賈秋紅+白海鋒+張星朗+問思恩+馮小麗+高志

摘 要：為了進(jìn)行河蟹生態(tài)健康養(yǎng)殖技術(shù)的示范推廣，研究了一種微生態(tài)制劑對(duì)河蟹養(yǎng)殖池塘水質(zhì)及河蟹成活率的影響。結(jié)果顯示，使用含濃縮復(fù)合芽孢桿菌的微生態(tài)制劑（主要成分為枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌）的試驗(yàn)池水質(zhì)優(yōu)于對(duì)照池。與對(duì)照池相比，水體透明度增加26.1%，溶解氧降低22.6%，pH下降5.5%，電導(dǎo)率下降26.0%，氨氮含量降低75.1%，亞硝酸鹽含量減少51.4%，河蟹養(yǎng)殖成活率提高了11.5%，河蟹養(yǎng)成規(guī)格提高25.0%。研究表明，濃縮復(fù)合芽孢桿菌微生態(tài)制劑對(duì)養(yǎng)蟹池塘的水質(zhì)具有一定的凈化效果，并可通過調(diào)節(jié)河蟹免疫系統(tǒng)減少病害發(fā)生，提高河蟹養(yǎng)殖成活率。

關(guān)鍵詞：河蟹；微生態(tài)制劑；水質(zhì)調(diào)節(jié)；成活率

河蟹學(xué)名中華絨螯蟹Eriocheir sinensis ，在分類學(xué)上屬節(jié)肢動(dòng)物門（Arthropoda）甲殼綱（Crustacea）十足目（Decapoda）方蟹科（Grapsidae）絨螯蟹屬Eriocheir[1]。河蟹肉味鮮美，營養(yǎng)價(jià)值高，是我國特有的珍貴水產(chǎn)養(yǎng)殖品種，同時(shí)也是出口創(chuàng)匯水產(chǎn)品之一。 河蟹的適應(yīng)性強(qiáng)，餌料來源廣，養(yǎng)殖技術(shù)較容易，生產(chǎn)投資少、見效快，養(yǎng)殖前景廣闊。但是隨著養(yǎng)殖規(guī)?；?、集約化程度的不斷提高，養(yǎng)殖環(huán)境不斷惡化，種質(zhì)資源逐漸退化，使得河蟹小型化和病害的發(fā)生率越來越大[2]。此外，近年來河蟹養(yǎng)殖生產(chǎn)中出現(xiàn)的水體富營養(yǎng)化以及大量抗生素、激素、防腐劑、喹乙醇、喹諾酮等化學(xué)藥物的濫用，不僅對(duì)河蟹的品質(zhì)造成了影響，而且還導(dǎo)致了嚴(yán)重的環(huán)境污染問題。

微生態(tài)制劑（Microecologics），是一種活菌制劑，通過改善動(dòng)物自身及其周圍的微生物群落來提高飼料利用率以及營養(yǎng)價(jià)值，具有增強(qiáng)動(dòng)物對(duì)疾病的應(yīng)答能力，提高其健康水平和保護(hù)環(huán)境的功能[3]。微生態(tài)制劑通常包括益生菌、益生元和合生素三種，其中芽孢桿菌是水產(chǎn)養(yǎng)殖中常用的益生菌種類。芽孢桿菌是一類好氣或兼性厭氧細(xì)菌革蘭氏陽性菌，目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)中，比較常用的有三種，分別是枯草芽孢桿菌Bacillus subtilis、地衣芽孢桿菌Bacillus licheniformis以及蠟樣芽孢桿菌Bacillus cereus [4]。近些年隨著人民大眾生活質(zhì)量的迅速提高，以及對(duì)生態(tài)環(huán)境保護(hù)意識(shí)的增強(qiáng)、對(duì)食品質(zhì)量安全的日益廣泛關(guān)注，人們?cè)絹碓街匾暿称返木G色化、飼料的綠色化、環(huán)境的綠色化以及生態(tài)文明的綠色化，這致使河蟹養(yǎng)殖必須走可持續(xù)發(fā)展的健康、生態(tài)之路。微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖上被公認(rèn)為是眾多抗生素類藥物最有潛力的替代品，主要是因其具有綠色環(huán)保、無殘留、無污染、無任何毒副作用，而且不產(chǎn)生抗性、無記憶性和作用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)[5]。為此，2016年筆者在陜西黃河灘地進(jìn)行了河蟹生態(tài)健康養(yǎng)殖試驗(yàn)，旨在為陜西地區(qū)河蟹生態(tài)健康養(yǎng)殖模式的示范與推廣提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 池塘條件

在陜西大荔黃河蟹養(yǎng)殖基選取4口較為相似的池塘進(jìn)行試驗(yàn)，其中2口塘為實(shí)驗(yàn)池，2口塘為對(duì)照池。池塘形狀均為長方形，東西走向，池底平坦，坡比1：2.6，池塘面積均為0.33 hm2，水深1.2～1.5 m，池底淤泥小于10 cm，防逃及排灌設(shè)備齊全，試驗(yàn)用水取自黃河水。

1.2 試驗(yàn)材料及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

試驗(yàn)幼蟹購于江蘇高淳，選擇體質(zhì)健壯、活動(dòng)敏捷、附肢齊全，規(guī)格整齊，大小為160～200只/kg，運(yùn)輸成活率大于95%。微生態(tài)制劑選擇使用超濃縮復(fù)合芽孢桿菌（Bacillaceae），復(fù)合芽孢桿菌主要成分為枯草芽孢桿菌、納豆芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、蠟樣芽孢桿菌等多種有益微生物活菌。活體有益菌總數(shù)≥1×1011個(gè)/g。試驗(yàn)池塘使用微生態(tài)制劑，水深1 m時(shí)微生態(tài)制劑用量為50～60 g/畝，每10～15 d沿池邊潑灑一次，同時(shí)飼料中添加量2～3 g/kg，對(duì)照池塘不使用微生態(tài)制劑。

1.3 池塘消毒、肥水

池塘冬季排干水后對(duì)池塘進(jìn)行清整，清除多余淤泥后曬塘凍土。蟹苗放養(yǎng)前7～10 d，采用生石灰消毒，用量2 400～3 000 kg/hm2。在生石灰藥效消失后，使用生物有機(jī)肥525～750 kg/hm2，促進(jìn)生物餌料生長繁衍。

1.4 種草移螺

2月底全池種植伊樂藻，面積控制在全池的25%左右，水位保持在30～40 cm。3月初移栽金魚藻和輪葉黑藻，種植面積控制在40%左右，水位保持在50～60 cm。至高溫季節(jié)，水草覆蓋率保持在80%左右。4月初，開始全池均勻投放活螺螄，投放7 500～9 000 kg/hm2。

1.5 苗種投放

3月上旬開始投放蟹種，放養(yǎng)密度為30 000～45 000只/hm2，分別混養(yǎng)青蝦蝦苗（1 000～2 000尾/kg）75～150 kg/hm2。蟹苗在放入池塘前要進(jìn)行消毒處理，用食鹽水（3%～4%）浸洗3～5 min。蟹苗投放時(shí)間選擇在晴天水溫較高時(shí)，進(jìn)行多點(diǎn)投放，讓蟹苗自行爬入水中。

1.6 日常管理

在養(yǎng)殖過程中，飼料的投喂以全價(jià)配合飼料為主，搭配一些動(dòng)物性餌料（例如新鮮的小魚小蝦和冰鮮的魚蝦等）和植物性飼料（例如浸泡的小麥、玉米、高粱、菜類等），堅(jiān)持兩頭精、中間粗的投喂原則，日投餌量控制在3%～5%。每天早、中、晚巡塘3次，及時(shí)掌握水位變動(dòng)和水質(zhì)變化情況，以及河蟹的晚上攝食和活動(dòng)情況，做好防逃、防盜以及防敵害工作，堅(jiān)持每日做巡塘記錄。視水溫定期加注新水，保持水體透明度在30～40 cm，高溫季節(jié)5 d加水 1次，保持水位在1.3～1.5 m。定期（15～20 d）對(duì)池塘進(jìn)行水質(zhì)調(diào)節(jié)和改良，具體方法是用150～225 kg/hm2的生石灰化漿全池潑灑，生石灰的使用不僅有利于疾病預(yù)防，更有利于水體中鈣離子的增加，能夠有效促進(jìn)河蟹的蛻殼 。

1.7 水環(huán)境指標(biāo)測定

試驗(yàn)期間， 每10～15 d對(duì)各個(gè)池塘的水溫（T）、水深（D）、透明度（SD）、溶解氧（DO）、pH值、電導(dǎo)率（EC）、氨氮（NH4+-N）、亞硝態(tài)氮（NO2--N）等水質(zhì)理化指標(biāo)進(jìn)行跟蹤測定，從4月1日至7月1日共測定6次，每次采樣監(jiān)測時(shí)間固定在上午8：00-9：00，每口池塘設(shè)置4個(gè)固定監(jiān)測點(diǎn)。

2 結(jié)果

2.1 水環(huán)境變化

經(jīng)過6次水質(zhì)理化指標(biāo)測定，對(duì)照池塘與試驗(yàn)池塘除水溫（變化范圍為12.0～21.5 ℃），和水深（變化范圍為0.5～1.4 m）無差異外，其他水環(huán)境參數(shù)變化差異見表1。試驗(yàn)池透明度相比對(duì)照池增加26.1%，溶解氧減低22.6%，pH下降5.5%，電導(dǎo)率下降26.0%，氨氮含量降低75.1%，亞硝酸鹽含量減少51.4%。

2.2 河蟹規(guī)格及成活率

從3月10日開始放苗，經(jīng)過4個(gè)月的對(duì)比試驗(yàn)，7月10日分塘?xí)r，統(tǒng)計(jì)出對(duì)照塘蟹苗養(yǎng)殖平均成活率為56.3%，平均規(guī)格為30.8 g/只，蟹苗生長參數(shù)：殼長平均為40.5 mm，殼寬平均為44.6 mm。試驗(yàn)池塘蟹苗養(yǎng)殖平均成活率為67.8%，相比對(duì)照池提高了11.5%，平均規(guī)格為38.5 g/只，相比對(duì)照池提高了25.0%，殼長平均為45.2 mm，殼寬平均為48.7 mm。

3 討論

3.1 微生態(tài)制劑與水質(zhì)調(diào)控

陜西大荔黃河灘地為陜西省最大的鹽堿地，其水體pH值相對(duì)較高，導(dǎo)致養(yǎng)殖池塘水體酸堿度波動(dòng)較大。本試驗(yàn)結(jié)果中微生態(tài)試驗(yàn)池的pH值低于對(duì)照池，而且變化幅度較小，這說明微生態(tài)制劑對(duì)降低和均衡水體pH值有顯著作用，這與白丹利等研究結(jié)果相一致[6]。濃縮復(fù)合芽孢桿菌是多種復(fù)合型有益活菌，由繁殖速度快、競爭能力強(qiáng)，凈水、脫氮效果好的多種功能的芽孢桿菌濃縮而成，是目前常用的一種水質(zhì)調(diào)節(jié)劑。由于芽孢桿菌屬于需氧型微生物，其在水中繁殖和分解有機(jī)化合物都需要消耗大量的溶解氧，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)池溶解氧低于對(duì)照池。但是從養(yǎng)殖過程來看，試驗(yàn)池的平均溶解氧在5.0 mg/L以上，對(duì)河蟹的生長無顯著影響。在河蟹養(yǎng)殖水體中，投餌、施肥以及河蟹自身的排泄物均會(huì)產(chǎn)生大量的氨氮，對(duì)河蟹產(chǎn)生毒害作用，其毒性不但與水溫有關(guān)，而且與水體pH的關(guān)系密切，當(dāng)其在水中濃度累積到一定程度，將會(huì)引起河蟹出現(xiàn)病狀，導(dǎo)致其死亡。氨氮的毒害作用不僅出現(xiàn)在河蟹養(yǎng)殖中，在養(yǎng)魚池中對(duì)養(yǎng)殖對(duì)象的毒害作用也已經(jīng)見到很多報(bào)道[7-8]。微生態(tài)制劑中的一些益生菌可直接利用池塘中的有機(jī)質(zhì)、氨氮和硫化氫等物質(zhì)進(jìn)行光合作用，并通過生物頡頏和生物絮凝作用，抑制浮游生物的生長，提高水體透明度。同時(shí)又能通過轉(zhuǎn)化鐵、汞等有毒物質(zhì)以及進(jìn)行硝化和反硝化作用改善水質(zhì)，營造和穩(wěn)定養(yǎng)殖池塘良性生態(tài)循環(huán)[5]。

3.2 微生態(tài)制劑與病害防控

目前，微生態(tài)制劑在動(dòng)物病害防治上表現(xiàn)出的生態(tài)效果已有很多研究，例如有學(xué)者在用微生態(tài)制劑提高魚蝦免疫力的研究顯示，復(fù)合芽孢桿菌中的一些非致病菌群，通過在魚蝦的腸道內(nèi)和體表定植和擴(kuò)繁，形成規(guī)模有益菌群落，通過促進(jìn)該部位有益菌的迅速生長繁殖，競爭性地抑制體內(nèi)和體表病原菌滋生，從而達(dá)到提高養(yǎng)殖動(dòng)物免疫力的效果[9]。本試驗(yàn)中，試驗(yàn)池塘河蟹發(fā)病率較低，其成活率高出對(duì)照池塘11.5%，分析認(rèn)為在水體中使用和在飼料中添加微生態(tài)制劑，其大部分在擴(kuò)繁進(jìn)程中分泌大量酶（包括淀粉酶、蛋白酶和脂肪酶等），這些酶針對(duì)性地迅速將池塘中殘留的飼料和河蟹排泄物中的淀粉、蛋白和脂肪等有機(jī)質(zhì)降解成水和二氧化碳，減少了水體負(fù)荷，從而凈化水質(zhì)。

有研究報(bào)道[10]，在蝦池中使用以芽孢桿菌為主的復(fù)合微生態(tài)制劑后，增加了沉積物好氧菌數(shù)量，從而抑制了有害弧菌類的繁殖和生長，減少了蝦的細(xì)菌性疾病發(fā)生率。此外，通過促進(jìn)底泥異養(yǎng)細(xì)菌的生長和繁殖，加速了池塘有機(jī)質(zhì)的降解進(jìn)程，維持并調(diào)節(jié)了系統(tǒng)的微生態(tài)平衡，有效促進(jìn)了蝦池水質(zhì)的自我凈化。此外，微生態(tài)制劑中的有益菌通過產(chǎn)生非特異性免疫調(diào)節(jié)因子等，剌激免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生免疫抗體，從而增強(qiáng)機(jī)體免疫功能，抑制病害發(fā)生[11]。

3.3 微生態(tài)制劑應(yīng)用前景

盡管我國微生態(tài)制劑應(yīng)用于水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)比較晚（20世紀(jì)90年代），而且自身存在諸如菌體穩(wěn)定性差、活性很難維持、與抗生素的使用存在矛盾、對(duì)突發(fā)病作用效果不顯著、難于示范推廣等缺點(diǎn)，但是微生態(tài)制劑在病害防治途徑上，與一些方法相比至今仍然是綠色、環(huán)保、安全的生物藥物。雖然目前在水產(chǎn)養(yǎng)殖生產(chǎn)上微生態(tài)制劑的使用還要考慮到水域生態(tài)安全以及自然生態(tài)平衡等眾多環(huán)境問題，但是近年來隨著水產(chǎn)微生態(tài)理論的發(fā)展以及分子生物學(xué)技術(shù)的迅速應(yīng)用，特異性新菌株的培育技術(shù)不斷獲得突破，同時(shí)微生物制劑的穩(wěn)定性得到大幅度提高，水產(chǎn)動(dòng)物微生態(tài)制劑將作為抗生素、化學(xué)促生素等的替代物而成為飼料工業(yè)和養(yǎng)殖業(yè)中最具潛力的添加劑之一[12]。微生態(tài)制劑的推廣應(yīng)用目前是世界性的生態(tài)安全需求，通過廣泛使用可有效提高動(dòng)物產(chǎn)品的無公害化，實(shí)現(xiàn)環(huán)境友好、生態(tài)平衡的目標(biāo)，對(duì)我國水產(chǎn)養(yǎng)殖的生態(tài)健康可持續(xù)發(fā)展具有重大意義。

參考文獻(xiàn)：

[1] 王克行. 蝦蟹類增養(yǎng)殖學(xué)[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1997

[2] 王武，李應(yīng)森.河蟹生態(tài)養(yǎng)殖[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，2010

[3] Laurent Verschere，Geert Rombaut， Patrick Sorgeloos， et al. Probiotic Bacteria as Biological Control Agents in Aquaculture [J]. Microbiol. Mol. Biol. Rev. Dec 2000，64：655-671

[4] 付天璽，魏開建，許國煥.芽孢桿菌在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的研究和應(yīng)用概況[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2007，27（3）：102-104

[5] 王亞敏，王印庚.微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的作用機(jī)理及應(yīng)用研究進(jìn)展[J].動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2008，29（6）：72-75.

[6] 白丹利，王海.復(fù)合芽孢桿菌對(duì)養(yǎng)魚池塘水質(zhì)因子影響的試驗(yàn)研究[J].漁業(yè)現(xiàn)代化，2015，42（3）：8-11

[7] 黃秀梨.微生物學(xué)（2版）[M].北京：高等教育出版社，2003

[8] 秋天寶，金紅星，王剛等.三種水質(zhì)改良劑對(duì)水中三態(tài)氮降解效果初步測試[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2007 （4）：16-18

[9] Thimmalapura N D， Fatimah M Y， Mohamed S. Changes in bacterial populations and shrimp production in ponds treated with commercial microbial products[J].Aquaculture，2002，206：245-256

[10] 李卓佳，郭志勛，馮娟，等.應(yīng)用芽孢桿菌調(diào)控蝦池微生態(tài)的初步研究[J].海洋科學(xué)，2006，30（11）：28-31

[11] 陳永青，林亮，楊鶯鶯，等.微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用[J].生態(tài)科學(xué)，2005，24（1）：80-83

[12] 許金花，肖克宇.微生態(tài)制劑在水產(chǎn)養(yǎng)殖中的應(yīng)用及前景[J].河北漁業(yè)，2006，（2）：1-4

（收稿日期：2016-08-24）