班兆軍,陳存坤,李國(guó)鵬,于林凱,王宏鵬,孫 蓉,毛建衛(wèi)
(1.浙江科技學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院/輕工學(xué)院,浙江省農(nóng)產(chǎn)品化學(xué)與生物加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江省農(nóng)業(yè)生物資源生化制造協(xié)同創(chuàng)新中心,浙江 杭州 310023;2.國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津),天津市農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后生理與貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300384;3.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,廣東 湛江 524001)
鼠尾草(Salvia off cinalis L.)不同組織精油組分差異比較
班兆軍1,陳存坤2,李國(guó)鵬3,于林凱1,王宏鵬1,孫 蓉1,毛建衛(wèi)1
(1.浙江科技學(xué)院生物與化學(xué)工程學(xué)院/輕工學(xué)院,浙江省農(nóng)產(chǎn)品化學(xué)與生物加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江省農(nóng)業(yè)生物資源生化制造協(xié)同創(chuàng)新中心,浙江 杭州 310023;2.國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津),天津市農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)后生理與貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300384;3.中國(guó)熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院農(nóng)產(chǎn)品加工研究所,廣東 湛江 524001)
利用甲基叔丁醚法結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)比較鼠尾草花、葉片及莖精油的揮發(fā)性組分差異。結(jié)果表明:鼠尾草不同器官中共檢測(cè)到4 種單萜、17 種倍半萜、6 種單萜衍生物、2 種倍半萜衍生物及2 種酯類化合物共31 種揮發(fā)性物質(zhì);不同器官的揮發(fā)性組分不盡相同,花器官中的揮發(fā)性組分最多為31 種化合物;揮發(fā)性物質(zhì)含量最高的是葉片,達(dá)到2 334.48 ng/g;吉瑪烯、可巴烯、石竹烯及乙酸芳樟酯是鼠尾草不同器官中含量較高的揮發(fā)性組分,但其對(duì)不同器官揮發(fā)性精油的貢獻(xiàn)率亦不同。
鼠尾草;揮發(fā)性組分;組織;精油;差異
植物精油是植物體內(nèi)產(chǎn)生的具有一定芳香氣味的次生代謝物質(zhì)的總稱,常溫條件下呈油狀液體,由分子質(zhì)量相對(duì)較小的簡(jiǎn)單化合物組成[1]。其成分復(fù)雜,多由幾十種乃至上百種化合物組成,主要成分為單萜、倍半萜及芳香烴衍生物等,其具有易揮發(fā)、有特殊氣味及具有滲透力的特點(diǎn)[2]。研究表明,植物精油具有矯正異味、增香、著色等作用,同時(shí)具有抗菌、抗病毒和抗氧化等生物活性,作為天然防腐劑和抗氧化劑用于保持食品的新鮮品質(zhì)和營(yíng)養(yǎng),是一種公認(rèn)安全物質(zhì)。因其兼具一定的藥用價(jià)值及驅(qū)蟲(chóng)和殺菌作用,被廣泛用作一種天然香味劑、天然防腐劑和營(yíng)養(yǎng)劑的制備材料[3-5]。
鼠尾草(Salvia off cinalis L.)為唇形科鼠尾草屬1~2 a生或多年生草本植物,其葉片、莖及花有較高的利用價(jià)值。鼠尾草原產(chǎn)于地中海地區(qū),在我國(guó)主要分布在廣東、廣西、江西、浙江省份。鼠尾草精油是一種淡黃綠色液體、比較清澈、具有強(qiáng)烈的香草氣味,不僅具有抗菌、開(kāi)胃、促進(jìn)傷口愈合等功效,并且還具有較強(qiáng)的抗氧化活性,秦海燕等[6]發(fā)現(xiàn)鼠尾草精油能有效地清除·OH和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基,減輕·OH對(duì)DNA的損傷。區(qū)敏港等[7]利用紙片擴(kuò)散法和最小抑菌濃度法測(cè)定鼠尾草植物精油對(duì)產(chǎn)氣莢膜梭菌的體外抑菌作用,并且表明植物精油中酚類、萜類化合物及萜類氧化衍生物對(duì)精油的抑菌作用的貢獻(xiàn)率較高,吳克剛等[8]發(fā)現(xiàn)鼠尾草植物精油對(duì)銅綠假單胞菌的最低抑菌的空間含量為500 μL/L。鼠尾草是一種抗氧化成分非常豐富的天然原料,對(duì)于鼠尾草的研究較少,目前研究?jī)H是比較鼠尾草精油不同提取方法[9-10],不同種之間[11]及與其他草本植物的精油組分和活性差異[7,12-13],鼠尾草精油的化學(xué)成分及生物活性研究[8,14-15],而對(duì)于不同組織部位鼠尾草精油方面的研究卻很少。甲基叔丁醚(methyl tert-butyl ether,MTBE)法能夠快速地將植物葉片及莖中的精油組分滲出到提取液中,然后再通過(guò)硅膠和無(wú)水硫酸鈉去除提取液中的大分子物質(zhì)及水分后直接利用氣相色譜-質(zhì)譜法進(jìn)行分析,該方法簡(jiǎn)單、有效、能夠同時(shí)進(jìn)行大量樣品的檢測(cè)[16-17]。本研究利用MTBE法提取鼠尾草不同部位制備精油,比較不同部位精油組分差異,以期為鼠尾草的開(kāi)發(fā)利用提供理論依據(jù)。
1.1 材料與試劑
鼠尾草(Salvia off cinalis L.)材料由以色列農(nóng)業(yè)研究組織Newe Yaar芳香草本植物研究組提供。新鮮鼠尾草植株進(jìn)行陰干后,將花、上部葉片及莖分別取樣用于精油揮發(fā)性組分測(cè)定。
異丁基苯(優(yōu)級(jí)純) 天津市大茂化學(xué)試劑廠;甲基叔丁醚(優(yōu)級(jí)純) 上海阿拉丁生化有限公司。
1.2 儀器與設(shè)備
6890/5973氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀 美國(guó)惠普公司;Rtx-5SIL毛細(xì)管柱(30 m×0.25 mm,0.25 μm) 美國(guó)安捷倫科技公司;BCD-256WECX冰箱 合肥美菱股份有限公司。
1.3 方法
1.3.1 精油制備
鼠尾草植物精油采用MTBE法進(jìn)行制備[16]。分別準(zhǔn)確稱取1.0 g花、葉片及莖裝入20 mL樣品瓶,加入10 mL含有質(zhì)量濃度10 μg/mL異丁基苯的99.8%的MTBE溶液,加蓋封口。25 ℃室溫振蕩12 h后過(guò)分離柱,去除提取液中的水分、極性物質(zhì)及葉綠素等大分子質(zhì)量化合物?;?、葉片及莖分別3 次重復(fù),精油制備好后置于4 ℃冰箱待測(cè)。
1.3.2 氣相色譜-質(zhì)譜分析條件
氣相色譜條件:Rtx-5SIL毛細(xì)管柱(30 m× 0.25 mm,0.25 μm);升溫程序:起始溫度50 ℃,保留1 min,以5℃/min升溫到260 ℃,保留10 min。進(jìn)樣口溫度250 ℃;連接口溫度280 ℃;解吸附時(shí)間5 min;載氣為高純He(99.99%);分流比1∶50。
質(zhì)譜條件:連接口溫度280 ℃;電子電離源;離子源溫度230 ℃;四極桿溫度150 ℃;電子能量70 eV;全程掃描模式。
揮發(fā)性物質(zhì)的定性分析:樣品經(jīng)過(guò)氣相色譜進(jìn)行分離后,形成不同的色譜峰。各組分質(zhì)譜經(jīng)NIST、Wiley檢索,結(jié)合保留指數(shù)以確定各化學(xué)成分。定量分析:以10 μg/mL異丁基苯作為內(nèi)標(biāo)進(jìn)行含量計(jì)算。計(jì)算方法為:樣品提取精油后進(jìn)行充分干燥后稱量,化合物Cij含量(μg/g)按下式計(jì)算。
式中:Crr為內(nèi)標(biāo)含量100 μg/mL;Vs為樣品溶劑體積/mL;Si為化合物峰面積;Wj為2次稱量樣品損失量/g;Srr為異丁基苯內(nèi)標(biāo)的峰面積。
2.1 鼠尾草植物精油組成
利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀,在鼠尾草不同組織中共檢測(cè)出31 種揮發(fā)性物質(zhì),其中包括4 種單萜、17 種倍半萜、6 種單萜衍生物、2 種倍半萜衍生物及2 種酯類化合物,如表1所示。不同化合物在鼠尾草花、葉片及莖中的含量不同。31 種揮發(fā)性物質(zhì)中,乙酸芳樟酯、吉瑪烯及石竹烯是鼠尾草中重要的揮發(fā)性組分,但其在不同組織間的含量卻不同。吉瑪烯在葉片中的含量最高,達(dá)到909.68 ng/g,而花和莖中該化合物的含量?jī)H分別為196.26 ng/g和109.37 ng/g。
表1 鼠尾草不同器官揮發(fā)性精油組分Table1 Volatile compositions of essential oils from different organs of sage
2.2 鼠尾草不同組織精油組成差異比較
鼠尾草不同組織中揮發(fā)性物質(zhì)的組成不同,在鼠尾草花中檢測(cè)到的揮發(fā)性物質(zhì)最多,共有五大類31 種化合物,而在葉片和莖中分別檢測(cè)到20 種和19 種化合物。在葉片和莖中,并未檢測(cè)到單萜類化合物。葉片中的揮發(fā)性物質(zhì)含量最高,達(dá)到2 334.48 ng/g,其次為鼠尾草花(揮發(fā)性物質(zhì)含量為1 263.34 ng/g),莖中的揮發(fā)性物質(zhì)含量最低,僅為776.90 ng/g。在鼠尾草花中共檢測(cè)到4 種單萜類化合物,分別為月桂烯、檸檬烯、松油烯及羅勒烯,4 種單萜類化合物的含量不同,最低為檸檬烯(3.95 ng/g),最高為月桂烯(21.35 ng/g);在鼠尾草的葉片和莖組織中卻并未檢測(cè)到任何的單萜類物質(zhì)。倍半萜類化合物是在鼠尾草各組織中檢測(cè)到最多的化合物,在花、葉片及莖組織中分別檢測(cè)到17、13 種和12 種倍半萜化合物。不同倍半萜類化合物在不同組織間的含量不盡相同。17 種倍半萜類化合物中,吉瑪烯、石竹烯及可巴烯含量較高,其對(duì)鼠尾草精油的貢獻(xiàn)率較高,但其含量在不同組織間差異較大,吉瑪烯在葉片中的含量達(dá)到909.68 ng/g,而花和莖中含量分別為196.26 ng/g和109.37 ng/g。鼠尾草花和葉片中石竹烯的含量均高于可巴烯,而莖中則相反。萜類衍生物亦為鼠尾草精油中重要的揮發(fā)性組分。在鼠尾草花、葉片及莖中共檢測(cè)到6 種單萜衍生物及2 種倍半萜衍生物,香芹酚和石竹烯氧化物分別是單萜衍生物和倍半萜衍生物中含量最多的2 種化合物。在鼠尾草中檢測(cè)到2 種酯類化合物,分別為乙酸芳樟酯和橙花醇乙酸酯,其中乙酸芳樟酯是鼠尾草精油中重要的揮發(fā)性組分,其在花、葉片及莖中的含量分別為379.16、130.21 ng/g和215.45 ng/g。
表2 不同類揮發(fā)性組分在鼠尾草不同器官中揮發(fā)性精油組分的含量Table2 The contents of different volatile compounds in essential oils from different organs of sage
如表2所示,不同化合物在不同組織間的絕對(duì)含量及相對(duì)含量不盡相同。倍半萜類化合物是鼠尾草精油中最為重要的一類揮發(fā)性組分,其在不同組織內(nèi)的絕對(duì)含量及相對(duì)含量均為最高。鼠尾草花和莖組織中的倍半萜類化合物含量分別為610.59 ng/g和334.64 ng/g,相對(duì)含量分別為48.33%和43.07%,而倍半萜化合物在葉片中的含量達(dá)到1 930.02 ng/g(相對(duì)含量82.67%),其絕對(duì)含量是花中的6 倍?;ńM織中含量最多的為倍半萜類化合物,其次為酯類化合物(30.94%)和單萜衍生物(12.11%);鼠尾草莖中的酯類物質(zhì)和單萜衍生物的相對(duì)含量分別為27.73%和22.53%。盡管單萜衍生物、倍半萜衍生物及酯類物質(zhì)在鼠尾草葉片中的絕對(duì)含量比較高(大于100 ng/g),但其相對(duì)含量均低于10%。
唇形科植物是植物界中重要的芳香植物類群,其廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化妝及日用品領(lǐng)域。本研究利用MTBE法萃取植物揮發(fā)性組分結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜分析共檢測(cè)到單萜、倍半萜、單萜衍生物、倍半萜衍生物及酯類共五大類31 種揮發(fā)性組分,其中倍半萜化合物的種類最多,共有17 種,其次為單萜衍生物和單萜類化合物。劉曉輝[13]利用氣相色譜-質(zhì)譜法對(duì)超臨界CO2萃取鼠尾草提取揮發(fā)油進(jìn)行鑒定,共分離出74 種成分,主要化學(xué)成分為(E)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯、(Z)-3,7-二甲基-2,6-辛二烯,其次是6-甲基-1,5-庚二烯、(Z)-3-甲基-2-戊烯、崔柏酮等。李小龍等[18]在比較4 種唇形科植物香氣時(shí)發(fā)現(xiàn),鼠尾草中的香氣成分主要為苯烴類化合物(7 種),只有一種烯烴類化合物(月桂烯)被檢測(cè)。在本研究中,月桂烯僅在鼠尾草花中被檢測(cè)到,其含量為21.35 ng/g。岳玉秀[19]利用水蒸氣蒸餾法對(duì)鼠尾草進(jìn)行精油提取和分析中卻并沒(méi)有檢測(cè)到月桂烯。不同的前處理方法會(huì)影響精油的組分差異,蒸餾法是中草藥中提取精油最常用的方法之一,雖然能得到質(zhì)量較高的精油,但其費(fèi)時(shí)費(fèi)力。李小龍等[18]采用動(dòng)態(tài)頂空采集法采集植物釋放香氣,只能檢測(cè)到植物釋放出的揮發(fā)性組分,但其并未考慮植物本身有一些高分子質(zhì)量的揮發(fā)性物質(zhì)很難被檢測(cè)到。
植物精油中揮發(fā)性組分受區(qū)域位置、栽培季節(jié)、栽培條件、樣品部位及采收時(shí)間等一系列因素影響。Zutic等[20]發(fā)現(xiàn)克羅地亞和以色列之間的香紫蘇由于區(qū)域環(huán)境影響引起精油成分差異。Al-Tawaha等[15]發(fā)現(xiàn)保護(hù)栽培條件下鼠尾草精油含量和莰酮含量顯著高于野外生長(zhǎng)的,總酚含量和抗氧化活性卻是野外生長(zhǎng)高于保護(hù)栽培條件下的鼠尾草精油。Hussain等[21]比較了不同季節(jié)羅勒精油的揮發(fā)性組分差異,研究發(fā)現(xiàn)芳樟醇、杜松醇、β-石竹烯、莰酮等揮發(fā)性組分受季節(jié)影響較大。利用亞臨界萃取法和水蒸氣蒸餾法對(duì)唇形科神香草的花、葉和莖提取精油,精油得率從高到低均為花、葉、莖,且花中提取的精油品質(zhì)較高[22]。Fischer等[16]發(fā)現(xiàn)在羅勒的同一植株上不同部位葉片提取精油的組分也不同,丁香油酚和甲基丁香油酚分別是鮮葉和老葉中含量最高的精油組分,并且芳樟醇在老葉中的含量明顯低于新葉。Farka等[23]研究發(fā)現(xiàn)香紫蘇植物花中的揮發(fā)性組分比葉片中的要多,在花和葉片中分別檢測(cè)到34 種和23 種揮發(fā)性物質(zhì),這與本研究結(jié)果一致。本研究從鼠尾草的花和葉片中分別檢測(cè)到31 種和20 種揮發(fā)性組分,并且各組分的相對(duì)含量及絕對(duì)含量均不同。芳樟醇、香紫蘇醇、乙酸芳樟酯和吉瑪烯、石竹烯、牛兒烯分別是香紫蘇花和葉片中含量較高的幾種組分。而在鼠尾草中,乙酸芳樟酯和吉瑪烯分別是鼠尾草花和葉片中含量最高的揮發(fā)性組分,石竹烯亦為鼠尾草花和葉片中重要的揮發(fā)性組分之一。
植物精油的成分組成十分復(fù)雜,對(duì)伊朗中部紫蘇葉和花精油提取分析發(fā)現(xiàn)主要成分為吉馬烯、石竹烯、雙環(huán)吉馬烯、斯巴醇、石竹烯氧化物、桉葉油醇、檸檬烯等成分占54.28%~65.92%,具有抗氧化活性,抗菌性能良好[24]。精油的抑菌活性由主要成分決定或幾種成分協(xié)同作用,機(jī)理仍需進(jìn)一步明確以助于在食品保鮮領(lǐng)域的應(yīng)用[25]。
本研究在鼠尾草花、葉片及莖中分別檢測(cè)到31、20種和19 種揮發(fā)性組分,倍半萜類化合物的種類最多。通過(guò)比較不同組織中精油揮發(fā)性組分差異,鼠尾草花中的揮發(fā)性物質(zhì)種類最多;葉片的揮發(fā)性組分的含量最高,達(dá)到2 334.48 ng/g,其次為鼠尾草花(1 263.34 ng/g);莖中的揮發(fā)性組分含量最低,僅為776.90 ng/g;且不同組織中的揮發(fā)性組分的相對(duì)含量不盡相同。研究結(jié)果表明,鼠尾草的花和葉片是精油組分含量最高的組織,開(kāi)花期是鼠尾草進(jìn)行精油提取的最佳時(shí)期,為鼠尾草開(kāi)發(fā)利用的生產(chǎn)實(shí)踐提供理論依據(jù)。
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Comparison of the Volatile Compositions of Essential Oils from Different Organs of Sage (Salvia off cinalis L.)
BAN Zhaojun1, CHEN Cunkun2, LI Guopeng3, YU Linkai1, WANG Hongpeng1, SUN Rong1, MAO Jianwei1
(1. Zhejiang Provincial Key Laboratory for Chemical and Biological Processing Technology of Farm Product, Zhejiang Province Collaborative Innovation Center of Agricultural Biological Resources Biochemical Manufacturing, School of Biological and Chemical Engineering/School of Light Industry, Zhejiang University of Science and Technology, Hangzhou 310023, China; 2. Tianjin Key Laboratory of Postharvest Physiology and Storage of Agricultural Products, National Engineering Technology Research Center for Preservation of Agriculture Product, Tianjin 300384, China; 3. Agricultural Product Processing Research Institute, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Zhanjiang 524001, China)
The essential oils of different organs of sage (Salvia off cinalis L.) including f owers, leaves and stems, were extracted using methyl tert-butyl ether (MTBE) and then analyzed by gas chromatography-mass spectrometry (GC-MS). A total of 31 volatile compounds were identif ed, including 4 moneterpenes, 17 sesquiterpenes, 6 moneterpenes derivations, 2 sesquiterpenes derivations and 2 esters. However, the volatile compositions of the essential oils were different. The f ower essential oil contained the highest number of volatiles (31) while the leaf essential oil contained the highest amount of volatiles (2 334.48 ng/g). Germacrene, caryophyllene, α-copaene and linalyl acetate were the dominant volatiles in the different essential oils, which made different contributions to them.
sage; volatile compounds; organs; essential oil; difference
10.7506/spkx1002-6630-201702026
TQ654.2
A
1002-6630(2017)02-0159-05
班兆軍, 陳存坤, 李國(guó)鵬, 等. 鼠尾草(Salvia off cinalis L.)不同組織精油組分差異比較[J]. 食品科學(xué), 2017, 38(2): 159-163. DOI:10.7506/spkx1002-6630-201702026. http://www.spkx.net.cn
BAN Zhaojun, CHEN Cunkun, LI Guopeng, et al. Comparison of the volatile compositions of essential oils from different organs of sage (Salvia off cinalis L.)[J]. Food Science, 2017, 38(2): 159-163.
10.7506/spkx1002-6630-201702026. http://www.spkx.net.cn
2016-06-23
浙江省自然科學(xué)基金一般項(xiàng)目(LY17C200008);山東省自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(ZR2014CQ019);浙江科技學(xué)院科研啟動(dòng)基金項(xiàng)目(F701103G01);浙江省農(nóng)產(chǎn)品化學(xué)與生物加工技術(shù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開(kāi)放基金項(xiàng)目(2016KF0015);“十二五”農(nóng)村領(lǐng)域國(guó)家科技計(jì)劃項(xiàng)目(2015BAD16B07);天津市科技計(jì)劃項(xiàng)目(13ZXCXNC02800;12TXGCCX00400)
班兆軍(1980—),男,講師,博士,主要從事天然抗菌劑開(kāi)發(fā)應(yīng)用及食品保鮮加工與包裝研究。E-mail:banzhaojun@zust.edu.cn