寵物診療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室的建立及管理

秦楨富，李茂寧，謝麗華

（1.陽朔縣動物疫病預(yù)防控制中心 廣西桂林 541999；2.桂林市動物疫病預(yù)防控制中心 廣西桂林市 541000;3.梧州市動物疫病預(yù)防控制中心 廣西梧州市 543002）

寵物診療機(jī)構(gòu)（Pet medical institutions）是從事寵物疾病的預(yù)防、診斷、治療和動物絕育手術(shù)等經(jīng)營性活動的單位。獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室（veterinary laboratory）是寵物診療機(jī)構(gòu)重要組成部門，主要承擔(dān)寵物疾病的化驗(yàn)、檢測、監(jiān)測職能，為寵物疾病綜合診斷提供技術(shù)支撐。實(shí)驗(yàn)室提供的數(shù)據(jù)和結(jié)果直接影響執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師對寵物疾病的綜合判定和臨床治療。本文從法律法規(guī)、功能布局、設(shè)備儀器、檢驗(yàn)項目、質(zhì)量控制、日常管理、生物安全等方面論述寵物診療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室的建立及管理，為診療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)人員和管理人員提供參考。

1 法律法規(guī)

從事動物診療及實(shí)驗(yàn)活動應(yīng)遵守的法律法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)有《中華人民共和國動物防疫法》《動物診療機(jī)構(gòu)管理辦法》《執(zhí)業(yè)獸醫(yī)管理辦法》《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理條例》《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》（GB 19489—2008）、《獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求通則》（NY/T 1948—2010）和《動物病原微生物實(shí)驗(yàn)活動生物安全要求細(xì)則》等?！秳游锓酪叻ā返谖迨畻l規(guī)定，從事動物診療活動的機(jī)構(gòu)應(yīng)當(dāng)具備下列條件：有與動物診療活動相適應(yīng)并符合動物防疫條件的場所；有與動物診療活動相適應(yīng)的執(zhí)業(yè)獸醫(yī)；有與動物診療活動相適應(yīng)的獸醫(yī)器械和設(shè)備；有完善的管理制度。《動物診療機(jī)構(gòu)管理辦法》第四條規(guī)定：國家實(shí)行動物診療許可制度。從事動物診療活動的機(jī)構(gòu)，應(yīng)當(dāng)取得動物診療許可證，并在規(guī)定的診療活動范圍內(nèi)開展動物診療活動?！秷?zhí)業(yè)獸醫(yī)管理辦法》第二十二條規(guī)定：執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師可以從事動物疾病的預(yù)防、診斷、治療和開具處方、填寫診斷書、出具有關(guān)證明文件等活動；第二十三條規(guī)定：執(zhí)業(yè)助理獸醫(yī)師在執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師指導(dǎo)下協(xié)助開展獸醫(yī)執(zhí)業(yè)活動，但不得開具處方、填寫診斷書、出具有關(guān)證明文件?！恫≡⑸飳?shí)驗(yàn)室生物安全管理條例》第十八條規(guī)定 國家根據(jù)實(shí)驗(yàn)室對病原微生物的生物安全防護(hù)水平，并依照實(shí)驗(yàn)室生物安全國家標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定，將實(shí)驗(yàn)室分為一級、二級、三級、四級；第二十條規(guī)定：三級、四級實(shí)驗(yàn)室應(yīng)當(dāng)通過實(shí)驗(yàn)室國家認(rèn)可；第二十一條規(guī)定：一級、二級實(shí)驗(yàn)室不得從事高致病性病原微生物實(shí)驗(yàn)活動。《實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》規(guī)定了生物安全一級、二級、三級、四級實(shí)驗(yàn)室設(shè)施和設(shè)備要求?！东F醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全要求通則》規(guī)定了獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全體系建立和運(yùn)行的基本要求、應(yīng)急處置預(yù)案編制原則、安全保衛(wèi)、生物安全報告、持續(xù)改進(jìn)的基本要求?！秳游锊≡⑸飳?shí)驗(yàn)活動生物安全要求細(xì)則》規(guī)定了根據(jù)動物病原微生物危害程度分類開展不同的實(shí)驗(yàn)活動（病原分離培養(yǎng)、動物感染實(shí)驗(yàn)、未經(jīng)培養(yǎng)的感染性材料實(shí)驗(yàn)、滅活材料實(shí)驗(yàn)）所對應(yīng)的實(shí)驗(yàn)室生物安全級別。

2 功能布局

寵物診療機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室應(yīng)處于一個相對獨(dú)立（建有屏障或緩沖區(qū)）或封閉的區(qū)域，實(shí)驗(yàn)室面積、功能分區(qū)可根據(jù)檢驗(yàn)需要進(jìn)行配置，一般可選擇性規(guī)劃為業(yè)務(wù)受理室、普通化驗(yàn)室（血常規(guī)、血液生化、血?dú)夥治觥⒛蛞悍治觯?、X光室、B超室、組織學(xué)診斷室、病原學(xué)檢驗(yàn)室（顯微鏡檢查、真菌、寄生蟲檢驗(yàn)）、血清學(xué)檢測室（免疫抗體監(jiān)測）、分子生物學(xué)檢測室（基因診斷）、洗滌消毒室等。實(shí)驗(yàn)室要有良好的內(nèi)部環(huán)境和設(shè)施，墻面和地面應(yīng)平整、防滑，易清潔、不滲水，實(shí)驗(yàn)臺面要耐化學(xué)藥品和消毒藥的腐蝕，門窗能密閉，配備應(yīng)急照明設(shè)備、防火設(shè)備，重要實(shí)驗(yàn)區(qū)加裝洗眼器，配備空調(diào)。

3 設(shè)備儀器

一般實(shí)驗(yàn)室可配備顯微鏡、全自動血常規(guī)分析儀、全自動血液生化分析儀、血?dú)夥治鰞x、尿液分析儀、離心機(jī)、高壓滅菌器、冰箱，大型動物醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室可另外配置X光機(jī)、B超、組織切片機(jī)、酶標(biāo)儀、生物安全柜、生化培養(yǎng)箱、微量移液器、PCR基因擴(kuò)增儀、電泳儀、紫外凝膠成像系統(tǒng)等。

4 檢驗(yàn)項目

根據(jù)儀器配備和人員技術(shù)水平提供的相應(yīng)的檢測服務(wù)項目，一般有：

1）顯微鏡涂片檢查：血液檢查如白細(xì)胞種類和計數(shù)、紅細(xì)胞大小和形態(tài)、血小板狀況及微絲蚴、血巴爾通體、巴貝斯蟲、弓形蟲等血液寄生蟲；皮膚病檢查如犬小孢子菌、石膏樣小孢子菌、毛癬菌、馬拉色菌等真菌及疥螨、耳螨、癢螨等體外寄生蟲；糞便檢查如鉤蟲、蛔蟲、絳蟲、球蟲、滴蟲、賈第蟲等腸道寄生蟲蟲卵、成蟲和腸道脫落細(xì)胞、脂肪、淀粉等消化功能及細(xì)菌菌群種類和數(shù)量評估；尿液檢查如尿沉渣中紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、結(jié)晶物、腎小管上皮及細(xì)菌真菌等；脫落細(xì)胞檢查如腹腔滲出物中的腫瘤細(xì)胞、紅細(xì)胞、白細(xì)胞及陰道分泌物或唾液中的細(xì)胞種類形態(tài)監(jiān)測。

2）血液常規(guī)檢查：采用血液分析儀對紅細(xì)胞（RBC）、血細(xì)胞比容（HCT）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞指數(shù)（MCV、MCH）、白細(xì)胞總數(shù)（WBC）、中性粒細(xì)胞（NEU）、淋巴細(xì)胞（LYM）、單核細(xì)胞（MONO）、嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）、嗜堿性粒細(xì)胞（BASO）、核左移、核右移、血小板（PLT）檢查。

3）血液生化分析：肝膽功能（膽紅素、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶ALT、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶AST、堿性磷酸酶ALP）、腎功能（尿素氮BUN、肌酐CREA、尿酸UA）、胰腺功能（淀粉酶AMYL、脂肪酶LPS）、系統(tǒng)性功能（血糖、血脂、膽固醇）、離子（鈉、鉀、氯、鈣、磷、鐵等）。

4）血?dú)夥治龊退釅A平衡檢驗(yàn)：血液pH、動脈血氧分壓、血氧飽和度、血二氧化碳分壓、碳酸氫根、代謝性酸中毒、代謝性堿中毒、呼吸性酸中毒、呼吸性堿中毒等。

5）尿液生化檢驗(yàn)：血尿、尿pH、尿蛋白、尿酮體等。

6）X光：用于骨折、臟器病變檢驗(yàn)。

7）B超：用于妊娠，膀胱、尿道、腎臟、膽等結(jié)石，腎水腫、子宮蓄膿、卵巢卵泡、前列腺炎、腹部積液、腫瘤檢查。

8）組織學(xué)診斷：用于病理變化、腫瘤類型和良性惡性鑒別。

9）病原學(xué)檢驗(yàn)：細(xì)菌、真菌的分離培養(yǎng)及藥敏試驗(yàn)。

10）血清學(xué)檢驗(yàn)：用于狂犬病、犬瘟、細(xì)小病毒等免疫水平和非免疫狀況監(jiān)測。

11）快速試紙條：用于病毒性傳染病和血液性寄生蟲的快速篩查和初步檢測。

12）基因診斷：按照國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)、農(nóng)業(yè)部規(guī)定或自身實(shí)驗(yàn)室建立且經(jīng)比對驗(yàn)證的方法用于各種病毒、細(xì)菌、真菌、寄生蟲疾病的確診。

5 質(zhì)量控制

實(shí)驗(yàn)室檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性直接影響動物診療的方向和效果，因此，必須進(jìn)行檢驗(yàn)檢測質(zhì)量的控制。

5.1 人員控制

檢驗(yàn)人員應(yīng)為注冊的執(zhí)業(yè)獸醫(yī)師，并取得獸醫(yī)化驗(yàn)員資格證。

5.2 儀器設(shè)備控制

定期檢查儀器運(yùn)行狀態(tài)，對主要儀器應(yīng)進(jìn)行計量鑒定。

5.3 試劑、標(biāo)準(zhǔn)物控制

對購買的試劑要妥善保存，定期用標(biāo)準(zhǔn)物測定糾正。

5.4 樣品控制

嚴(yán)格按照規(guī)范取樣，確保樣品質(zhì)量并具代表性。

5.5 環(huán)境控制

實(shí)驗(yàn)室能通風(fēng)換氣，應(yīng)配有空調(diào)、抽濕機(jī)以調(diào)節(jié)室溫、濕度。

5.6 檢驗(yàn)方法控制

定期查新標(biāo)準(zhǔn)，淘汰廢舊方法，按照國家標(biāo)準(zhǔn)、行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和農(nóng)業(yè)部規(guī)定的最新方法進(jìn)行確診。

5.7 檢驗(yàn)操作過程控制

對病原學(xué)、血清學(xué)檢測，應(yīng)設(shè)立陰陽性對照，嚴(yán)格按標(biāo)準(zhǔn)要求和說明書操作。

5.8 內(nèi)部、外部控制

應(yīng)定期組織內(nèi)部檢驗(yàn)人員進(jìn)行技術(shù)培訓(xùn)，必要時與外部權(quán)威實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行盲樣比對。

6 日常管理

為保證實(shí)驗(yàn)室穩(wěn)定運(yùn)行，應(yīng)對實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行日常管理和維護(hù)。

1）建立實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量管理體系并嚴(yán)格執(zhí)行，建立各項管理制度，制定停電停水防火等特殊情況的應(yīng)急措施。

2）重要儀器設(shè)備專人管理，制定儀器操作規(guī)程，建立儀器使用記錄，定期開展儀器維護(hù)、檢修、降級、淘汰。

3）高溫高速和精密儀器設(shè)有警示標(biāo)識。

4）危險品、劇毒品專人管理并有監(jiān)督措施。

5）原始記錄和檢驗(yàn)報告應(yīng)建檔存檔。

6）檢驗(yàn)結(jié)果實(shí)行保密性管理。

7 生物安全

大型寵物診療機(jī)構(gòu)應(yīng)成立實(shí)驗(yàn)室生物安全委員會，制定生物安全管理體系文件。實(shí)驗(yàn)室入口處明顯位置應(yīng)標(biāo)有危害級別的生物安全標(biāo)志，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部使用標(biāo)準(zhǔn)的警告標(biāo)志、禁止標(biāo)志、指令標(biāo)志和提示標(biāo)志。必要時組織有經(jīng)驗(yàn)的專業(yè)人員開展風(fēng)險評估。按照不同操作級別選擇適當(dāng)?shù)膫€人防護(hù)裝備，如工作服、手套、口罩、鞋套、防護(hù)服、防護(hù)帽、防護(hù)眼鏡。生物安全一級實(shí)驗(yàn)室的門應(yīng)有可視窗，設(shè)洗手池。在實(shí)驗(yàn)室門口處應(yīng)設(shè)存衣裝置，將個人服裝和實(shí)驗(yàn)室工作服分開放置。若有可開閉的門窗，應(yīng)配有紗窗以防鼠防蟲。根據(jù)工作性質(zhì)和流程合理擺放實(shí)驗(yàn)室設(shè)備、臺柜、物品等，避免相互干擾和交叉污染。應(yīng)配備照明裝置、消防和急救應(yīng)急器材。生物安全二級實(shí)驗(yàn)室主入口的門應(yīng)可自動關(guān)閉并有進(jìn)入控制措施，應(yīng)配備洗眼裝置、生物安全柜。與病原微生物有關(guān)的實(shí)驗(yàn)廢棄物要進(jìn)行高壓滅菌，必要時與有資質(zhì)醫(yī)療廢棄物處理單位簽訂收集處理協(xié)議，委托處理。■