陳道虎，劉 輝*

（1.海南醫(yī)學院第二附屬醫(yī)院心外科，海南 海口 570311；2.海南醫(yī)學院解剖教研室，海南 ?？?571199）

擴張型心肌病（Dilated cardiomyopathy DCM）是心血管死亡的主要原因，這是由于心臟逐漸擴大最終導致心力衰竭所致。DCM是非缺血性心力衰竭最常見的病因，占所有心力衰竭患者的30%-40%，是成人和兒童心臟移植的最常見原因，也是導致心臟猝死的主要原因[1]。在一部分患者中，DCM可能由于環(huán)境危險因素而發(fā)生，如病毒性心肌炎，心肌毒素和自身免疫性疾病。然而，大約50%的DCM患者沒有明顯的危險因素，因此這種DCM被歸類為“特發(fā)性”（Idiopathic Dilated cardiomyopathy IDCM）。在特發(fā)性DCM患者中，有25%～50%的病例有陽性家族史，被稱為家族性DCM，沒有陽性家族史被稱為則被散發(fā)性DCM?，F(xiàn)在，已發(fā)現(xiàn)超過50個基因的致病突變可引起特發(fā)性DCM。

瞬時受體電位melastatin蛋白4（transient receptor potential melastatin 4 TRPM4）屬于瞬時受體電位基因的大家族的成員，是一個鈣激活的非選擇性陽離子通道。最近發(fā)現(xiàn)TRPM4突變可引起家族性進行性心臟傳導阻滯，Brugada Syndrome和長QT間期綜合征。由于編碼Na離子通道SCN5A的突變可以引起心臟傳導阻滯，Brugada Syndrome，長QT間期綜合征和特發(fā)性DCM，我們在61個DCM患者中檢測了TRPM4基因，發(fā)現(xiàn)了1個突變。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

本課題患者為法國里昂市心血管醫(yī)院遺傳病門診收集的61例特發(fā)性DCM患者，其中男34例，占56%，女27例，占44%。年齡18～61歲，平均年齡（42.25±8.23）歲，診斷按照WHO 1980年特發(fā)性DCM診斷標準。對照組根據(jù)EVS資料庫線上資料（http：//evs.gs.washington.edu/EVS/）。特發(fā)性DCM組經(jīng)超聲心動圖測量左室射血分數(shù)（LVEF），并且經(jīng)過問詢后確認均為單發(fā)病例無家族史。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準并獲得所有患者或者患者家屬的知情同意。所有患者均抽取20～50 mL外周靜脈血。

1.2 遺傳學分析

根據(jù)標準程序提取DNA。使用High Resolution Melting（HRM）分析進行突變掃描（Rotor-Gene Q Qiagen France），對發(fā)現(xiàn)的異常樣本進行雙向測序。使用已發(fā)表的引物。

2 結 果

在61位特發(fā)性DCM患者中，我們發(fā)現(xiàn)一位51歲患者攜帶有TRPM4基因突變（c.2531G＞R；p.Gly844Asp），見圖1，這個氨基酸在進化過程中是保守的。見圖2，這個突變經(jīng)過線上工具Sift，MutationTaster，Polyphen2計算，認定致病性突變。

圖1 患者攜帶的突變TRPM4 c.2531G＞R；p.Gly844Asp

圖2 突變所在區(qū)域的氨基酸排序，Gly標記為紅色。

3 討 論

雖然DCM的病理生理學眾所周知，其潛在的遺傳機制為這種疾病仍然不清楚，這是心肌病患者TRPM4基因功能分析的首例報道，我們介紹了心肌病的致病突變及其發(fā)病機制。我們的數(shù)據(jù)支持以前的發(fā)現(xiàn)，TRPM4基因可能與心肌病有關，在這項研究中，我們使用Sanger測序來鑒定DCM患者中TRPM4基因的致病性突變。TRPM4基因被認為在心肌病中起重要作用。我們驗證并確認了在DCM患者組中存在TRPM4基因突變。我們測序了61名患者和DNA，在系統(tǒng)突變篩選之后我們鑒定了1個突變攜帶者。這個突變已經(jīng)被報道，功能研究被認為是獲得性功能突變。這個TRPM4基因突變通過線上工具SIFT，PP2和Mutation taster的科學方法對突變進行鑒定，被認為可能導致?lián)p害或病變（c.2531G＞R；p.Gly844Asp）。見圖1

3 結 論

這是首次在心肌病患者中描述TRPM4基因變異的研究。雖然本研究納入的心肌病患者數(shù)量相對較少，但我們在TRPM4基因的外顯子17中確定了1個突變。預測軟件表明這個變異可能具有潛在的損傷和疾病。我們的發(fā)現(xiàn)需要更大患者群體的驗證。

[1]高敏心肌肌鈣蛋白T在擴張型心肌病患者中的臨床意義[J].國際心臟雜志2015;56(3):309-13.