，過(guò)大的換水量使得幼蟲(chóng)不能快速適應(yīng)新的生存環(huán)境也會(huì)對(duì)其存活率造成影響[12,15]。水體流速也是影響貝類的一個(gè)因素，有研究表明[16]，當(dāng)水體流速超出一定限度時(shí)(15～20 cm/s)，太平洋牡蠣(Crassostreagigas)的生長(zhǎng)受到抑制。包永波等[17]總結(jié)得到，在適宜的流速范圍內(nèi)，流速的提高加快了貝類的濾水率，從而提高了攝食率，流速過(guò)高則會(huì)干擾貝類的攝食的生理活動(dòng)，導(dǎo)致不能正常攝食。

4 結(jié)語(yǔ)及建議

由于條件限制，試驗(yàn)只參照縊蟶工廠化育苗設(shè)置了4個(gè)流水速率，試驗(yàn)結(jié)果表明，流水給縊蟶育苗帶來(lái)顯著效果，關(guān)于育苗過(guò)程中具體的最適流水速率還有待進(jìn)一步試驗(yàn)探究。試驗(yàn)表明，適宜的流水可顯著提高縊蟶幼苗培育過(guò)程中幼蟲(chóng)的孵化率、變態(tài)率、存活率，但對(duì)于變態(tài)時(shí)間與變態(tài)后稚貝規(guī)格影響不顯著。

建議在縊蟶浮游期采用流水培養(yǎng)，盡量減少機(jī)械損傷并提供更好的生存環(huán)境，有效提高產(chǎn)量。建議在苗池底部鋪網(wǎng)，代謝物及其他有害物隨流水排出，若僅在出口處鋪網(wǎng)將會(huì)導(dǎo)致網(wǎng)孔堵塞，影響育苗水質(zhì)。目前水產(chǎn)業(yè)中循環(huán)水技術(shù)已大量應(yīng)用，陳文龍等[18]已對(duì)縊蟶的循環(huán)水育苗做了初步探究，考慮到貝類流水育苗用水量大，目前的循環(huán)水技術(shù)成本較高，但不失為一個(gè)良好的發(fā)展方向。

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BreedingofAgamakiClamSinonovaculaconstrictainFlowingWater

LI Lianxing, LI Hao,SHEN Heding，DU Wenjun

( Key Laboratory of Exploration and Utilization of Aquatic Genetic Resources, Ministry of Education, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China )

In order to explore influence of water condition and different water-change operations on initial breeding stage of Agamaki clamSinonovaculaconstricta, relevant tests were implemented in Sanmen Donghang aquaculture farms in September 2015. Mesh cloth and water inlet and outlet switch were set in test barrel X(Number:1,2,3*,4*,5*,6*) for flowing velocity control, and the comparative test barrels Y(Number:7,8) were not set with mesh cloth and pool water-change operation, at water temperature of 26—27.5 ℃, pH 8.0—8.2, salinity 13, and illuminance of less than 1000 lx. The results showed that for non-flowing breeding, increasing water-change amount and the setting of mesh cloth to reduce mechanical damage led to significant increase in survival rate of Agamaki clam larvae, and did not lead to significant effect on hatching and growth or metamorphosis. For flowing breeding, when water-change amount was gradually increased, fertility rate of Agamaki clam eggs was to some extent decreased hatching rate of fertilized ovum decreased after certain increase, significant difference in D-type larva size and juveniles. The clam had poor growth and low survival in the middle and late periods of test, compared with shell length and survival rate data in non-flow barrels. When the flowing rate was decreased, there was no significant difference in shell length, with significant increase in survival rate. The findings indicate that the proper amount of flow water breeding and no pool water-change operation can significantly improve the larva hatch, metamorphosis rate, survival rate, without significant effect on the time of metamorphosis and juvenile size.

Sinonovaculaconstricta; flowing water; breeding; shell length; survival rate

10.16378/j.cnki.1003-1111.2016.05.019

S968.318

A

1003-1111(2016)05-0568-05

2015-12-25；

2016-04-18.

國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(2012AA10A400-3)；水產(chǎn)動(dòng)物遺傳育種中心上海市協(xié)同創(chuàng)新中心資助項(xiàng)目(ZF1206).

李煉星(1991—)，男，碩士研究生；研究方向：貝類遺傳育種.E-mail:469687126@qq.com.通訊作者：沈和定(1964—)，男，教授；研究方向：貝類增養(yǎng)殖.E-mail:hdshen@shou.edu.cn.