恩施州地方茶樹(shù)種質(zhì)資源研究初報(bào)

崔清梅，張 強(qiáng)，梁金波，李 慧，羅 鴻，楊亞軍

(1.恩施土家族苗族自治州農(nóng)業(yè)科學(xué)院，湖北 恩施 445000；2.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，浙江 杭州 310008)

茶樹(shù)種質(zhì)資源是茶樹(shù)種質(zhì)創(chuàng)新、品種選育、生產(chǎn)利用的物質(zhì)基礎(chǔ)，發(fā)掘和利用優(yōu)異的種質(zhì)資源對(duì)保障茶產(chǎn)業(yè)可持續(xù)健康發(fā)展具有重要的作用。恩施早在唐代茶圣陸羽所撰茶經(jīng)中就有“茶者，南方之佳木也，一尺，二尺，乃至數(shù)十尺，巴山峽川有兩人合抱者”的記載，距今應(yīng)有2000多年了。明朝永樂(lè)大帝朱棣品飲利川貢茶后，親自為白鶴井、霧洞茶題寫(xiě)碑文。明顧元慶《茶譜》云：“茶之產(chǎn)于天下多矣，若劍南有蒙頂石花……巴東有真香……其名皆著”[1]。因此對(duì)恩施州茶樹(shù)資源進(jìn)行考察收集，對(duì)于茶樹(shù)種質(zhì)資源開(kāi)發(fā)利用、論證茶的起源和演化都具有重要的意義，對(duì)恩施州茶業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和茶葉科學(xué)的深入研究具有重要作用。

恩施的茶樹(shù)種質(zhì)資源收集、征集保存和開(kāi)發(fā)利用始于20世紀(jì)80年代，原恩施地區(qū)特產(chǎn)局組織了恩施、巴東、宣恩、利川、鶴峰等五縣(市)進(jìn)行了茶樹(shù)地方品種資源的普查工作，選出優(yōu)良單株22個(gè)。后對(duì)22個(gè)優(yōu)良單株進(jìn)行集中扦插繁殖，在恩施芭蕉茶科站、鶴峰走馬茶科所開(kāi)始進(jìn)行品種選育比較試驗(yàn)。1986年，在宣恩中壩鄉(xiāng)香樹(shù)林村開(kāi)始著重對(duì)宣恩的幾個(gè)品系進(jìn)行品比試驗(yàn)。同年，在巴東縣神農(nóng)溪溪丘灣興隆二隊(duì)發(fā)現(xiàn)大茶樹(shù)，樹(shù)高390 cm，樹(shù)幅477 cm，小喬木型，芽葉綠色。90年代后，由于歷史的原因，茶葉科研中斷，部分大茶樹(shù)和特異資源由于保護(hù)不當(dāng)、水土流失、品種的更新?lián)Q代等原因已消失。2004年恩施州成立茶葉研究所后，對(duì)本地特色資源進(jìn)行有效的擴(kuò)繁保存、研究和利用；開(kāi)展了恩施地方茶樹(shù)種質(zhì)資源的考察工作，對(duì)恩施地區(qū)茶樹(shù)資源進(jìn)行了重新梳理，為保障恩施州茶業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和充分發(fā)揮地方茶葉產(chǎn)品特色提供品種資源的支撐。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

恩施市的金星坡、蔣家坡、冬瓜片、戽口、黃連溪、朱砂溪，宣恩慶陽(yáng)壩、香樹(shù)嶺、七姊妹山，鶴峰走馬、咸豐小村、利川沙溪、巴東溪丘灣、來(lái)鳳大河、建始麻札坪等重點(diǎn)產(chǎn)茶鄉(xiāng)鎮(zhèn)的茶樹(shù)種質(zhì)資源共計(jì)183份。

1.2 試驗(yàn)方法

1.2.1 農(nóng)藝和生物學(xué)性狀的觀測(cè) 觀測(cè)項(xiàng)主要包括地理元素、樹(shù)高、樹(shù)幅、樹(shù)型、樹(shù)姿、分枝密度、葉片性狀、芽葉茸毛、花果特性。具體觀測(cè)方法參照《茶樹(shù)栽培學(xué)》[2]和《茶樹(shù)種質(zhì)資源描述規(guī)范和數(shù)據(jù)標(biāo)準(zhǔn)》[3]。

1.2.2 生化成分的測(cè)定 樣品制備方法：經(jīng)鮮葉采摘、殺青、烘干3個(gè)步驟。其中鮮葉采摘標(biāo)準(zhǔn)為一芽二葉及同等嫩度的對(duì)夾葉；殺青采用微波爐殺青，中高溫2 min；烘干采用柜式提香機(jī)，溫度80℃，時(shí)間2 h。

水浸出物測(cè)定，參照GB/T 8305-2013；茶多酚總量的測(cè)定參照GB/T 8313-2008，采用福林酚(Folin-Ciocalten)比色法[4]；游離氨基酸總量的測(cè)定參照GB/T 8314-2013，采用茚三酮顯色法[5]；咖啡堿和兒茶素總量的測(cè)定采用高效液相色譜法[6]。

2 結(jié)果與分析

2.1 農(nóng)藝和生物學(xué)特征

恩施州茶樹(shù)種質(zhì)資源的總體農(nóng)藝和生物學(xué)特征是：樹(shù)型以灌木型居多；葉片肥大，小葉種較少；葉形以橢圓形為主，長(zhǎng)橢圓形次之；葉面微隆起，葉身以稍背卷為主，葉質(zhì)以硬脆為主，葉色深綠(或綠)；內(nèi)含物豐富，適制性廣，抗逆性強(qiáng)。恩施州茶樹(shù)種質(zhì)資源的花瓣數(shù)及花萼數(shù)均為4～7 片，花冠直徑為2.8～5.2 cm，花柱長(zhǎng)度為0.8～1.8 cm，種子直徑為0.9～1.9 cm，子房茸毛多，種皮光滑。詳見(jiàn)表1。

2.2 生化成分特征

測(cè)定了恩施州茶樹(shù)種質(zhì)資源的主要生化成分(水浸出物、茶多酚、游離氨基酸總量、咖啡堿、兒茶素總量)。結(jié)果表明，水浸出物含量為33.12%～55.94%，其中含量最低的是恩施市白楊坪大茶樹(shù)，最高的是枇杷茶。茶多酚含量為11.53%～25.42%，其中含量最低的是恩施白楊坪大茶樹(shù)，最高的是恩施盛家壩歐站長(zhǎng)家。游離氨基酸總量為2.22%～7.04%，其中含量最低的是枇杷茶，最高的是恩施盛家壩彭家?guī)r的單株。兒茶素總量為107.02～209.22 mg·g-1，其中含量最高的是利川忠路老茶樹(shù)16號(hào)，最低的是鶴峰走馬鄉(xiāng)宮頂村單株?？Х葔A含量為23.22～47.15 mg·g-1，其中含量最低的是白楊坪大茶樹(shù)，最高的是利川忠路64號(hào)單株。詳見(jiàn)表2。

表1 恩施州地方茶樹(shù)種質(zhì)資源的農(nóng)藝和生物學(xué)特征

表2 恩施州地方茶樹(shù)種質(zhì)資源的生化成分特征

2.3 代表性茶樹(shù)種質(zhì)資源篩選

恩施州茶樹(shù)資源具有豐富的遺傳多樣性，具有較多優(yōu)異性狀，如高茶多酚、高茶氨酸、高兒茶素等，可以從中篩選一批生化成分比較特異的資源，作為育種材料。為保證恩施州的茶樹(shù)種質(zhì)資源不再繼續(xù)丟失，恩施州農(nóng)科院茶葉研究所建立了茶樹(shù)種質(zhì)資源圃15畝，共保存資源200余份，初步對(duì)這些資源的發(fā)芽期、葉形、葉色等形態(tài)特征進(jìn)行觀測(cè)，對(duì)資源圃?xún)?nèi)所有資源制樣并進(jìn)行初步審評(píng)，確定了19份資源作為重點(diǎn)保護(hù)對(duì)象，為將來(lái)新品種選育奠定基礎(chǔ)。

在資源的收集、鑒定過(guò)程中，通過(guò)對(duì)收集的資源進(jìn)行整理、分類(lèi)、核實(shí)、歸檔，對(duì)拍攝資源的照片進(jìn)行整理歸類(lèi)，一一進(jìn)行核實(shí)，保證數(shù)據(jù)照片的真實(shí)性可靠性，對(duì)每份資源按照基本信息、形態(tài)特征、生物學(xué)特性、品質(zhì)特性等進(jìn)行描述，下一步準(zhǔn)備進(jìn)一步完善資源信息，編輯程序建立恩施地方種質(zhì)資源數(shù)據(jù)庫(kù)。恩施州地方茶樹(shù)種質(zhì)資源代表性資源如下。

2.3.1 大茶樹(shù)

(1)碾盤(pán)大茶樹(shù)：位于恩施市龍鳳鎮(zhèn)碾盤(pán)村。喬木型，樹(shù)高6.5 m，樹(shù)幅5 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密，葉長(zhǎng)11.5 cm，葉寬4.7 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，兒茶素總量為15.96 mg·g-1，氨基酸總量為2.8%，水浸出物為46.76%，茶多酚含量為21.17%，咖啡堿含量為4.14 mg·g-1。

(2)白楊坪大茶樹(shù)：位于恩施市白楊坪鄉(xiāng)熊家?guī)r村。喬木型，樹(shù)高5.2 m，樹(shù)幅3 m。樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密度中等，葉長(zhǎng)12.4 cm，葉寬5.27 cm，大葉種，葉形長(zhǎng)橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，兒茶素總量為16.01 mg·g-1，氨基酸總量2.89%，水浸出物為40.69%，茶多酚總量為19.18%，咖啡堿含量為2.39 mg·g-1。

(3)鶴峰大茶樹(shù)：位于鶴峰縣容美鎮(zhèn)龍井村。喬木型，樹(shù)高5.2 m，樹(shù)幅3.5 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密度稀，葉長(zhǎng)9.33 cm，葉寬3.37 cm，中葉種，葉形長(zhǎng)橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，葉質(zhì)柔軟，兒茶素總量為15.76 mg·g-1，氨基酸總量為2.99%，水浸出物為52.72%，茶多酚總量為17.67%，咖啡堿含量為2.76 mg·g-1。

(4)盛家壩老茶樹(shù)：位于恩施市盛家壩鄉(xiāng)二宮寨村。小喬木型，樹(shù)高3.2 m，樹(shù)幅3.5 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密度中等，葉長(zhǎng)7.5 cm，葉寬3.5 cm，小葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖鈍尖，茸毛少，葉質(zhì)硬脆，兒茶素總量為12.90 mg·g-1，氨基酸總量為4.88%，水浸出物為44.70%，茶多酚總量為17.45%，咖啡堿含量為2.68 mg·g-1。

(5)文斗大茶樹(shù)：位于利川市文斗鄉(xiāng)中臺(tái)村。小喬木型，樹(shù)高2.5 m，樹(shù)幅3.5 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密，特大葉種，葉形長(zhǎng)橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)柔軟，芽葉色澤綠，兒茶素總量17.95 mg·g-1，氨基酸總量2.83%，水浸出物為47.86%，茶多酚總量為18.11%，咖啡堿含量為3.54 mg·g-1。

(6)忠路大茶樹(shù)16：位于利川市忠路鄉(xiāng)胡家塘村。灌木型，樹(shù)高2.5 m，樹(shù)幅2.5 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，葉長(zhǎng)8.7 cm，葉寬3.75 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)中，兒茶素總量20.92 mg·g-1，氨基酸總量2.58%，水浸出物為50.74%，茶多酚總量為21.5%，咖啡堿含量為3.74 mg·g-1。

(7)冬瓜片老茶樹(shù)：位于恩施市芭蕉鄉(xiāng)朱砂溪村。灌木型，樹(shù)高3.5 m，樹(shù)幅2.5 m，樹(shù)姿直立，分枝密，小葉種，葉形橢圓，葉色黃綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)柔軟，兒茶素總量14.13 mg·g-1，氨基酸總量2.96%，水浸出物為48.67%，茶多酚總量為16.54%，咖啡堿含量為3.49 mg·g-1。

2.3.2 適制紅茶的優(yōu)良單株

(1)宣苔27：位于宣恩慶陽(yáng)老寨村。小喬木型，樹(shù)高250 cm，樹(shù)幅155 cm，樹(shù)姿開(kāi)張，分枝密，葉長(zhǎng)11.5 cm，寬5.2 cm，大葉種，葉形橢圓，葉色深綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)柔軟，氨基酸總量3.4%，水浸出物為47.0%，茶多酚總量為32.0 mg·g-1。

(2)宣苔65：位于宣恩中壩村。屬自然三倍體，花而不實(shí)。灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密度中，葉長(zhǎng)11 cm，葉寬5 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)柔軟，兒茶素總量18.47 mg·g-1，氨基酸總量2.84%，水浸出物為54.10%，茶多酚總量為21.07%，咖啡堿含量為4.08 mg·g-1。

(3)冷后渾：位于利川毛壩鄉(xiāng)五二村。灌木型，樹(shù)姿開(kāi)張，分枝密，葉長(zhǎng)6.7 cm，葉寬2.8 cm，小葉種，葉形長(zhǎng)橢圓形，葉色深綠，葉尖園尖，葉背茸毛少，果實(shí)球形，種皮棕褐色。

(4)宣苔29：位于宣恩縣曉關(guān)鄉(xiāng)橦子營(yíng)村。灌木型，樹(shù)高2.5 m，樹(shù)幅2 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝中，中葉種(葉長(zhǎng)9 cm，葉寬4.5 cm)，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)中，發(fā)芽早于福云6號(hào)。

2.3.3 適制綠茶的優(yōu)良單株

(1)不發(fā)酵茶：位于恩施市芭蕉鄉(xiāng)高拱橋村。灌木型，分枝密度密，葉長(zhǎng)9.83 cm，葉寬4.4 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色黃綠，葉尖漸尖，茸毛少，葉質(zhì)柔軟，兒茶素總量10.85 mg·g-1，氨基酸總量3.73%，水浸出物為43.27%，茶多酚總量為16.55%，咖啡堿含量為4.06 mg·g-1。

(2)茶山1號(hào)：位于恩施市芭蕉鄉(xiāng)燈籠壩村。灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密度中，葉長(zhǎng)9.5 cm，葉寬4.2 cm，中葉種，葉形橢圓，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)柔軟，芽葉色澤黃綠，茸毛多，兒茶素總量18.62 mg·g-1，氨基酸總量2.79%，水浸出物為52.46%，茶多酚總量為21.86%，咖啡堿含量為3.48 mg·g-1。

(3)恩苔2號(hào)：位于鶴峰縣走馬鎮(zhèn)宮頂村。灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密，中葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛少，兒茶素總量16.09 mg·g-1，氨基酸總量3.34%，水浸出物為52.45%，茶多酚總量為17.94%，咖啡堿含量為3.05 mg·g-1。

(4)太陽(yáng)河1號(hào)：位于恩施市太陽(yáng)河鄉(xiāng)白果樹(shù)村，海拔1477.5 m。灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密，葉長(zhǎng)10.17 cm，葉寬3.67 cm，中葉種，葉形長(zhǎng)橢圓，葉色黃綠，葉尖急尖，茸毛少，葉質(zhì)柔軟，果實(shí)三角形，兒茶素總量14.25 mg·g-1，氨基酸總量4.28%，水浸出物為44.63%，茶多酚總量為17.46%，咖啡堿含量為3.81 mg·g-1?？购阅軓?qiáng)。

(5)太陽(yáng)河4號(hào)：位于恩施市太陽(yáng)河鄉(xiāng)白果樹(shù)村，海拔1477米。灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝中，葉長(zhǎng)9.9 cm，葉寬4.2 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛多，葉質(zhì)柔軟，兒茶素總量12.60 mg·g-1，氨基酸總量5.09%，水浸出物為44.42%，茶多酚總量為18.94%，咖啡堿含量為3.0 mg·g-1?？购阅軓?qiáng)。

2.3.4 變異植株

(1)花枝茶：位于恩施市屯堡鄉(xiāng)花枝山村，因茶樹(shù)為自然變異體，枝條畸曲，呈“S”形扭曲，形似花枝而得名。灌木型，樹(shù)高達(dá)2 m，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密度中等，葉片長(zhǎng)11.2～12.4 cm，寬5.4～5.5 cm，大葉種，葉形橢圓，葉色深綠，葉尖鈍尖，葉質(zhì)較軟，茸毛少，鮮葉略帶花香，兒茶素總量16.78 mg·g-1，氨基酸總量2.55%，水浸出物53.05%，茶多酚總量為21.7%，咖啡堿含量為2.92 mg·g-1。

(2)利川忠路拐拐茶：位于利川市忠路鎮(zhèn)城池村，野生種，海拔734.5 m，灌木型，樹(shù)姿直立，葉長(zhǎng)12 cm，葉寬5.8 cm，大葉種，葉形披針形，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛少，葉質(zhì)中，芽葉色澤玉白，芽葉茸毛多，果實(shí)球形。

(3)枇杷茶：位于宣恩縣椒園鎮(zhèn)慶陽(yáng)壩村，小喬木型，樹(shù)姿直立，分枝密度中，葉長(zhǎng)12.25 cm，葉寬5.25 cm，大葉種，葉形橢圓，葉色綠，葉尖漸尖，茸毛多，兒茶素總量18.74 mg·g-1，氨基酸總量2.22%，水浸出物為55.94%，茶多酚總量為21.13%，咖啡堿含量為2.56 mg·g-1。

(4)紫芽茶1：位于恩施市芭蕉鄉(xiāng)朱砂溪村，灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝密，葉長(zhǎng)10.5 cm，葉寬4.6 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色深綠，葉尖鈍尖，茸毛少，葉質(zhì)硬脆，芽葉紫綠，兒茶素總量15.22 mg·g-1，氨基酸總量2.52%，水浸出物為51.05%，茶多酚總量為20.65%，咖啡堿含量為3.55 mg·g-1。

(5)紫芽茶2：位于恩施市芭蕉鄉(xiāng)朱砂溪村，灌木型，樹(shù)姿半開(kāi)張，分枝中，葉長(zhǎng)10 cm，葉寬4.2 cm，中葉種，葉形橢圓，葉色深綠，葉尖漸尖，茸毛少，芽葉紫綠，兒茶素總量17.10 mg·g-1，氨基酸總量3.58%，水浸出物為51.75%，茶多酚總量為23.15%，咖啡堿含量為3.88 mg·g-1。

(6)北風(fēng)茶：位于利川市毛壩鎮(zhèn)五二村，灌木型，樹(shù)姿開(kāi)張，分枝密度中，中葉種(葉長(zhǎng)10.5 cm，葉寬4.3 cm)，葉形長(zhǎng)橢圓，葉色黃，葉尖鈍尖，茸毛少，葉質(zhì)柔軟，芽葉玉白色，果實(shí)腎形，種子似腎形，種皮棕褐色。

3 結(jié)論與討論

茶樹(shù)種質(zhì)資源是品種創(chuàng)新、生產(chǎn)直接利用或生物技術(shù)研究的物質(zhì)基礎(chǔ)[8]，茶樹(shù)種質(zhì)資源越多，掌握的育種材料就會(huì)越豐富；對(duì)茶樹(shù)種質(zhì)資源的研究越深入，育種的預(yù)見(jiàn)性就越強(qiáng)，就更有可能不斷地培育出高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)的新品種。本項(xiàng)目通過(guò)對(duì)恩施州茶樹(shù)種質(zhì)資源的發(fā)掘、收集、整理，結(jié)果表明：

(1)恩施州茶樹(shù)資源分布廣泛，本課題調(diào)查表明，恩施州八縣市包括恩施市、宣恩縣、鶴峰縣、咸豐縣、利川市、巴東縣、來(lái)鳳縣、建始縣在內(nèi)多個(gè)鄉(xiāng)、鎮(zhèn)均有優(yōu)異茶樹(shù)資源的存在。

(2)恩施州茶樹(shù)資源非常豐富，具有較多的遺傳多樣性。從樹(shù)形來(lái)看，不僅有較多的喬木型大茶樹(shù)，而且有半喬木型、灌木型茶樹(shù)，其中以灌木型茶樹(shù)最多，變異系數(shù)樹(shù)幅、樹(shù)高分別為75.7、47.3。從葉形來(lái)看，以中葉類(lèi)茶樹(shù)品種居多，大葉類(lèi)其次、小葉類(lèi)最少；從適制性來(lái)看，以適宜制作綠茶、紅茶的茶樹(shù)居多，酚氨比變異系數(shù)達(dá)到25.4。從生化成分來(lái)看，具有優(yōu)異性狀的資源非常多，如高茶多酚、高茶氨酸、高兒茶素、高水浸出物等，其中水浸出物含量客觀表明了恩施茶樹(shù)優(yōu)異的品質(zhì)特征。除此之外，其他特異性狀的茶樹(shù)資源如花枝茶、耐寒性強(qiáng)的茶樹(shù)資源也有很多。

(3)恩施州具有極為豐富的茶樹(shù)種質(zhì)資源，作好當(dāng)?shù)夭铇?shù)種質(zhì)資源的保護(hù)與利用工作，理清資源間的遺傳關(guān)系，對(duì)茶樹(shù)種質(zhì)資源保護(hù)及種質(zhì)資源庫(kù)的建立具有重要意義，對(duì)未來(lái)茶樹(shù)良種選育具有不可估量的作用。對(duì)于已經(jīng)收集整理的種質(zhì)資源就必須進(jìn)行保存，以供短期或長(zhǎng)期研究利用[9]及合作、交流，更深層的對(duì)恩施州地方茶樹(shù)資源進(jìn)行創(chuàng)新研究，對(duì)特異資源進(jìn)行保護(hù)和開(kāi)發(fā)，充分發(fā)揮恩施州茶樹(shù)資源“聚寶盆”的作用。

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