吳先輝

.實驗研究.

不同直徑樟樹莖枝與樟樹根提取物抗炎及鎮(zhèn)痛作用對比分析

吳先輝

目的探討比較不同直徑樟樹莖枝與樟樹根提取物的抗炎及鎮(zhèn)痛作用.方法選取昆明(KM)小鼠進行觀察研究, 分別通過小鼠毛細血管通透性抗炎實驗、小鼠熱板鎮(zhèn)痛實驗、小鼠醋酸扭體實驗觀察不同直徑樟樹莖枝與樟樹根提取物的對小鼠的抗炎作用和鎮(zhèn)痛作用, 并進行對比分析.結(jié)果實驗后, 樟樹根組小鼠光密度(OD)值為(0.090±0.034)、樟樹莖枝Ⅱ組為(0.102±0.029)、樟樹莖枝Ⅲ組為(0.088±0.026)、復方乙酰水楊酸片組為(0.089±0.033), 均明顯低于對照組的(0.143±0.042),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);樟樹莖枝Ⅰ組小鼠OD值為(0.132±0.028), 低于對照組的(0.143±0.042),但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05).樟樹根組、樟樹莖枝Ⅰ組、樟樹莖枝Ⅱ組、樟樹莖枝Ⅲ組、復方乙酰水楊酸片組小鼠的扭體次數(shù)明顯少于對照組, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05).結(jié)論同等劑量的樟樹莖枝與樟樹根提取物在抗炎、鎮(zhèn)痛等方面的作用有較大相似性, 且直徑越大的樟樹莖枝抗炎、鎮(zhèn)痛作用效果可能還強于樟樹根.

樟樹莖枝提取物;樟樹根提取物;直徑;抗炎;鎮(zhèn)痛

樟樹為樟科常綠大喬木, 別名木樟、烏樟等, 是我國珍貴用材和經(jīng)濟樹種[1].腸炎寧糖漿是目前臨床治療大腸濕熱的主要藥物, 而樟樹樹根作為其主要成分, 為避免樟樹樹根資源匱乏導致腸炎寧糖漿治療藥效發(fā)生變化, 本研究通過對比分析樟樹根與樟樹莖枝在抗炎、止瀉、鎮(zhèn)痛等方面的藥效,旨在為樟樹莖枝代替樟樹根作為腸炎寧糖漿的主要成分的開發(fā)研究提供參考依據(jù), 具體報告如下.

1 材料與方法

1.1 實驗動物 選取小鼠均由常州卡文斯實驗動物有限公司提供, 型號為KM小鼠, 品牌為CAVENS, 大小均在18～22 g,雌雄兼用.

1.2 藥物 樟樹根及直徑1～2 cm、2～3 cm、>3 cm的樟樹莖枝提取物(西安天瑞生物技術(shù)有限公司);復方乙酰水楊酸片(山西天源制藥有限公司, 國藥準字H4024066);羅通定片(赤峰蒙欣藥業(yè)有限公司, 國藥準字H15020512).臨用前復方乙酰水楊酸片、羅通定片均用蒸餾水分別制成濃度為10 mg/ml、1.7 mg/ml的溶液.

1.3 試劑 醋酸(湖南爾康制藥股份有限公司, 國藥準字H43020194);伊文思藍(品牌:Spectrum, 上海恒遠生物科技有限公司).

1.4 儀器 紫外分光光度儀(廣州科曉科學儀器有限公司,型號:UV-6100).

1.5 方法

1.5 . 1 小鼠毛細血管通透性抗炎實驗 選取72只健康KM小鼠, 將其按隨機數(shù)字表法分為對照組、樟樹根組、樟樹莖枝Ⅰ組(直徑1～2 cm)、樟樹莖枝Ⅱ組(直徑2～3 cm)、樟樹莖枝Ⅲ組(直徑>3 cm)、復方乙酰水楊酸片組, 每組12只.前5組(除對照組)小鼠給藥劑量為3.96 g生藥/kg, 復方乙酰水楊酸片組給藥劑量為0.2 g/kg.所選小鼠均連續(xù)灌胃給藥4 d, 給藥容量為0.2 ml/10 g, 末次給藥前所選小鼠均需禁食不禁水16 h, 給藥1 h后, 所選小鼠均于尾部靜脈注射0.5%伊文思藍生理鹽水溶液0.1 ml/10 g, 同時腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml, 于20 min后均脫頸椎處死所選小鼠, 打開小鼠腹腔,用5 ml 0.9%NaCl溶液分2次洗滌腹腔, 將洗滌液吸出, 以3 000 r/min離心速度離心15 min, 離心后取上清液于試管內(nèi),將其置入分光光度計590 nm處測定OD值.

1.5 . 2 小鼠醋酸鎮(zhèn)痛實驗 取72只健康KM小鼠, 將其按隨機數(shù)字表法分為對照組、樟樹根組、樟樹莖枝Ⅰ組、樟樹莖枝Ⅱ組、樟樹莖枝Ⅲ組、復方乙酰水楊酸片組, 每組12只.前5組(除對照組)小鼠給藥劑量為3.96 g生藥/kg, 復方乙酰水楊酸片組給藥劑量為0.2 g/kg.所選小鼠均連續(xù)灌胃給藥4 d, 給藥容量為0.2 ml/10 g, 末次給藥前所選小鼠均需禁食不禁水16 h, 給藥1 h后, 所選小鼠均腹腔注射0.6%醋酸0.2 ml, 觀察20 min內(nèi)小鼠扭體次數(shù).

1.5 . 3 小鼠熱辦法鎮(zhèn)痛實驗 首先篩選合格小鼠, 具體措施如下:每次將1只小鼠放在熱板上, 若小鼠出現(xiàn)疼痛反應舔后足時間<9 s或>24 s或跳躍者視為不合格者, 將選取合格小鼠按隨機數(shù)字表法分為對照組、樟樹根組、樟樹莖枝Ⅰ組、樟樹莖枝Ⅱ組、樟樹莖枝Ⅲ組、羅通定片組, 前5組(除對照組)小鼠給藥劑量為3.96 g生藥/kg, 羅通定片組給藥劑量為54 mg/kg.所選小鼠給藥前均測定其正常痛閾值作為給藥前痛閾值, 連續(xù)灌胃給藥3 d, 給藥容量0.2 ml /10 g, 末次給藥前所選小鼠均需禁食不禁水12 h, 分別測量給藥后0.5、1.0、1.5 h時的痛閾值.如60 s仍無反應, 將小鼠取出, 其痛閾值以60 s計算.

1.6 統(tǒng)計學方法 采用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件對研究數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析.計量資料以均數(shù) ± 標準差表示, 采用t檢驗.P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學意義.

2 結(jié)果

2.1 小鼠毛細血管通透性抗炎實驗結(jié)果比較 實驗后, 樟樹根組小鼠OD值為(0.090±0.034)、樟樹莖枝Ⅱ組為(0.102±0.029)、樟樹莖枝Ⅲ組為(0.088±0.026)、復方乙酰水楊酸片組為(0.089±0.033), 均明顯低于對照組的(0.143±0.042),差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);樟樹莖枝Ⅰ組小鼠OD值為(0.132±0.028), 低于對照組的(0.143±0.042), 但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05).

2.2 小鼠醋酸鎮(zhèn)痛實驗結(jié)果比較 實驗后, 樟樹根組小鼠扭體次數(shù)為(5.54±4.21)次、樟樹莖枝Ⅰ組為(9.64±6.34)次、樟樹莖枝Ⅱ組為(6.77±5.26)次、樟樹莖枝Ⅲ組為(6.48±5.06)次、復方乙酰水楊酸片組為(6.48±5.06)次, 均明少于對照組的(17.96±10.53)次, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05).

3 討論

腸炎寧糖漿是純中藥制劑, 其中樟樹根是腸炎寧糖漿中的主要成分之一, 為樟樹科植物紅葉木姜子的根, 有著祛風散寒、理氣活氣、止痛止癢、強心鎮(zhèn)痙等功效, 主治風濕骨痛、跌打損傷、感冒頭痛等[2].紅葉木姜子屬多年生落葉喬木,其生長年限較長, 生長速度緩慢.而樟樹分布廣泛, 樟樹莖枝藥用資源豐富, 隨著近年來對其研究的深入, 其藥用價值日益被人們所重視.據(jù)相關(guān)報道稱, 樟樹根與樟樹莖枝均具有祛風、行氣血、除風濕、得關(guān)節(jié)的功效, 臨床主要用于治療心腹脹痛、痛風、跌打損傷、霍亂嘔吐等, 同時樟樹樹根與楓樹葉合劑治療痢疾腸炎有較好療效[3].

本次研究結(jié)果顯示, 樟樹根組小鼠光密度(OD)值為(0.090±0.034)、樟樹莖枝Ⅱ組為(0.102±0.029)、樟樹莖枝Ⅲ組為(0.088±0.026)、復方乙酰水楊酸片組為(0.089±0.033),均明顯低于對照組的(0.143±0.042), 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05);樟樹莖枝Ⅰ組小鼠OD值為(0.132±0.028), 低于對照組的(0.143±0.042), 但差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05).說明樟樹莖枝與樟樹根均能明顯降低伊文思藍的滲出量.樟樹根組、樟樹莖枝Ⅰ組、樟樹莖枝Ⅱ組、樟樹莖枝Ⅲ組、復方乙酰水楊酸片組小鼠的扭體次數(shù)明顯少于對照組, 差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05).說明樟樹莖枝與樟樹根均有一定的外周鎮(zhèn)痛作用.提示樟樹根和直徑為2～3 cm和>3 cm的樟樹莖枝均能減少炎癥滲出量, 達到抗炎效果, 同時發(fā)現(xiàn)不同直徑的樟樹莖枝與樟樹根均能減少醋酸疼痛引起的小鼠扭體次數(shù), 有較好的外周性鎮(zhèn)痛作用.

綜上所述, 同等劑量的樟樹莖枝與樟樹根在抗炎、鎮(zhèn)痛等方面的作用有較大相似性, 而且直徑越大的樟樹莖枝抗炎、鎮(zhèn)痛作用效果可能還強于樟樹根, 但在其他藥理作用方面的研究還需進一步探討.

[1] 龔琴, 陳蘭英, 羅穎穎, 等. 不同直徑的樟樹莖枝和樟樹根提取物主要藥效學比較研究. 江西中醫(yī)藥, 2012, 43(6):55-57.

[2] 彭穎, 歐陽婷, 顏紅, 等. 樟樹揮發(fā)油的提取及包合物制備與鑒定研究. 中國中醫(yī)藥信息雜志, 2014, 26(6):86-88.

[3] 周富強, 田素英, 潘建龍, 等. 樟樹莖與沉香醇提物藥理作用對比研究. 中醫(yī)學報, 2013, 28(12):1849-1850.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2017.22.116

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2017-10-11]