劉 瑤，蔡 進(jìn)，陳 瑞，劉珈伲，劉麗娜，黃 靜（貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴陽 550025）

苗藥大烏泡葉提取物的體外抑菌作用考察Δ

劉 瑤＊，蔡 進(jìn)，陳 瑞，劉珈伲，劉麗娜，黃 靜#（貴州醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院，貴陽 550025）

目的：考察苗藥大烏泡葉提取物的體外抑菌作用。方法：將大烏泡葉煎煮水提物和80%醇提物均制備成質(zhì)量濃度為200 mg/mL的藥液，并以氨芐青霉素和氟康唑?yàn)殛栃詫?duì)照（50 mg/mL），采用管碟法測(cè)定其對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、大腸埃希菌、痢疾志賀菌、普通變形桿菌、白色念珠菌、新型隱球菌的抑菌作用。依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取80%醇提物，得到相應(yīng)部位萃取物（50 mg/mL）后，采用管碟法考察其對(duì)上述7種菌株的抑菌作用；篩選出具有抑菌作用的部位及對(duì)藥物敏感的試驗(yàn)菌株，并分別采用微量肉湯稀釋法和瓊脂培養(yǎng)基平板法測(cè)定其最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）。結(jié)果：大烏泡葉的水提物幾乎無抑菌活性，80%醇提物對(duì)各菌株則表現(xiàn)出不同程度的抑制作用，對(duì)5種細(xì)菌的抑菌作用優(yōu)于對(duì)2種真菌；大烏泡葉80%醇提物的乙酸乙酯及正丁醇萃取部位表現(xiàn)出良好的抑菌作用，石油醚和水層部位幾乎沒有抑菌作用，各萃取部位對(duì)真菌均未見抑制作用；大烏泡葉80%醇提物對(duì)5種細(xì)菌的MIC、MBC分別在6.25～12.5、12.5～25 mg/mL之間，其乙酸乙酯部位的MIC、MBC分別為3.13、6.25 mg/mL，其正丁醇部位的MIC、MBC分別在3.13～6.25、6.25～12.5 mg/mL之間。結(jié)論：苗藥大烏泡葉的80%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇萃取部位對(duì)細(xì)菌具有明顯的體外抑菌作用。

大烏泡葉；水提物；醇提物；不同部位；體外抑菌作用；最低抑菌濃度；最低殺菌濃度

大烏泡葉為薔薇科懸鉤子屬植物大烏泡（Rubus multibracteatus Levl.et Vant.）的干燥葉，主要產(chǎn)于四川、云南、貴州等地。其味微苦，性涼，具有清熱解毒、祛風(fēng)除濕、涼血、止血、接骨的功效，民間多用于治療痢疾、腹瀉、風(fēng)濕痹痛、咳血、婦女倒經(jīng)、骨折等[1]。大烏泡葉為民間常用藥，目前對(duì)其研究報(bào)道主要集中在化學(xué)成分[2]及含量測(cè)定[3]上。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn)，大烏泡葉的80%醇提物具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛、抗炎活性[4]，但對(duì)于其提取物的體外抑菌活性卻未見文獻(xiàn)報(bào)道。為了進(jìn)一步明確大烏泡葉的體外抑菌作用，本研究對(duì)大烏泡葉的水提物、80%醇提物及有效提取物的不同極性萃取部位進(jìn)行抑菌試驗(yàn)，為充分利用大烏泡藥材資源提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料

1.1 儀器

SW-CJ-1FD凈化工作臺(tái)（廣州瑞智科學(xué)儀器公司）；KJ14麥?zhǔn)媳葷峁埽ū本┱艹煽萍加邢薰荆?；EL204電子天平[梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司]。

1.2 藥品、試劑與培養(yǎng)基

氨芐青霉素原料藥（北京索萊寶科技有限公司，批號(hào)：104D036，純度：≥98%）；氟康唑原料藥（貴陽凱信生物工程有限公司，批號(hào)：20141203，純度：98%）；乙醇（95%）、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二甲基亞砜（DMSO）等均為分析純（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；水為蒸餾水。

水解酪蛋白（M-H）瓊脂培養(yǎng)基（批號(hào)：20140708）、M-H肉湯培養(yǎng)基（批號(hào)：20130808）、沙氏瓊脂培養(yǎng)基（批號(hào)：20140328）均購自北京索萊寶科技有限公司。

1.3 藥材

大烏泡葉于2015年3月由筆者購自貴州省凱里市，經(jīng)貴州醫(yī)科大學(xué)龍慶德教授鑒定為真品。自然晾干后粉碎為粗粉，儲(chǔ)藏備用。

1.4 菌株

金黃色葡萄球菌[CMCC（B）26003]、表皮葡萄球菌[CMCC（B）26069]、大腸埃希菌[CMCC（B）44102]、痢疾志賀菌[CMCC（B）51105]、普通變形桿菌[CMCC（B）49027]等5種細(xì)菌和白色念珠菌[ATCC10231]、新型隱球菌[CBS6901]等2種真菌的菌株均由貴州醫(yī)科大學(xué)感染與免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 菌種的活化及菌懸液的制備

按無菌操作法，將斜面保存的各標(biāo)準(zhǔn)菌株接種在相應(yīng)的瓊脂培養(yǎng)基上復(fù)蘇（細(xì)菌用M-H瓊脂培養(yǎng)基，37℃條件下培養(yǎng)18～24 h；真菌用沙氏瓊脂培養(yǎng)基，37℃條件下培養(yǎng)24～48 h）[5-6]，轉(zhuǎn)接1次，用滅菌生理鹽水調(diào)整菌懸液濃度與0.5麥?zhǔn)媳葷峁芟喈?dāng)，此時(shí)菌懸液菌濃度約為1.5×108CFU/mL。再按100倍稀釋法取少量菌懸液用滅菌生理鹽水稀釋至1.5×106CFU/mL，備用。

2.2 大烏泡葉水提物和80%%醇提物體外抑菌作用考察

2.2.1 藥液的制備 （1）大烏泡葉水提物：取大烏泡葉粗粉500 g，以10倍量水充分浸泡30 min，煎煮3次，每次3 h，用紗布將煎煮液濾過。合并3次濾液，蒸干，得大烏泡葉水提物（得率為24.6%）。將提取物以無菌生理鹽水溶解，制成質(zhì)量濃度為200 mg/mL的藥液，備用。（2）大烏泡葉80%醇提物：取大烏泡葉粗粉500 g，以10倍量80%乙醇回流提取3次，每次3 h，減壓抽濾提取液。合并3次抽濾液，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀回收乙醇，蒸干，得大烏泡葉80%醇提物（得率為18.6%）。將提取物用10%DMSO-無菌生理鹽水溶解，制成質(zhì)量濃度為200 mg/mL的藥液，備用。（3）對(duì)照藥液的制備：將氨芐青霉素原料藥和氟康唑原料藥用無菌生理鹽水溶解，制成質(zhì)量濃度分別為50、300 mg/L的藥液，備用。試驗(yàn)前所有藥液均用0.22 μm濾膜過濾除菌。

2.2.2 大烏泡葉水提物和80%醇提物的體外抑菌作用考察 采用管碟法[7-9]。按無菌操作要求，分別吸取100 μL各菌懸液至相應(yīng)培養(yǎng)基表面（細(xì)菌用M-H瓊脂培養(yǎng)基，真菌用沙氏瓊脂培養(yǎng)基），無菌棉簽涂布均勻，室溫下放置2～3 min，等距分散放置滅菌牛津杯（外徑為8 mm、內(nèi)徑6 mm、高為10 mm），靜置10～15 min使其固定。向每個(gè)小杯中加入100 μL制備好的相應(yīng)藥液，室溫下放置2 h使藥液擴(kuò)散，每個(gè)平板均設(shè)置3個(gè)試藥組、1個(gè)藥物對(duì)照組（細(xì)菌用氨芐青霉素，真菌用氟康唑）和1個(gè)10%DMSO-無菌生理鹽水的溶劑對(duì)照組，將各培養(yǎng)皿置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)（細(xì)菌培養(yǎng)18～24 h，真菌培養(yǎng)24～48 h），取出觀察抑菌圈，并測(cè)量抑菌圈直徑。每種菌株平行操作3次。結(jié)果判定按《藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)》標(biāo)準(zhǔn)[6]：抑菌圈直徑＜10 mm為抗藥，10 mm為輕度敏感，11～15 mm為中度敏感，16～20 mm為高度敏感。抑菌圈直徑測(cè)定結(jié)果見表1。

表1 大烏泡葉水提物和80%%醇提物的抑菌圈直徑測(cè)定結(jié)果（±s，n＝3，mm）Tab 1 Diameters of antibacterial circle for aqueous extract and 80%%ethanol extract from R.multibracteatus leaves（±s，n＝3，mm）

表1 大烏泡葉水提物和80%%醇提物的抑菌圈直徑測(cè)定結(jié)果（±s，n＝3，mm）Tab 1 Diameters of antibacterial circle for aqueous extract and 80%%ethanol extract from R.multibracteatus leaves（±s，n＝3，mm）

注：“/”為未進(jìn)行試驗(yàn)；“N”為無抑菌圈Note：“/”means not tested；“N”means no antibacterial circle

樣品水提物80%醇提物氨芐青霉素氟康唑10%DMSO-無菌生理鹽水金黃色葡萄球菌9.15±0.32 20.98±0.43 38.38±0.30表皮葡萄球菌15.35±0.41 23.95±0.49 16.23±0.21大腸埃希菌9.95±0.24 16.80±0.39 15.90±0.21痢疾志賀菌9.8±0.37 17.80±0.33 16.85±0.30普通變形桿菌10.12±0.28 17.83±0.31 19.37±0.42 /N /N /N /N /N白色念珠菌N 9.60±0.29 / 15.25±0.30 N新型隱球菌N 9.03±0.34 / 16.20±0.24 N

由表1可見，大烏泡葉水提物幾乎無抑菌活性，只有表皮葡萄球菌對(duì)其表現(xiàn)出中度敏感，抑菌圈直徑為（15.35±0.41）mm。大烏泡葉80%醇提物對(duì)5種細(xì)菌均表現(xiàn)出抑菌活性，其中對(duì)表皮葡萄球菌的抑制效果最佳，抑菌圈直徑為（23.95±0.49）mm，對(duì)2種真菌抑制效果不佳；且大烏泡葉80%醇提物對(duì)表皮葡萄球菌和痢疾志賀菌的抑制作用強(qiáng)于對(duì)照藥物氨芐青霉素?？梢姶鬄跖萑~80%醇提物抑菌作用強(qiáng)于大烏泡葉水提物，故本研究進(jìn)一步考察大烏泡葉80%醇提物不同極性部位的體外抑菌作用。

2.3 大烏泡葉80%%醇提物不同極性部位的體外抑菌作用考察

2.3.1 大烏泡葉80%醇提物不同極性部位萃取物的制備 取大烏泡葉80%醇提物用水混懸后，先用石油醚萃取，剩余藥液再用乙酸乙酯萃取，最后用正丁醇萃取，余下藥液為水層。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀將不同極性溶劑減壓回收，真空干燥，分別得石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水層部位（得率分別為1.5%、2.8%、3%、6%）。將不同極性部位分別用10%DMSO-無菌生理鹽水溶解，制備成提取物質(zhì)量濃度均為50 mg/mL的藥液，備用。試驗(yàn)前所有藥液均用0.22 μm濾膜過濾除菌。

2.3.2 體外抑菌活性測(cè)定 取大烏泡葉80%醇提物不同極性部位藥液，按照“2.2.2”項(xiàng)下方法測(cè)定其對(duì)5種細(xì)菌和2種真菌的抑菌圈大小。測(cè)定結(jié)果見表2。

表2 大烏泡葉80%%醇提物不同極性部位的抑菌圈直徑測(cè)定結(jié)果（±s，n＝3，mm）Tab 2 Diameters of antibacterial circle for different polar fractions of 80%%ethanol extract from R. multibracteatus leaves（±s，n＝3，mm）

表2 大烏泡葉80%%醇提物不同極性部位的抑菌圈直徑測(cè)定結(jié)果（±s，n＝3，mm）Tab 2 Diameters of antibacterial circle for different polar fractions of 80%%ethanol extract from R. multibracteatus leaves（±s，n＝3，mm）

注：“/”為未進(jìn)行試驗(yàn)；“N”為無抑菌圈Note：“/”means not tested；“N”means no antibacterial circle

樣品石油醚部位乙酸乙酯部位正丁醇部位水層部位氨芐青霉素氟康唑10%DMSO-無菌生理鹽水金黃色葡萄球菌7.17±0.32 15.1±0.51 14.6±0.44 8.07±0.35 39.5±0.27表皮葡萄球菌7.65±0.22 15.58±0.48 16.28±0.31 12.27±0.28 16.73±0.29大腸埃希菌N 14.5±0.39 13.5±0.35 6.70±0.11 16.7±0.22痢疾志賀菌7.30±0.37 14.13±0.53 13.73±0.47 6.77±0.13 16.70±0.24普通變形桿菌N 14.85±0.50 15.95±0.47 9.25±0.19 20.95±0.30白色念珠菌新型隱球菌NNNN/ NNNN/ /N /N /N /N /N 15.53±0.27 N 16.0±0.31 N

由表2可見，大烏泡葉80%醇提物的石油醚、水層部位幾乎無抑菌活性；乙酸乙酯、正丁醇部位對(duì)5種細(xì)菌均表現(xiàn)出良好抑菌效果，且均對(duì)表皮葡萄球菌的抑菌作用最強(qiáng)；各提取部位對(duì)2種真菌均未見抑菌活性。故本研究進(jìn)一步考察大烏泡葉80%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇部位對(duì)5種細(xì)菌的最低抑菌濃度（MIC）和最低殺菌濃度（MBC）。

2.4 大烏泡葉80%%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇部位對(duì)5種細(xì)菌的MIC和MBC考察

2.4.1 MIC的測(cè)定 采用微量肉湯稀釋法[6-9]。按無菌操作法，取一次性無菌96孔板，每排12孔各加入100 μL M-H肉湯培養(yǎng)基，再吸取100 μL藥液（大烏泡葉80%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇部位）加入第1孔，混勻后吸取100 μL加入第2孔，如此連續(xù)倍比稀釋至第10孔，第10孔中吸取100 μL棄去，此為試驗(yàn)組；第11孔不加試藥，以便觀察培養(yǎng)基是否適合菌株生長，為生長對(duì)照組；第12孔不加菌液，以便觀察培養(yǎng)基否被污染，為培養(yǎng)基對(duì)照組。吸取100 μL濃度為1.5×106CFU/mL的菌懸液，依次加入到上述1～11孔中，充分混勻，此時(shí)各孔菌濃度為7.5×105CFU/mL；吸取100 μL M-H肉湯培養(yǎng)基加入到第12孔中，充分混勻。將96孔微孔板加蓋置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h，取出觀察菌株生長情況。在黑色背景光源下，與生長對(duì)照孔中生長特性相同如肉湯渾濁或孔底出現(xiàn)渾濁，則判斷為有菌生長。以無菌生長所對(duì)應(yīng)的最低藥物質(zhì)量濃度記為該藥的MIC。每種菌株平行操作3次。測(cè)定結(jié)果詳見表3、表4、表5。

表3 大烏泡葉80%%醇提物對(duì)5種菌株的MIC測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 3 MIC of 80%%ethanol extract from R.multibracteatus leaves for 5 kinds of bacterial strains（n＝3）

表4 大烏泡葉80%%醇提物乙酸乙酯部位對(duì)5種菌株的MIC測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 4 MIC of ethyl acetate fraction of 80%%ethanol extract from R.multibracteatus leaves for 5 kinds of bacterial strains（n＝3）

表5 大烏泡葉80%%醇提物正丁醇部位對(duì)5種菌株的MIC測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 5 MIC of n-butyl alcohol fraction of 80%%ethanol extract from R.multibracteatus leaves for 5 kinds of bacterial strains（n＝3）

結(jié)果顯示，黑色光源背景下，生長對(duì)照組肉湯渾濁，提示培養(yǎng)基適合細(xì)菌生長；培養(yǎng)基對(duì)照組肉湯澄清，說明培養(yǎng)基并未受到污染。仔細(xì)觀察各孔狀態(tài)，可得知大烏泡葉80%醇提物對(duì)表皮葡萄球菌的MIC為6.25 mg/mL，對(duì)金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、痢疾志賀菌、普通變形桿菌的MIC均為12.5 mg/mL；其乙酸乙酯部位對(duì)上述5種細(xì)菌的MIC均為3.13 mg/mL；其正丁醇部位對(duì)普通變形桿菌的MIC為3.13 mg/mL，對(duì)其余4種細(xì)菌的MIC均為6.25 mg/mL。

2.4.2 MBC的測(cè)定 采用瓊脂培養(yǎng)基平板法[6]分別從“2.4.1”項(xiàng)下未見細(xì)菌生長的孔中吸取100 μL培養(yǎng)液，分別接種至M-H瓊脂培養(yǎng)基平皿中，用無菌棉簽均勻涂布，置37℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)18～24 h。用活菌計(jì)數(shù)法檢查平板上菌落，以平均菌落數(shù)小于5的最小稀釋度的藥物質(zhì)量濃度記為該藥的MBC。每種菌株平行操作3次。測(cè)定結(jié)果詳見表6。

表6 大烏泡葉80%%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇部位的MBC測(cè)定結(jié)果（n＝3）Tab 6 MBC of 80%%ethanol extract from R.multibracteatus leaves and its ethyl acetate and n-butyl alcohol fractions（n＝3）

由表6可知，大烏泡葉80%醇提物對(duì)表皮葡萄球菌的MBC為12.5 mg/mL，對(duì)其余4種細(xì)菌的MBC均為25 mg/mL；其乙酸乙酯部位對(duì)5種細(xì)菌的MBC均為6.25 mg/mL；其正丁醇部位對(duì)大腸埃希菌、痢疾志賀菌的MBC均為12.5 mg/mL，對(duì)金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、普通變形桿菌的MBC均為6.25 mg/mL。

3 討論

本試驗(yàn)選擇了氨芐青霉素和氟康唑作為陽性對(duì)照藥物。其中，氨芐青霉素為廣譜抗生素，對(duì)革蘭陽性菌和革蘭陰性菌均有很好的抑菌效果；氟康唑?yàn)榭拐婢幬?，?duì)真菌的抑制作用良好。實(shí)驗(yàn)中所有藥物的質(zhì)量濃度由筆者根據(jù)查閱的相關(guān)文獻(xiàn)[10-11]以及對(duì)前期預(yù)試驗(yàn)結(jié)果歸納整理后設(shè)定。

抑菌活性測(cè)定結(jié)果顯示，大烏泡葉水提物幾乎未見抑菌作用，而80%醇提物對(duì)各菌株的抑菌作用顯著強(qiáng)于水提物，且對(duì)5種細(xì)菌的抑制效果優(yōu)于對(duì)2種真菌，其中又對(duì)表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌的抑制效果優(yōu)于對(duì)其他細(xì)菌。80%醇提物的4個(gè)不同極性部位的抑菌活性測(cè)定結(jié)果顯示，石油醚及水層部位幾乎無抑菌活性，乙酸乙酯及正丁醇部位表現(xiàn)出良好抑菌效果，但4個(gè)萃取部位對(duì)真菌均無抑制作用。以上結(jié)果提示，大烏泡葉80%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇萃取部位為抑菌有效部位，均對(duì)細(xì)菌有較好的抑制效果，但對(duì)真菌抑制效果不佳。MIC測(cè)定結(jié)果顯示，大烏泡葉80%醇提物的乙酸乙酯部位對(duì)5種細(xì)菌的抑制作用最強(qiáng)，其次為正丁醇部位，80%醇提物的抑制效果最弱。MBC測(cè)定結(jié)果進(jìn)一步表明其乙酸乙酯部位抑菌效果最強(qiáng)。以上結(jié)果提示，大烏泡葉抑菌活性成分主要為中等極性的脂溶性組分，80%醇提物的乙酸乙酯部位可以作為抑菌活性部位應(yīng)用，從中尋找大烏泡葉的抑菌活性成分是今后研究的方向。

綜上所述，大烏泡葉80%醇提物及其乙酸乙酯、正丁醇萃取部位具有明顯的體外抑菌作用，該結(jié)論為大烏泡葉這一民間常用藥的合理開發(fā)利用提供了一定的實(shí)驗(yàn)依據(jù)，但對(duì)于其抑菌有效部位的具體活性成分以及抑菌機(jī)制仍有待進(jìn)一步研究。

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Study on in vitro Antibacterial Effect of Extracts from Miao Medicine Rubus multibracteatus Leaves

LIU Yao，CAI Jin，CHEN Rui，LIU Jiani，LIU Lina，HUANG Jing（School of Pharmacy，Guizhou Medical University，Guiyang 550025，China）

OBJECTIVE：To investigate in vitro antibacterial effect of extracts from Miao medicine Rubus multibracteatus leaves.METHODS：The aqueous extract and 80%ethanol extracts from R.multibracteatus leaves were used to prepare solution with mass concentration of 200 mg/mL.Using ampicillin and fluconazol as positive control（50 mg/mL），cup plate method was used to determine antibacterial effects of the extracts from R.multibracteatus leaves to Staphylococcus aureus，Staphylococcus epidermidis，Escherichia coli，Shigella dysenteriae，Proteus vulgaris，Candida albicans and Cryptococcus neoformans.The petroleum ether，acetic ether and n-butyl alcohol were used to extract 80%ethanol extracts in turns.After obtaining relevant extracts（50 mg/mL），cup plate method was used to investigate antibacterial effects of them to above 7 bacterial strains.The parts with antibacterial effects and bacterial strains sensitive to drug were screened.Micro-broth dilution method and agar culture medium plate method were used to determine minimum inhibitory concentration（MIC）and minimum bactericidal concentration（MBC）.RESULTS：The aqueous extract of R.multibracteatus leaves almost had no inhibitory effect while 80%ethanol extract showed different degrees of antibacterial effect to tested bacterial strains，and it also had higher activity against 5 bacterial stains than 2 fungus.The ethyl acetate and n-butyl alcohol fractions of 80%ethanol extracts showed good effect while the petroleum ether and water layer fractions had no antibacterial effect，and all the fractions of 80%ethanol extracts showed no inhibitory effect on fungus.To 5 bacterial stains，MIC and MBC of 80%ethanol extract were 6.25-12.5，12.5-25 mg/mL，those of ethyl acetate fractions were 3.13，6.25 mg/mL and those of n-butyl alcohol fraction were 3.13-6.25，6.25-12.5 mg/mL，respectively.CONCLUSIONS：80%ethanol extract of Miao medicine R.multibracteatus leaves and its ethyl acetate and n-butyl alcohol fractions have obvious in vitro antibacterial effect to bacteria.

Rubus multibracteatus leaves；Aqueous extract；Ethanol extract；Different fractions；in vitro antibacterial effect；Minimum inhibitory concentration；Minimum bactericidal concentration

R285；R965

A

1001-0408（2017）01-0072-04

2016-07-04

2016-10-25）

（編輯：林 靜）

貴州省科技計(jì)劃課題（No.黔科合ZY〔2011〕3005）

＊碩士研究生。研究方向：藥物制劑新劑型與新工藝、藥動(dòng)學(xué)。E-mail：574080864@qq.com

#通信作者：副教授，碩士。研究方向：藥物質(zhì)量控制、藥動(dòng)學(xué)。電話：0851-88416159。E-mail：huangjgy@sohu.com

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2017.01.19