王苗利 ，陳靜 **， 肉先姑庫(kù)爾班 ，曹振山 ，王士榮 ，李玉杰 ，劉麗平 ，劉娜

（1.山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，山東 濟(jì)南 250022；2.新疆喀什麥蓋提縣畜牧獸醫(yī)站，新疆 麥蓋提 844600）

一例肉鴨細(xì)菌病混合感染的診斷與治療*

王苗利1，陳靜1**， 肉先姑庫(kù)爾班2，曹振山1，王士榮1，李玉杰1，劉麗平1，劉娜1

（1.山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心，山東 濟(jì)南 250022；2.新疆喀什麥蓋提縣畜牧獸醫(yī)站，新疆 麥蓋提 844600）

齲齒羅氏菌（Rothia dentocariosa）為需氧或微需氧、不形成芽孢、無(wú)動(dòng)力、多形態(tài)的革蘭氏陽(yáng)性菌，是人類口咽部的共生菌群，也是引起齲齒和牙周病的病原菌。通常認(rèn)為，齲齒羅氏菌對(duì)人類具有低毒力，但現(xiàn)在已公認(rèn)為成年人的機(jī)會(huì)致病菌，常與感染性心內(nèi)膜炎有關(guān)[1]，也可引起其他多種感染，如腹腔內(nèi)感染、肺炎、腦膿腫、瓣膜周?chē)撃[、眼內(nèi)炎以及細(xì)菌性動(dòng)脈瘤等[2]。有人報(bào)道可以從貓抓病腫大淋巴結(jié)分離出齲齒羅氏菌[3]。未見(jiàn)有鴨感染該菌的報(bào)道。

緩慢葡萄球菌（Staphylococcus lentus）屬于葡萄球菌屬。該菌被Kloos等于1976年命名為松鼠葡萄 球 菌 緩 慢 亞 種 （Staphylococcussciurisubsp.lentus）[4]，并由 Schleifer K H 等[5]在 1983 年將其劃分為葡萄球菌屬的一個(gè)獨(dú)立的種，即緩慢葡萄球菌（S.lentus）。緩慢葡萄球菌屬于凝固酶陰性葡萄球菌（Coagulase-negative staphylococci,CNS）[4]。CNS 曾被認(rèn)為不具有致病性，但越來(lái)越多的資料表明CNS是人類或許多動(dòng)物不可忽視的致病菌[6-10]。

施氏假單胞菌（Pseudomonas stutzeri）屬于假單胞菌科假單胞菌屬，假單胞菌廣泛分布于土壤、淡水、海水以及生物體中。革蘭氏陰性菌，細(xì)胞單個(gè)，多為直的或彎的桿菌，大小為 （0.5～1）um×（1.4～4）um，單鞭毛或多鞭毛，不產(chǎn)生鞘或突起物。生長(zhǎng)溫度范圍較廣，可在4～43℃生長(zhǎng)，大多數(shù)菌的最適溫度在30℃左右。生長(zhǎng)的pH范圍在pH7.0～8.5，大多數(shù)不能在pH6或6以下生長(zhǎng)[11]。革蘭氏大腸桿菌病是養(yǎng)鴨場(chǎng)最常見(jiàn)的細(xì)菌病之一。大腸桿菌既可以水平傳播，也可以垂直傳播，主要引起鴨的卵黃吸收不全、心包炎、氣囊炎、肝周炎[12]，本菌由于很容易產(chǎn)生耐藥性，實(shí)際生產(chǎn)中感染途徑及感染原因不一，臨床治療越來(lái)越復(fù)雜。

近年來(lái)，禽病感染發(fā)病原因越來(lái)越復(fù)雜，混合感染越來(lái)越常見(jiàn)，再加上抗生素的濫用，細(xì)菌的耐藥性越來(lái)越強(qiáng)，給臨床診斷帶來(lái)了很大的困難。因此，根據(jù)實(shí)驗(yàn)室診斷以及科學(xué)的藥敏分析，合理的指導(dǎo)用藥治療，成為今后發(fā)展的趨勢(shì)，相信如果廣大養(yǎng)殖用戶都能科學(xué)、合理地用藥，一定會(huì)改善抗生素濫用、細(xì)菌耐藥性增強(qiáng)的現(xiàn)象，減少抗生素給禽以及人類帶來(lái)的危害，更好地應(yīng)對(duì)禽場(chǎng)的疫病防控。

1 發(fā)病情況

2017年4月，濟(jì)寧市梁山縣某鴨場(chǎng)出現(xiàn)鴨拉稀、癱瘓進(jìn)而死亡的情況。經(jīng)過(guò)詢問(wèn)調(diào)查，該場(chǎng)存欄量8000只左右，送檢當(dāng)日鴨日齡為30日齡，24日齡前鴨群正常，24日齡左右的鴨部分表現(xiàn)出拉稀現(xiàn)象，大約有5%的鴨表現(xiàn)出癱瘓。發(fā)病的鴨伴有輕微呼吸道癥狀，采食量略微下降，發(fā)病3d后死亡數(shù)量增加，8d內(nèi)死亡700只左右鴨。免疫情況：1日齡免疫大華農(nóng)生產(chǎn)的H5N2亞型滅活苗。用藥治療情況：24日齡使用環(huán)丙沙星、黃芪多糖飲水用3d，28日齡使用氟苯尼考飲水用4d，治療效果不明顯。

解剖病變情況，肝臟輕微腫大，心包內(nèi)有少量液體，肺臟水腫，小腸出現(xiàn)卡他性腸炎，氣管環(huán)出血，脾臟有壞死。實(shí)驗(yàn)室對(duì)送檢的3只鴨進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)，檢測(cè)項(xiàng)目為新城疫病原、禽流感病原、傳染性支氣管炎病原、細(xì)菌分離、生化鑒定及藥敏分析，并根據(jù)檢驗(yàn)結(jié)果指導(dǎo)用藥，得到了良好的效果。

2 試驗(yàn)材料與方法

2.1 試驗(yàn)材料移液器、熒光定量PCR儀、核酸提取儀、奧林巴斯顯微鏡，梅里埃生化及藥敏儀VITECII compact60、流感通用型熒光PCR檢測(cè)試劑盒、新城疫熒光PCR檢測(cè)試劑盒、傳染性支氣管炎熒光PCR檢測(cè)試劑盒、顯色培養(yǎng)基，營(yíng)養(yǎng)瓊脂，革蘭氏染色液。

2.2 試驗(yàn)方法

2.2.1 病毒檢測(cè) 選取送檢病料的肝臟、淋巴結(jié)、脾臟、氣管等部位組織樣品，經(jīng)過(guò)研磨處理后使用核酸提取儀提取病毒核酸，并根據(jù)檢測(cè)試劑盒的操作步驟進(jìn)行操作，通過(guò)熒光定量PCR儀進(jìn)行PCR擴(kuò)增，并讀取結(jié)果。

2.2.2 細(xì)菌鑒定及藥敏分析 選取送檢病料的肝臟、肺臟在顯色平板上進(jìn)行接種，挑取顯色平板上培養(yǎng)出的細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色，100倍油鏡觀察細(xì)菌形態(tài)。結(jié)合鏡檢結(jié)果及培養(yǎng)基培養(yǎng)出的細(xì)菌顏色、形態(tài)的不同，挑取單菌落，三線劃線法純化到營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上，將營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板倒置放于溫箱中，37°C培養(yǎng) 18～24h。根據(jù)染色鏡檢結(jié)果，選擇合適的鑒定、藥敏卡片；無(wú)菌操作，分別挑取純化的單菌落制備菌懸液，濃度控制在0.5～0.63Mc濃度，備裝鑒定卡片；將鑒定卡片和藥敏卡片分別插入制備好的菌懸液中，做好標(biāo)記，裝載上機(jī)，5～18h后讀取結(jié)果。

3 結(jié)果與分析

3.1 病毒檢測(cè)結(jié)果 通過(guò)病毒檢測(cè)，新城疫病原、禽流感病原、傳染性支氣管炎病原檢測(cè)結(jié)果為陰性。

3.2 細(xì)菌鑒定及藥敏結(jié)果 經(jīng)過(guò)溫箱37°C培養(yǎng)18～24h后，根據(jù)菌落外觀形態(tài)及革蘭氏染色染色結(jié)果，初步判定平板上長(zhǎng)出的細(xì)菌為四種，其中兩種為革蘭氏陽(yáng)性球菌，另外兩種為革蘭氏陰性桿菌。

根據(jù)鏡檢結(jié)果，選擇GP革蘭氏陽(yáng)性球菌鑒定卡片和GP67革蘭氏陽(yáng)性球菌藥敏卡片、GN革蘭氏陰性桿菌鑒定卡片和GN13革蘭氏陰性桿菌藥敏卡片，制備菌懸液并上機(jī)；經(jīng)過(guò)鑒定和藥敏分析，鑒定結(jié)果為齲齒羅氏菌、緩慢葡萄球菌、施氏假單胞菌、大腸桿菌，用藥組合為替加環(huán)素、左氧氟沙星、黃芪多糖，肌肉注射。

4 討論

結(jié)合此次藥敏試驗(yàn)的結(jié)果，以及考慮較小的血藥濃度，此鴨場(chǎng)選擇替加環(huán)素、左氧氟沙星、黃芪多糖治療，血藥濃度控制在1μg/ml，防止濫用藥、過(guò)度用藥，造成微生物生態(tài)失衡、耐藥菌株的增加的現(xiàn)象。通過(guò)用藥治療，很好控制了該鴨場(chǎng)病情。

另外，建議養(yǎng)殖場(chǎng)在日常中注意生物安全的科學(xué)管理，舍內(nèi)、舍外定期消毒，減少病原菌的繁殖；及時(shí)清理病死禽及糞便，并做無(wú)害化處理；定期對(duì)場(chǎng)內(nèi)鼠類等動(dòng)物進(jìn)行滅殺；減少外來(lái)獸醫(yī)等人員帶來(lái)的感染風(fēng)險(xiǎn)；減少與場(chǎng)外禽類的接觸風(fēng)險(xiǎn)。

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2030年全球禽肉產(chǎn)量預(yù)計(jì)將會(huì)超過(guò)豬肉產(chǎn)量

在巴西圣保羅召開(kāi)的國(guó)際豬肉和家禽展上，美國(guó)家禽及禽蛋出口委員會(huì)主席和國(guó)際家禽委員會(huì)主席James H Sumner在分析全球肉雞及火雞的生產(chǎn)養(yǎng)殖情況時(shí)指出，全球家禽業(yè)呈現(xiàn)“現(xiàn)象級(jí)”增長(zhǎng)，2030年全球禽肉產(chǎn)量預(yù)計(jì)將會(huì)超過(guò)豬肉產(chǎn)量。需求方面，過(guò)去二十年，全球雞肉需求增長(zhǎng)91%，年均增速3.5%；預(yù)計(jì)十年后全球雞肉需求將會(huì)再增加30%。

全球雞肉最主要的出口國(guó)是巴西和美國(guó)，兩國(guó)雞肉出口量合計(jì)占全球雞肉出口總量的三分之二，其中，巴西占比相對(duì)較高。通過(guò)對(duì)比美國(guó)2009～2016年雞肉出口形勢(shì)，Sumner表示美國(guó)已經(jīng)適應(yīng)了國(guó)際關(guān)系和國(guó)際優(yōu)先選擇權(quán)的變化。例如，2009年，美國(guó)雞肉出口最大的單個(gè)貿(mào)易伙伴是俄羅斯，占整個(gè)市場(chǎng)份額的20.5%;其次是中國(guó)，占19.9%；而2016年，這兩個(gè)市場(chǎng)沒(méi)有與美國(guó)進(jìn)行禽肉貿(mào)易，墨西哥和中國(guó)香港則成為其最主要的單個(gè)出口市場(chǎng)，所占份額分別為21.9%和9.8%。

同時(shí)，美國(guó)禽肉出口也面臨許多挑戰(zhàn)。當(dāng)前由于美國(guó)禽流感爆發(fā)，中國(guó)禁止了從美國(guó)進(jìn)口禽肉。Sumner期望年底能夠解除出口禁令。特朗普政府將會(huì)著手解決這一問(wèn)題。此外，北美自由貿(mào)易協(xié)定(NAFTA)正在磋商，美國(guó)和墨西哥關(guān)系惡化。Sumner對(duì)此表示樂(lè)觀，認(rèn)為北美自由貿(mào)易協(xié)定仍會(huì)繼續(xù)，不會(huì)有顯著變化，面臨的問(wèn)題只是暫時(shí)的。雖然墨西哥能夠從任何渠道進(jìn)口商品，但美國(guó)與墨西哥的地緣優(yōu)勢(shì)高于任何國(guó)家，尤其是在禽肉貿(mào)易上，跟其他國(guó)家相比具有無(wú)可比擬的成本競(jìng)爭(zhēng)力。

S858.325.1

C

1673-1085（2017）11-0044-03

2017-10-15

山東省家禽產(chǎn)業(yè)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)SDAIT-11-13；病死畜禽無(wú)害化處理技術(shù)推廣；種畜禽場(chǎng)疫病凈化技術(shù)示范與推廣。

王苗利（1987-），女，山東人，碩士，獸醫(yī)師，研究方向：動(dòng)物細(xì)菌病檢測(cè)。

**通訊作者：陳靜，博士，研究員，山東省動(dòng)物疫病預(yù)防與控制中心。